抗cd20抗体和抗gm-csf抗体的治疗性组合产品及其用途
【专利摘要】本公开描述了抗-CD20抗体和抗GM-CSF抗体的药物组合产品。所述组合在B细胞恶性肿瘤和炎性病变的治疗中高度有效。
【专利说明】抗CD20抗体和抗GM-CSF抗体的治疗性组合产品及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
本申请要求于2011年7月6日提交的美国临时申请序列号61/504，744的优先权，其整体通过引用并入。
发明领域
[0002]本申请涉及用于治疗炎性病变，例如类风湿性关节炎和多发性硬化，和血液学病变，例如B细胞恶性肿瘤的联合治疗。
【背景技术】
[0003]CD20
⑶20是在所有的成熟B细胞的表面上表达的糖基化磷蛋白。在人中，⑶20由MS4A1基因编码。此基因编码跨膜4A基因家族的成员。这个新生的蛋白质家族的成员表征为共同的结构特征和相似的内含子/外显子剪接边界，并且在造血细胞和非淋巴组织之中显示独特的表达模式。这个基因编码在B细胞至浆细胞的发育和分化中发挥作用的B-淋巴细胞表面分子。这个家族成员定位到llql2，在家族成员的簇之中。这个基因的可变剪接产生编码相同蛋白质的两个转录物变体。CD20表达在除第一阶段和最后阶段之外的B细胞发育的所有阶段；其通过记忆细 胞从晚期祖B细胞呈递，但不在早期祖B细胞或浆母细胞和浆细胞上。其见于B-细胞淋巴瘤、多毛细胞白血病、B-细胞慢性淋巴细胞白血病和黑色素瘤癌症干细胞上。
[0004]CD20是多种单克隆抗体(mAb)的目标，例如，利妥昔单抗、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)和托西莫单抗(tositumomab),这些都是在所有B细胞淋巴瘤和白血病的治疗中的活性剂。2009年10月，FDA批准了抗-CD20抗体，奥法木单抗(ofatumumab (Genmab)),用于慢性淋巴细胞白血病。多种其他抗-⑶20抗体治疗剂在(或曾在)开发中，包括AME_133v (Applied Molecular Evolution)、奥瑞珠单抗(ocrelizumab) (Roche, Biogen Idee) > TRU-015 (Trubion),和 IMMU-106 (维妥珠单抗(veltuzumab) ;Immunomedics)。
[0005]抗体FMC7显示识别也被称为FMC7抗原的⑶20构象变体。
[0006]GM-CSF
GM-CSF (粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)是由巨噬细胞、T细胞、肥大细胞、内皮细胞和成纤维细胞分泌的蛋白质。GM-CSF是作为白血细胞生长因子发挥作用的细胞因子。GM-CSF刺激干细胞以产生粒细胞(嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和单核细胞。单核细胞脱离循环并迁移到组织中，随之它们成熟为巨噬细胞。因此，它是免疫/炎性级联的部分，由此，少数的巨噬细胞的活化能够快速地导致其数量的增加，这是对抗感染的关键过程。活性形式的所述蛋白质在细胞外作为单体被发现。人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在其成熟形式中是糖基化的。GM-CSF以高水平见于患有类风湿性关节炎的关节中，并且阻断GM-CSF可减轻炎症或损伤。[0007]正在开发一些治疗剂(例如M0R103)以阻断GM-CSF，例如M0R103 (MorphoSys)，一种抗GM-CSF单克隆抗体。在开发中的其他抗GM-CSF抗体治疗剂包括KB002和KB003(KaloBios),以及MT203 (Micromet and Nycomed)。其他公司也开发或已经开发了抗GM-CSF 抗体，例如，Morphotek、Evec、Boehringer Ingelheim 和 Amgen。
[0008]联合治疗
尽管抗CD20单克隆抗体和抗GM-CSF单克隆抗体单独使用，或与其他试剂在联合治疗中使用，但它们从未一起在疾病的治疗中使用。用于炎性病变的治疗的抗GM-CSF单克隆抗体在开发中。抗⑶20单克隆抗体主要用于B细胞恶性肿瘤的治疗，但也用于类风湿性关节炎。此外，抗CD20单克隆抗体在用于多发性硬化的临床实验中显示出有希望的结果。然而，对于患有上述疾病和病变的患者，仍迫切需要新颖且优良的治疗。某些公开粗略地提到抗CD20单克隆抗体与GM-CSF或源自GM-CSF的肽的潜在联合治疗，例如W02010115554、W02000027428 ； W02000047228 和 W0200306棚21 ,但都没有举例说明与抗GM-CSF单克隆抗体的组合产品。
[0009]Sakagami 等人(Am J Respir Crit Care Med (2010) 182, 49-61)报道了抗GM-CSF自身抗体能够在健康动物中复制肺泡蛋白沉着症(PAP)的分子、细胞和组织学特征。Sakagami等人利用从经过活组织检查证实的PAP患者分离的多克隆GM-CSF自身抗体。Sakagami等人没有报道或暗示使用抗GM-CSF抗体的治疗,而是与此相反地显示这些抗GM-CSF抗体能够导致或诱导某些疾病或症状，即PAP。因此，Sakagami等人没有公开使用抗GM-CSF抗体的任何疾病的治疗，特别是没有使用任何单克隆抗GM-CSF抗体。在其原稿中，Sakagami等人还报道了在这样的抗GM-CSF自身抗体的存在下,抗⑶20介导的B细胞消耗强烈增加并且B细胞重建受到强烈抑制的巧合发现。然而，目前没有能够解释此发现的机理。
[0010]此外，有报道反对抗-⑶20-抗-GM-CSF联合治疗的有用性。参见Kavuru等人(EurRespir J.2011 38:136 1-7)和 Vallerskog等人(Clin Immunol (2007) 122，62-74)。尽管在Kavuru的报道中事实上在抗GM-CSF抗体的存在下使用抗CD20单克隆抗体，但二者均显示在使用抗CD20单克隆抗体治疗后相似水平的B-细胞消耗。此发现表明，抗GM-CSF抗体的存在没有提高抗CD20单克隆抗体在消耗B细胞中的效力。Kavuru等人显示在患有特发性肺泡蛋白沉着症(PAP)的患者中，在使用利妥昔单抗(一种抗CD20单克隆抗体)治疗后，B细胞被消耗。PAP表征为抗GM-CSF抗体的存在。在治疗后约6个月观察到B细胞群体的恢复。Vallerskog等人研究了在患有系统性红斑狼疮(SLE)的患者中，在使用利妥昔单抗治疗后的B细胞消耗。他们发现同样在治疗后约6个月的B细胞恢复。然而，与PAP相反，SLE患者不表征为抗GM-CSF自身抗体。因此，由Kavuru等人和Vallerskog等人的研究中获得的类似结果反而表明，与单独的抗CD20单克隆抗体相比，抗CD20与抗GM-CSF抗体的组合产品没有增加B细胞消耗。
[0011]发明概述
在某些方面，本发明涉及CD20特异性抗体与GM-CSF特异性抗体的协同组合产品，其用于在医药中的用途。在某些优选的方面，所述CD20特异性抗体和GM-CSF特异性抗体是单克隆抗体。
[0012]所述协同组合产品可用于治疗B细胞恶性肿瘤，包括非霍奇金淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、MALT (粘膜相关淋巴组织)淋巴瘤、多毛细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、B-细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞淋巴瘤(例如各种形式的霍奇金病、B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)、白血病(例如，急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL ;也称为B细胞慢性淋巴细胞白血病BCLL)、多毛细胞白血病和慢性成肌细胞白血病)和骨髓瘤(例如，多发性骨髓瘤)。
[0013]所述协同组合产品还可用于治疗炎性病变，包括溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、炎性肠病、类风湿性关节炎、肌炎、多发性硬化、视神经脊髓炎、动脉粥样硬化、牛皮癣、系统性红斑狼疮、肾炎、肾小球肾炎、自身免疫性肝胆疾病、移植物抗宿主病、特应性皮炎、哮喘、神经变性疾病(例如，阿尔茨海默病)、脱髓鞘性多发性神经根病、神经性疼痛、动脉粥样硬化、年龄相关性黄斑变性、糖尿病肾病、结节病起源的葡萄膜炎，或糖尿病。
[0014]在某些方面，本发明的协同组合产品的成分分离地施用。所述⑶20特异性抗体可以在所述GM-CSF特异性抗体之前施用。可选择地，所述GM-CSF特异性抗体可以在所述CD20特异性抗体之前施用。在某些方面，本发明的协同组合产品的成分同时施用，或在大约相同的时间施用。
[0015]可使用任何CD20特异性抗体实施本发明，包括利妥昔单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗、Bexxar、奥法木单抗、奥瑞珠单抗、BLX-301、维妥珠单抗、DXL625或在本发明中提到的或本领域中已知的任何其他CD20特异性抗体。同样，可使用任何GM-CSF特异性抗体实施本发明，包括 M0R103,或在 W02006111353 > US20090297532、W02007049472
、US20080317757> W020090643的、US20100122819 >W02003068920、
US20040053365、 W02007092939、 US20080292641、W02008141391
`、US20100297135、 W02009038760、 US 12/675,013、W02009062238、
US20100297135、 W02009134S05、 US20090274706、W02010124163、
US20100291075中公开的任何一种抗GM-CSF抗体，或在本发明中提到的或本领域中已知的任何其他GM-CSF特异性抗体。在某些方面，所述GM-CSF特异性抗体包含序列GFTFSSYWMN 的 HCDRl 区域、序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列
GFGTDF 的 HCDR3 区域、序列 S6DSIGKKYAY 的 LCDRl 区域、序列 KKRPS 的 LCDR2 区域，和序列SAWGDKGM的LCDR3区域。
[0016]附图简述
图1显不了 M0R04357的氣基酸序列和DNA序列。
【发明内容】
[0017]“协同性”、“协同作用”或“协同的”是指大于组合产品的预期的加性效应。在本文中，通过Chou等人和/或Clarke等人的方法确定组合产品的“协同性”、“协同作用”或“协同的”效应。参见Ting-Chao Chou, Theoretical Basis, Experimental Design, and Computerized Simulationof Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies, Pharmacol Rev 58:621-681(2006丨,其整体通过引用并入。还参见Clarke等人，ISSUeS (Πexperimental design and endpoint analysis in the study of experimental cytotoxic agentsin vivo in breast cancer and other models, Breast Cancer Research and Treatment
46:255-278《1997),其整体通过引用并入。
[0018]术语“抗体”是指单克隆抗体，包括任何同种型，例如IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。IgG抗体由通过二硫键连接的两条相同的重链和两条相同的轻链组成。每条重链和轻链包含恒定区和可变区。每个可变区包含被称作“互补决定区”(〃CDRs〃)或“高可变区”的三个区段，其主要负责结合抗原的表位。它们被称作⑶R1、⑶R2和⑶R3，从N-末端依次编号。在CDR外面的可变区的更为高度保守的部分被称作“框架区”。“抗体片段”是指Fv、scFv、dsFv、Fab、Fab’ F (ab’)2片段，或其他片段，其包含各自包含⑶R和框架区的至少一个可变重链或可变轻链。
[0019]术语“单克隆”理解为具有在本领域中通常归属于它的含义，即由单个克隆的抗体生产细胞(例如B细胞)产生，并且在抗原结合时识别单个表位的抗体或抗体片段。
[0020]〃VH〃是指抗体或抗体片段的免疫球蛋白重链的可变区。〃VL〃是指抗体或抗体片段的免疫球蛋白轻链的可变区。
[0021]在本文中，〃⑶R〃通过Chothia等人或Kabat等人限定。参见ChOthia
Cs Lesk AM, (1987) Canonical structures for the hypervariable regions of
immunoglobulins.J Mol BioL 196(4):901 -17+,其整体通过弓丨用并入。参见
Kabat E,A, Wu Τ,Τ,, Pe`rry H.M,, Gottesman K.S.and FoelIer C,《1991),Sequences of Proteins of immunological Interest.5th edit, NIH Publication n0.91*3242,
US Dept of Health and Human Services, Washington, DC,其整体通过引用并入。
[0022]术语"GM-CSF"和"GMCSF"是指被称作GM-CSF或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的蛋白质，具有以下同义词:集落刺激因子2、05?2、61?^?、61^5?、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、MGC131935、MGC138897、莫拉司亭(Molgramostin)、沙格司亭(Sargramostim)。人GM-CSF具有(UniProt P04141)的氨基酸序列:
MWLQSLLLLGTVACSISAPARSPSPSTQPWEHVNAIQEARRLLNLSRDTAAEM
NETVEVISEMFDLQEPTCLQTRLELYKQGLRGSLTKLKGPLTMMASHYKQHCP
PTPETSCATQItTFESFKENLKDFLLViPFOCWEPVQE 。
[0023]〃M0R103〃是抗GM-CSF抗体，它的氨基酸序列和DNA序列提供在图1中。〃M0R103〃和〃M0R04357〃和〃M0R4357〃作为同义词，用于描述图1中所示的抗体。M0R04357包含序列 GFTFSSYWMN 的 HCDRl 区域、序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列GFGTDF 的 HCDR3 区域、序列 SGDSIGKKYAY 的 LCDRl 区域、序列 KKRPS 的 LCDR2 区域,和序列SAWGDKGM的LCDR3区域。M0R04357包含序列
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMNW VRQAPGKGLEWVSGiENKYAGGATYYAASVKGRFT1SRD__TLYLQMNSLfME DTAVYYCARGFCTDFWGQGTLV
TVSS的可变重链，和序列DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDSIGKKYAYWYQQKPGQAPVLVIYKKRPSGIPERF
sgsnsgntatlhsgtoaedeadyycsawgokgmwgggtklwlgq 的可变轻链。
[0024]在某些实施方式中，所述GM-CSF特异性抗体是与包含序列GFTFSSYWMN的 HCDRl 区域、序列 GfENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列 GFGTDF 的
HCDR3区域、序列SGDSIGKKYAY的LCDRl区域、序列KKRPS的LCDR2区域，和序列SAWGDKGM的LCDR3区域的GM-CSF特异性抗体交叉竞争的抗体。
[0025]在某些实施方式中，所述GM-CSF特异性抗体是与包含序列GFTFSSYWMN的HCDRl 区域、序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列 GFGTDF 的 HCDR3 区
域、序列SGDSIGKKYAY的LCDRl区域、序列KKRPS的LCDR2区域,和序列SAWGDKGM
的LCDR3区域的GM-CSF特异性抗体结合相同表位的抗体。
`[0026]在某些实施方式中，本发明提供了 CD20特异性抗体和GM-CSF特异性抗体的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体包含序列GFTFSSYWMN的HCDRl区域、
序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列 GFGTDF 的 HCDR3 区域、序列
SGDSIGKKYAY的LCDRl区域、序列KKRPS的LCDR2区域，和序列SAWGDKGM的
LCDR3区域。
[0027]在某些实施方式中，本发明提供了 CD20特异性抗体和GM-CSF特异性抗体的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体包含序列
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMNWVRQAPGKGLEWVSGIENKYA
GGATYYAASVKGRFTiSRDNSKNTLYiQMNSLRAEDTAVYYCARGFGTDFWGQGTLV
TVSS的可变重链,和序列DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDSIGKKYAYWYQQKPGQAPVLVIYKKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCSAWGDKGMVFGGGTKLTVLGQ 的可变轻链。
[0028]GM-CSF特异性抗体包括namilumab (MT-203 ;由Micromet (如今的Amgen)开发的针对 GM-CSF 的完全-人 IgGl) ,M0RAb-022 是由 Morphotek (Eisai)开发的靶向 GM-CSF 的完全-人单克隆抗体，以及源自人IgG记忆B细胞的GM-CSF抗体(Theraclone Sciences,以前的 Spaltudaq)。其他 GM-CSF 特异性抗体描述于 W02006111353 (U.S.11/918，368，确切地通过引用并入本文)(Micromet)、W02007049472 (U.S.12/149，009，确切地通过引用并入本文)(Evec)、W02009064399，(U.S.12/681，396，确切地通过引用并入本文)(Evec, Boehringer Ingelheim), W02003068920 (U.S.10/365，123，确切地通过引用并入本文)(Ludwig Institute for Cancer Research) >W02007092939 (U.S.11/672，902,确切地通过引用并入本文)(Morphotek)、W02008141391 (U.S.12/601，514，确切地通过引用并入本文)(CRC for Asthma and Airways)'WO2OO9O3876O (U.S.12/675，OI3，确切地通过引用并入本文)(Amgen)、W02009062238 (U.S.12/742，467，确切地通过引用并入本文)(CRC for Asthma and Airways)、W02009134805 (U.S.12/431，661，确切地通过引用并入本文)(Kalobios)，和TO2010124163 (U.S.12/766，444，确切地通过引用并入本文)(Theraclone)。上述专利和专利申请中公开的所有抗体均可在本发明中使用。
[0029]上述专利中公开的一些抗体还以细目清单型的方式粗略地提及联合治疗。然而都没有公开使用抗GM-CSF抗体的联合治疗。WO 2009/133103 (Micromet)中公开了 GM-CSF特异性抗体与IL17拮抗剂的特异性联合治疗。
[0030]术语〃⑶20〃是指被称作⑶20或MS4A1的蛋白，具有以下同义词淋巴细胞抗原CD20、B-淋巴细胞表面抗原B1、Bp35、CD20、CVID5、LEU-16,白细胞表面抗原Leu_16、跨膜4-结构域亚家族A成员1、MGC3969、MS4A2、S7。人CD20具有(UniProt POl 1836)的
氨基酸序列:
MTTpRNSVNGTFpAEpM KGp|AMQSGpKpLFRRMSSLVGpTQSFFMRESKT
LGAVQiMNGLFHiALGGLLMIPAGlYAPICVTVWYPLWGGiMYIISGSLLAATEK
NSRKCLVKGKMIMNSLSLFAAISGMlLSIMDILNlKiSHFLKMESLNFlRAHTPYIN
lYNCEPANPSEKNSPSTQYCYSIQSLFLGILSVMLiFAFFQELVIAGIVENEWKR
TCSRPKSNIVLLSAEEKKEQTIEIKEEVVGLTETSSQPKNEEDIEliPIQEEEEEE
TETNFPEPPQDQESSPIENDSSP。
[0031]⑶20抗原特异性抗体的实例包括:〃C2B8〃，其现在称作“利妥昔单抗”("RITUXAN?")(美国专利号5，736，137，确切地通过引用并入本文)，一种靶向⑶20的嵌合的pan-B抗体；钇-[90]-标记的2B8鼠抗体，命名为〃Y2B8〃或“替伊莫单抗” ZEVALIN? (美国专利号5，736，137，确切地通过引用并入本文)，一种与用于螯合钇-[90]的MX-DTPA共价连接的鼠IgGl κ单克隆抗体；鼠IgG2a "BI，〃，也称作“托西莫单抗”，任选地由放射性1311标记以产生"131Ι-Β 抗体(碘131托西莫单抗，BEXXAR?)(美国专利号5，595，721，确切地通过引用并入本文)；鼠单克隆抗体〃1F5〃(Press等人，Blood 69 (2):584-591 (1987))及其变体,包括“框架修补的(framework patched)”或人源化的 1F5 (W003/002607, Leung, S.；ATCC 保藏 HB-96450)；鼠 2H7 和嵌合 2H7 抗体(美国专利号5，677，180，确切地通过引用并入本文)；人源化2H7，也称作奥瑞珠单抗(PR0-70769);奥法木单抗(Arzerra)，一种针对⑶20上的新型表位的完全人IgGl，huMax-CD20 (丹麦 Genmab ;W02004/035607 (U.S.10/687，799，确切地通过引用并入本文))；AME_133 (ocaratuzumab ；Applied Molecular Evolution),一种完全人源化且优化的针对CD20的IgGl单克隆抗体；A20抗体或其变体，例如嵌合或人源化的A20抗体(分别为cA20、hA20) (U.S.1O/366，7O9,确切地通过引用并入本文，Immunomedics);和可得自于 International Leukocyte Typing Workshop 的单克隆抗体 L27、G28_2、93-1B3、B_CI 或NU-B2 (Valentine 等人，In: Leukocyte Typing III (McMichael, Ed., p.440, OxfordUniversity Press (1987))。此外，适合的抗体包括，例如抗体 GAlOl (obinutuzumab),Biogen Idec/Genentech/Roche 的第三代人源化抗 CD20 抗体。此外，Biolex Therapeutics的BLX-301，一种具有优化的糖基化的人源化抗⑶20，或维妥珠单抗(hA20)，Immunomedics的第二代人源化抗⑶20抗体,或DXL625,维妥珠单抗的衍生物,例如IBC Pharmaceuticals(Immunomedics)的双特异性六价抗体,其由维妥珠单抗的二价抗⑶20 IgG和一对源自Inexus Biotechnology的米拉珠单抗(milatuzumab ;使用InNexus的动态交联技术强化的抗CD20单克隆抗体)的Fab的稳定二聚体组成(二者均为人源化的抗CD20抗体)，是适合的。此外，适合的抗体是BM-ca (人源化抗⑶20抗体(Int J Oncol.2011 Feb;38(2):335-44))、C2H7 (嵌合的抗CD20抗体(Mol Immunol.2008 May; 45(10):2861-8))、PR0131921 (Genentech开发的第三代抗⑶20抗体)、Reditux (Dr Reddy’s开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、PB0-326 (Probiomed开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、Zenotech开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、TL-Oll (Teva开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、CMAB304 (上海中信国健开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、GP-2013 (Sandoz(Novartis)开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、SAIT-101 (Samsung BioLogics开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、Intas Biopharmaceuticals开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、CT-PlO (Celltrion开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、Biocad开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、Ublituximab (LFB-R603 ；GTC Biotherapeutics (LFB Biotechnologies)开发的转基因生产的靶向⑶20的单克隆抗体)、PF-05280586 (推测为Pfizer开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、Lymphomun (B1-20, Trion Pharma开发的三功能抗CD20且抗⑶3抗体)、Natco Pharma开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、iBio开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、Gedeon Richter/Stada开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、Curaxys开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、Coherus Biosciences/Daiichi Sankyo开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、BioXpre ss开发的利妥昔单抗的生物仿制形式、BT-D004 (Protheon开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、AP-052 (Aprogen开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、BioXpress开发的奥法木单抗的生物仿制形式、MG-1106 (Green Cross开发的利妥昔单抗的生物仿制形式)、IB1-301 (Innovent Biologies开发的针对⑶20的人源化单克隆抗体)、BVX_20 (Vaccinex开发的针对⑶20的人源化单克隆抗体)、20_C2_2b (Immunomedics开发的靶向⑶20和人白细胞抗原DR (HLA-DR)的双特异性单克隆抗体-1FNa )、MEDI_552(由 Medlmmune/AstraZeneca 开发)、NeoRx (如今的 Poniard Pharmaceuticals)开发的抗⑶20/链霉亲和素缀合物、Favrille (如今的MMRGlobal)开发的第二代抗⑶20人抗体、Trubion/Emergent BioSolutions开发的抗CD20抗体片段TRU-015,以及不同公司和实体的其他临床前期(precl5inical)方案。所有上述出版物、文献、专利和专利申请均整体通过引用并入。其中公开的所有抗体均可在本发明中使用。
[0032]在本发明的某些优选实施方式中，所述CD20特异性抗体是利妥昔单抗(Rituxan)。利妥昔单抗包含序列SYNMH的HCDRl区域、序列AIYPGNGDTSYNQKFKG的 HCDR2 区域、序列 STYYGGDWYFNV 的 HCDR3 区域、序列 RASSSVSYiH 的 LCDRl 区域、
序列ATSNLAS的LCDR2区域,和序列OQWTSNPPT的LCDR3区域。利妥昔单抗包含以下序列的可变重链:
【权利要求】
1.CD20特异性单克隆抗体和GM-CSF特异性单克隆抗体的协同组合产品，其用于医药中的用途。
2.根据权利要求1的协同组合产品，其中所述医药中的用途是B细胞恶性肿瘤的治疗。
3.根据权利要求2的协同组合产品，其中所述B细胞恶性肿瘤选自非霍奇金淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、MALT (粘膜相关淋巴组织)淋巴瘤、多毛细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、B-细胞幼淋巴细胞白血病、B细胞淋巴瘤(例如各种形式的霍奇金病、B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)、白血病(例如，急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL ;也称为B细胞慢性淋巴细胞白血病BCLL)、多毛细胞白血病和慢性成肌细胞白血病)和骨髓瘤(例如，多发性骨髓瘤)。
4.根据权利要求1的协同组合产品，其中所述医药中的用途是炎性病变的治疗。
5.根据权利要求4的协同组合产品，其中所述炎性病变选自溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、炎性肠病、类风湿性关节炎、肌炎、多发性硬化、视神经脊髓炎、动脉粥样硬化、牛皮癣、系统性红斑狼疮、肾炎、肾小球肾炎、自身免疫性肝胆疾病、移植物抗宿主病、特应性皮炎、哮喘、神经变性疾病(例如，阿尔茨海默病)、脱髓鞘性多发性神经根病、神经性疼痛、动脉粥样硬化、年龄相关性黄斑变性、糖尿病肾病、结节病起源的葡萄膜炎，或糖尿病。
6.根据前述权利要求中任一项的协同组合产品，其中CD20特异性抗体和所述GM-CSF特异性抗体分离地施用。
7.根据前述权利要求中任一项的协同组合产品，其中所述CD20特异性抗体在所述GM-CSF特异性抗体之前施用。
8.根据权利要求1-6中任一项的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体在所述CD20特异性抗体之前施用。`
9.根据权利要求1-6中任一项的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体和所述CD20特异性抗体在大约相同的时间施用。
10.根据前述权利要求中任一项的协同组合产品，其中所述CD20特异性抗体结合包含以下氨基酸序列的多肽: MTTPRNSVNGTFPAEPMKGPIAMQSGPKPLFRRMSSLVGPTQSFFMRESKI LGAVQ_NGLFWALGGLLMIPAGIYAPICVTVWYPLWGG1WYIISGSLLAATEK NSRKCLVKGKMIMN'SLSLFAAISGMILSIMDlLNIKlSHFLKMESLNFtRAHTPYIN IYNCEPANPSEKNSPSTQYCYSIQSLFLGILSVMUFAFFQELVIAGIVENEWKR TCSRPKSNIVLLSAEEKKEQTlEIKEEVVGLTETSSQPKNEEDIElfPlQEEEEEE TETNFPEPPQDQESSPIENDSSP。
11.根据权利要求10的协同组合产品，其中所述CD20特异性抗体是包含序列SYNMH的HCDRl 区域、序列 AIYPGNGDTSYNQKFKG 的 HCDR2 区域、序列 STYYGGDWYFNV 的 HCDR3 区域、序列 RASSSVSYIH 的 LCDRl 区域、序列 ATSNLAS 的 LCDR2 区域，和序列 QQWTSNPPT 的 LCDR3 区域的⑶20特异性抗体。
12.根据权利要求10的协同组合产品，其中所述CD20特异性抗体是与包含序列SYNMH的 HCDRl 区域、序列 AIYPGNGDTSYNQKFKG 的 HCDR2 区域、序列 STYYGGDWYFNV 的 HCDR3 区域、序列 RASSSVSYIH 的 LCDRl 区域、序列 ATSNLAS 的 LCDR2 区域，和序列 QQWTSNPPT 的 LCDR3区域的CD20特异性抗体交叉竞争的抗体。
13.根据前述权利要求中任一项的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体结合包含以下氨基酸序列的多肽: MWLQSLLLLGTVACSISAPARSPSPSTQPWEHVNAIQEARRLLNLSRDTAAEM NETVEVISEWlFDLQEPTCLQTOLELYKQGLRGSLmLKGPLTMMASH YKQHCP PTPETSCATQIITFESFKENLKDFLLV1PFDCWEPVQE。
14.根据权利要求10的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体是包含序列GFTFSSYWMN 的 HCDRl 区域、序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列 GFGTDF 的 HCDR3区域、序列 S⑶SIGKKYAY的LCDRl区域、序列KKRPS的LCDR2区域，和序列SAWGDKGM的LCDR3区域的GM-CSF特异性抗体。
15.根据权利要求10的协同组合产品，其中所述GM-CSF特异性抗体是与包含序列GFTFSSYWMN 的 HCDRl 区域、序列 GIENKYAGGATYYAASVKG 的 HCDR2 区域、序列 GFGTDF 的 HCDR3区域、序列S⑶SIGKKYAY的LCDRl区域、序列KKRPS的LCDR2区域，和序列SAWGDKGM的LCDR3区域的GM-CSF特异性抗体交叉竞争的抗体。
【文档编号】A61K39/395GK103827143SQ201280033421
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2012年7月6日 优先权日:2011年7月6日
【发明者】S.施泰德尔 申请人:莫弗系统股份公司