降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物，该组成物包含：至少一种金属或其离子；至少一种药物或受载体保护及修饰的抗自由基氧化物；及药物载体。本发明的载体可保存药物或抗氧化物的活性，使其不易被环境或体液内的天然自由基降低效力，达到延长保护力的效果，可应用于减轻辐射伤害与化疗药物副作用。
【专利说明】降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物
【技术领域】
[0001] 本发明提供一种复合微胞载体医药组成物，尤指一种降低自由基伤害的复合微胞 载体医药组合物。
【背景技术】
[0002] 氨磷汀（Amifostine)，又名WR-2721，是WR-1065加上磷酸根的化合物，为保护抗 氧化活性的衍生物，目前已经获得世界多国医药品法规机关核可作为预防放射线治疗的伤 害以及治疗钼类化疗药品不良（副）作用的适应症。Amifostine可透过自然水解的方式， 与生物体内的碱性磷酸酶（alkaline phosphatase)作用，将其磷酸根与WR-1065的键结断 裂后，释放WR-1065作为细胞内抗自由基的成分，以降低细胞毒性。但是氨磷汀在人体内的 分布半衰期小于1分钟，排除半衰期为8分钟，在静脉投药6分钟后仅剩10%的氨磷汀存 在。未被排除的氨磷汀可迅速的转化为具有活性的硫醇代谢物WR1065 (active free thiol metabolite)，而开始于体内作用。因此，临床使用建议氨磷汀的静脉投予在放射线治疗为 前三分钟，在化学治疗为前15分钟投予，以避免药物失去活性。因此，使用氨磷汀最重要且 须克服的问题即是半衰期过短，而造成的使用困难。
[0003] 过去许多研究与文献尝试透过不同的药物剂型或是载体，将氨磷汀设计为缓慢释 放或是可透过非静脉给予的方式给药，这些研究尽管能延长半衰期或是增加口服有效性， 但是仍然无法有效地控制氨磷汀的体内释放以及提供器官选择性的分布效果，所以无法提 供临床上更多不同适应症的治疗效益，像是预防核电厂辐射外泄时的辐射伤害等。
[0004] 其他抗氧化物也可能因为难以保存活性，或是容易被身体代谢而无法提供较长时 间的抗自由基保护力，所以难以应用在预防辐射伤害与降低化疗药物不良作用的效果。
【发明内容】
[0005] 鉴于上述的发明背景中，为了符合产业上特别的需求，本发明利用前案（台湾案 申请案号101128939) -种利用金属离子复合微胞技术包覆药物氨磷汀或其他抗氧化物， 以应用于降低辐射伤害与化疗药物不良作用。复合微胞药物载体将达成下述的目的，如延 长药物生物体内半衰期、保护药物活性、改变药物体内分布。本发明所应用金属离子复合微 胞能延缓药物的释放速率及改变体内分布，达到降低辐射伤害与化疗药物副作用的效果。 金属离子复合微胞可依需求设计不同的脂水溶性及粒径等，以达到特定体内器官分布及保 护的作用。
[0006] 复合微胞药物载体释放出的药物活性成分如氨磷汀，WR-1065或其他抗氧化物， 可减少放射线或化学治疗药物产生的自由基对正常组织器官的伤害，达到降低毒性的效 果。
[0007] 本发明的目的即在提供一种降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物，该组成 物包含：至少一种金属或其离子；至少一种药物或受载体保护及修饰的抗氧化物；及药物 载体。
[0008] 为达成前述发明目的，上述的金属离子核心选自下列族群中之一或其任意组合或 其衍生物：铁（Fe)、铜（Cu)、镍（Ni)、铟（In)、钙（Ca)、钴（Co)、铬（Cr)、钆（Gd)、铝（A1)、 锡（Sn)、锌（Zn)、钨（W)、钪（Sc)及钛（Ti)。
[0009] 上述的药物载体选自下列族群中之一或其任意组合或其衍生物：聚乙 二醇（poly(ethylene glycol))、聚天门冬氨酸（poly(aspartic acid))、聚麸胺 酸（poly(glutamic acid))、聚赖氨酸（poly(lysine))、聚丙烯酸（poly(acrylic acid))、几丁聚醣（chitosan)、聚乙烯亚胺（poly (ethyleneimine))、聚甲基丙烯酸 (poly(methacrylic acid))、透明质酸（hyaluronic acid)、胶原蛋白（collagen)、聚 氮-异丙基丙烯酰胺（P〇ly(N_isopropyl acrylamide))、直链淀粉（amylose)、纤维素 (cellulose)、聚轻基丁酸酯（poly (hydroxybutyrate))、聚乳酸（poly (lactic acid))、 聚琥拍酸丁酯（poly (butylenesuccinate))、聚己内酯（poly (caprolactone))、羧甲基 纤维素（carboxymethylcellulose)、糊精（dextran)、环糊精（cyclodextrin)、聚乙二 醇 -聚麸胺酸嵌段共聚物（poly (ethylene glycol)-b-poly (glutamic acid))、磷脂质 (phospholipid)〇
[0010] 上述的药物载体选自下列族群中之一或其任意组合：微脂体（liposome),微胞或 高分子微胞（micelle/polymeric micelle)及树枝状高分子（dendrimer)。
[0011] 上述的复合微胞载体医药组成物可与金属键结或不键结，上述的药物选自 下列族群中之一或其任意组合或其衍生物：氨磷汀（amifostine)、WR-1065、维生素 C(ascorbic acid、Vitamin C),榖胱甘肽（glutathione)、退黑激素（melatonin)、生育酚 (tocopherols)、生育三烯醇（tocotrienols、Vitamin E)、左旋肉喊（L-carnitine)、胡萝 卜素（carotenes)、还原型泛醌（ubiquinol)、硫辛酸（lipoic acid)、多酚（polyphenols)、 儿茶酌胺（catecholamine)、姜黄素（curcumin)、白藜芦醇（resveratrol)、白藜芦醇 苷（piceid)、乙酰半胱氨酸（acetylcysteine)、四甲基喊陡氧化物（Tempo)、细辛脑 (asarone)、氨基狐（aminoguanidine)、维生素 E 单糖苷（tocopherol monoglucoside)、 甘草酸（glycyrrhizic acid)、表儿茶素（epicatechin)、类黄酮（flavonoid)、|￡ 草素 (Orientin)、维米宁（vicenin)、2_ 疏基丙醜基-甘氨酸（MPG(2_mercaptopropionyl glycine))及美司钠（Mesna(2-mercaptoethanesulfonic acid))。
[0012] 一种用于降低自由基伤害之复合微胞载体医药组成物，该组成物包含：铁离子； 氨磷汀；及药物载体，该载体为聚乙二醇-聚麸胺酸嵌段共聚物。
[0013] 为达成前述发明目的，所述的药物可以做为还原剂，还原受氧化的生物分子，以恢 复其功能；可依其抗氧化效果阻止自由基持续传递与攻击；可以减少辐射、紫外线、化疗药 品、电磁场效应等所造成的自由基，达到保护自由基伤害与降低其毒性的效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0014] 前面的概述，以及本发明在结合附图以下的详细描述，阅读时将更容易地理解。然 而，应当理解，本发明并不局限于所示的较佳实施例。
[0015] 图1 :所示为根据本发明的实施例一形成的具有金属核心的复合微胞药物载体示 意图。林*P〈〇. 001相较于UV组别具有显著差异、#P〈0. 05相较于API40X2小时组具有显著 差异、▲▲▲?〈0. 001相较于FePA20X2小时组具有显著差异。
[0016] 图2:所示为彗星试验（Comet Assay)影像图，分别有CON(负向控制组）、UV(正 向控制组）、API40X (2 小时）、API40X (30 分钟）、FeP40X (2 小时）、FePA20X (2 小时）、 FePA20X (30 分钟）。
[0017] 图3 :所示为彗星试验（Comet Assay)DNA拖尾率（％)数据图，分别有C0N(负向控 制组）、UV (正向控制组）、API40X(2 小时）、API40X(30 分钟）、FeP40X(2 小时）、FePA20X(2 小时）、FePA20X(30 分钟）。
【具体实施方式】
[0018] 本发明以下面的实施例予以示范阐明，但本发明不受下述实施例所限制。
[0019] 实施例一
[0020] 金属核心复合微胞药物载体控释剂型配制
[0021] 图1为具有金属核心的复合微胞药物载体示意图。中心为金属或金属离子120 ; 中心金属或金属离子旁为抗氧化物或其他类似药物110 ;外围则为载体100。
[0022] 活性物质
[0023] 氨磷汀为抗氧化物，是WR-1065加上磷酸根保护抗氧化活性的衍生物，已经世界 多国医药品法规机关核可作为预防放射线治疗伤害以及钼类化疗药品副作用的适应症。 [0024] 复合微胞药物载体
[0025] 提供原料，该原料包含 15g γ -benzyl-L-glutamate，7. 5g triphosgene 溶于 150mL无水tetrahydrofuran(THF)于氮气环境下55°C搅拌反应至澄清溶液，浓缩后沉淀 于 400mL n-hexane，移除 n-hexane 后以 300mL n-hexane/ethyl acetate(l/l)再结晶， 过滤后可得单体 N-carboxy-y-benzyl-L-glutamate anhydride (BLG-NCA) ;15g BLG-NCA 与 2. lg a -amino-ω-methoxy-poly (ethylene glycol) (PEG-NH2)溶角军于 43mL dimethyl sulfoxide (DMS0)，40°C搅拌反应72小时，完成后粗产物沉淀于215mL diethyl ether,移除 diethyl ether 后加入 315mL ethanol 与 210mLlN Na0H25°C搅拌反应 24 小时，接着以 35% HC1冰浴调整pH值至7. 0,利用MWC03500透析膜透析纯化，冷冻干燥后可得聚乙二醇-聚 麸胺酸嵌段共聚物（PEG-b-PGA)。
[0026] 提供原料，该原料包含206. 44mg氨磷汀、825. 50mg聚乙二醇-聚麸胺酸嵌段共聚 物（PEG-b-PGA)与206. 44mg氯化亚铁（FeC12 · 4H20);将该原料置入41. 288ml缓冲液HE PES [4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinee-thanesulfonic acid)]中，以 25°C下、pH 值为 7. 0、转速200rpm进行匀相扰动程序。
[0027] 调配物 FePA 的调配比例 PEG_b_PGA:FeC12 · 4H20:amifostine = 4:1:1 (w:w:w， 以重量作为比例），较佳氨磷汀反应浓度：5mg/mL。藉此，该氨磷汀经由该亚铁离子 (Fe2+)与该聚乙二醇-聚麸胺酸嵌段共聚物（PEG-b-PGA)藉由配位键直接进行自组装 (self-assembly)反应。
[0028] 调配物实例1 (FePA)
[0029]
【权利要求】
1. 一种降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物，其特征在于该组成物包含： 至少一种金属或其离子； 至少一种药物或受载体保护及修饰的抗氧化物；及 药物载体。
2. 如权利要求1所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中上述的金属离子核 心选自下列族群中之一者或其任意组合或其衍生物：铁（Fe)、铜（Cu)、镍（Ni)、铟（In)、钙 (Ca)、钴（Co)、铬（Cr)、钆（Gd)、铝（A1)、锡（Sn)、锌（Zn)、钨（W)、钪（Sc)及钛（Ti)。
3. 如权利要求1所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中上述的药 物载体选自下列族群中之一或其任意组合或其衍生物：聚乙二醇（poly (ethylene glycol))、聚天门冬氨酸（poly (aspartic acid))、聚麸胺酸（poly (glutamic acid))、 聚赖氨酸（poly (lysine))、聚丙烯酸（poly (acrylic acid))、几 丁聚醣（chitosan)、 聚乙烯亚胺（poly(ethyleneimine))、聚甲基丙烯酸（poly(methacrylic acid))、 透明质酸（hyaluronic acid)、胶原蛋白（collagen)、聚氮-异丙基丙烯酰胺 (poly(N_isopropyl acrylamide))、直链淀粉（amylose)、纤维素（cellulose)、聚 轻基 丁酸酯（poly (hydroxybutyrate))、聚乳酸（poly (lactic acid))、聚琥拍酸丁 酯（poly(butylenesuccinate))、聚己内酯（poly(caprolactone))、羧甲基纤维素 (carboxymethylcellulose)、糊精（dextran)、环糊精（cyclodextrin)、聚乙二醇-聚 麸胺酸嵌段共聚物（poly(ethylene glycol)-b_poly(glutamic acid))、磷脂质 (phospholipid)〇
4. 如权利要求1所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中上述的药物载体选 自下列族群中之一或其任意组合：微脂体，微胞或高分子微胞及树枝状高分子。
5. 如权利要求1所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其更包含一或多样 药物，该药物可与金属键结或不键结，其中上述的药物选自下列族群中之一或其任意 组合或其衍生物：氨憐汀（amifostine)、WR-1065、维生素 C (ascorbic acid、Vitamin C),谷胱甘肽（glutathione)、退黑激素（melatonin)、生育酚（tocopherols)、生育三 烯醇（tocotrienols、Vitamin E)、左旋肉喊（L-carnitine)、胡萝卜素（carotenes)、 还原型泛醌（ubiquinol)、硫辛酸（lipoic acid)、多酚（polyphenols)、儿茶酚胺 (catecholamine)、姜黄素（curcumin)、白藜芦醇（resveratrol)、白藜芦醇苷（piceid)、 乙酰半胱氨酸（acetylcysteine)、四甲基喊陡氧化物（Tempo)、细辛脑（asarone)、氨基胍 (aminoguanidine)，维生素 E 单糖苷（tocopherol monoglucoside)、甘草酸（glycyrrhizic acid)、表儿茶素（epicatechin)、类黄酮（flavonoid)、连草素（Orientin)、维采宁 (vicenin)、2_ 巯基丙酰基-甘氨酸（MPG(2-mercaptopropionyl glycine))及美司钠 (Mesna(2-mercaptoethanesulfonic acid))〇
6. 如权利要求1至5中任一项所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中该药 物可以做为还原剂，还原受氧化的生物分子，以恢复其功能。
7. 如权利要求1至5中任一项所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中该药 物可依其抗氧化效果阻止自由基持续传递与攻击。
8. 如权利要求1至5中任一项所述的复合微胞载体医药组成物，其特征在于其中该药 物可以减少辐射、紫外线、化疗药品、电磁场效应等所造成的自由基，达到保护自由基伤害 与降低其毒性的效果。
9. 一种降低自由基伤害的复合微胞载体医药组成物，其特征在于该组成物包含： 铁离子；氨磷汀；及药物载体，该载体为聚乙二醇-聚麸胺酸嵌段共聚物。
【文档编号】A61P39/06GK104114188SQ201280054773
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2012年11月22日 优先权日:2012年11月22日
【发明者】陈嘉宏, 王朝晖, 林炯森, 邱铁雄, 陈静仪, 廖碧虹, 苏家琪, 廖伟全 申请人:原创生医股份有限公司