一种中药组合物的新用途
【专利摘要】本发明提供了一种中药组合物的新用途。具体来说提供了一种中药组合物在制备治疗抑郁症药物中的应用，该中药组合物的原料药主要包括淫羊藿、制何首乌、黄芪。该中药组合物能明显升高CUMS模型鼠的Open-field评分、体重、胸腺和脾脏系数、海马5-HT、NE、DA的含量以及海马CA3区神经元总数目和正常神经元的百分比，能明显降低血清5-HT、NE、DA、ACTH、CORT、β-EP含量、肾上腺系数以及肾上腺皮质厚度，具有明显的抗抑郁作用。
【专利说明】一种中药组合物的新用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体涉及一种中药组合物在制备治疗抑郁症方面的新用途，属于医药领域。
【背景技术】
[0002]抑郁症是一种常见的精神疾病，其患病率预计到2020年将跃升到第2位。其发病机制众说纷纭，学者们认为可能是心理社会因素和各种生物学改变等多种因素交互作用的结果。其中，心理社会因素主要有紧张的工作和快节奏生活，不良人际关系，突发生活事件打击等；生化机制方面主要包括单胺假说，受体假说，内分泌假说，免疫改变等。单胺神经递质假说认为抑郁时，中枢的单胺神经递质(5-HT、NE、DA)的含量降低。内分泌假说主要涉及HPA (下丘脑-垂体-肾上腺皮质)轴，应激时，HPA轴兴奋，主要引起CRH、ACTH (促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素)以及GC (糖皮质激素)的含量增多，而增多的GC又抑制免疫反应。
[0003]因此，开发针对单胺神经递质的药物成为业内亟需解决的技术问题。。
【发明内容】
[0004]本发明采用CUMS抑郁模型大鼠筛选具有良好治疗抑郁症效果的中药组合物产品O
[0005]本发明第一个目的在于提供一种中药组合物在制备治疗抑郁症药物中的应用
[0006]本发明第二个目的在于提供了该治疗抑郁症的中药组合物；
[0007]本发明第三个目的在于提供该中药组合物的制备方法。
[0008]本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
[0009]一种治疗抑郁症的中药组合物，该中药组合物的原料药组成为:
[0010]淫羊藿8-35重量份、制何首乌20-75重量份、黄芪10_50重量份。
[0011]进一步,其原料药组成为:
[0012]淫羊藿9-30重量份、制何首乌25-70重量份、黄芪12_45重量份。
[0013]更进一步，其原料药组成为:
[0014]淫羊藿10-25重量份、制何首乌30-65重量份、黄芪15_35重量份。
[0015]更进一步，其原料药组成为:
[0016]淫羊藿10-20重量份、制何首乌35-65重量份、黄芪15_27重量份。
[0017]更进一步，其原料药组成为:
[0018]淫羊藿15重量份、制何首乌50重量份、黄芪22重量份；
[0019]或，淫羊藿25重量份、制何首乌50重量份、黄芪22重量份；
[0020]或，淫羊藿15重量份、制何首乌50重量份、黄芪36重量份。
[0021]本发明中药组合物可采用如下方法制备:
[0022]按比例取原料药，以水或与水互溶的有机溶剂提取；
[0023]进一步，所述与水相互溶的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮中的一种或几种；更进一步优选为50-90%的乙醇；更进一步优选为60-80%的乙醇。
[0024]本发明中药组合物还可采用如下方法制备:
[0025]按比例取原料药，采用水提醇沉法制备；其中所述醇沉浓度为50-90% ；
[0026]进一步，所述醇沉浓度为60-80%。
[0027]本发明中药组合物除采用上述对原料药进行合并提取的方法制备外，还可以采用分别对各原料药进行单独提取的方法制备，具体方法如下:
[0028]按比例取淫羊藿、黄芪、制何首乌药材，分别以水提取，或以与水互溶的有机溶剂提取，或进行水提醇沉，制备得到淫羊藿提取物、黄芪提取物、制何首乌提取物，将淫羊藿提取物、黄芪提取物、制何首乌提取物合并，即得；其中所述与水相互溶的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮中的一种或几种；所述醇沉浓度为50-90% ；
[0029]进一步，所述与水相互溶的有机溶剂为50-90%的乙醇；更进一步优选为60-80%的乙醇；
[0030]进一步，所述醇沉浓度为60-80% ；
[0031]进一步，所述淫羊藿提取物、黄芪提取物、制何首乌提取物可以进一步精致，如采用过打孔吸附树脂柱。
[0032]上述制备方法中所用的提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超声提取或渗漉提取中的一种或几种方式。
[0033]进一步，本发明中药组合物的制备方法包括如下步骤:
[0034]A、取淫羊藿药材，水煎煮提取，提取液加乙醇醇沉，制备淫羊藿提取物；
[0035]B、取黄芪药材，水煎煮提取，提取液浓缩得黄芪提取物；
[0036]C、取制何首乌药材，水煎煮提取，提取液加乙醇醇沉，制备何首乌提取物；
[0037]D、取淫羊藿提取物、黄芪提取物、制何首乌提取物，混合。
[0038]进一步，本发明中药组合物的制备方法包括如下步骤:
[0039]A、取淫羊藿药材，水煎煮提取，提取液加乙醇至含醇量为60%_80%，过滤，滤液调节PH为弱碱性，过滤，滤液调节pH至中性，回收乙醇，得淫羊藿提取物；
[0040]B、取黄芪药材，水煎煮提取，提取液浓缩得黄芪提取物；
[0041]C、取制何首乌药材，水煎煮提取，提取液加乙醇至含醇量为70%_80%，过滤，滤液调节PH为弱碱性，过滤，滤液调节pH至中性，回收乙醇，得制何首乌提取物；
[0042]D、取淫羊藿提取物、黄芪提取物、制何首乌提取物，混合，即得。
[0043]更进一步,步骤A水提取液进行两次醇沉,第一次醇沉浓度为65%-70%，第二次为75%-80% ;更进一步的，第一次醇沉浓度为65%，第二次为80%。
[0044]更进一步,步骤C水提取液进行两次醇沉,第一次醇沉浓度为65%-70%，第二次为75%-80% ;更进一步的，第一次醇沉浓度为70%，第二次为80%。
[0045]更进一步，步骤A、C所述弱碱性为ρΗ8.0-9.0。
[0046] 更进一步,步骤A、C进行醇沉及调节pH后,静置12-36小时。
[0047]上述制备方法中原料药经提取后还可经纯化、精制，如过大孔树脂柱；并进一步按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括颗粒、片剂、胶囊、滴丸、口服液、混悬液、乳浊液、注射剂。
[0048]为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括:淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括:甜味剂及各种香精；防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括:PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第I版中各剂型记载的辅料)。
[0049]本发明所述中药组合物除了以淫羊藿、制何首乌、黄芪原药材投料的形式外，还可以采用以淫羊藿、制何首乌、黄芪的提取物(有效部位)投料的形式，因此本发明进一步公开了一种治疗抑郁症的中药组合物:
[0050]一种治疗抑郁症的中药组合物，该中药组合物的原料组成为:
[0051]淫羊藿提取物8-35重量份、制何首乌提取物、20-75重量份、黄芪提取物10_50重量份。
[0052]进一步,其原料药组成为:
[0053]淫羊藿提取物9-30重量份、制何首乌提取物25-70重量份、黄芪提取物12_45重量份。
[0054]更进一步，其原料药组成为:
[0055]淫羊藿提取物10-25重量份、制何首乌提取物30-65重量份、黄芪提取物15_35重量份。
[0056]更进一步,其原料药组成为:
[0057]淫羊藿提取物10-20重量份、制何首乌提取物35-65重量份、黄芪提取物15_27重量份。
[0058]更进一步,其原料药组成为:
[0059]淫羊藿提取物15重量、制何首乌提取物50重量份、黄芪提取物22份；
[0060]或，淫羊藿提取物25重量份、制何首乌提取物50重量份、黄芪提取物22重量份；
[0061]或，淫羊藿提取物15重量份、制何首乌提取物50重量份、黄芪提取物36重量份。
[0062]本发明所述制何首乌参照2010版《中国药典》第一部收载的“制何首乌”制备。
[0063]本发明所述淫羊藿提取物、制何首乌提取物、黄芪提取物分别为淫羊藿、制何首乌、黄芪的水提取物或与水相互溶的有机溶剂提取物；或，分别为淫羊藿、制何首乌、黄芪经水提醇沉处理后得到的提取物。
[0064]其中，所述与水相互溶的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮中的任意一种；进一步优选为浓度为50%-90%的乙醇；更进一步优选为浓度为60%-80%的乙醇；
[0065]所述醇沉浓度为50%_90%% ;进一步优选为醇沉浓度60%_80%。
[0066]进一步，所述淫羊藿提取物采用如下方法制备:取淫羊藿药材，水煎煮提取，提取液加乙醇至含醇量为60%-80%，过滤，滤液调节pH为弱碱性，过滤，滤液调节pH至中性，回收乙醇，得淫羊藿提取物；更进一步的，提取液进行两次醇沉，第一次醇沉浓度为65%，第二次为80% ;更进一步的，所述弱碱性为pH8.0-9.0 ;更进一步的，进行醇沉及调节pH后，静置12-36小时；
[0067]所述制何首乌提取物采用如下方法制备:取制何首乌药材，水煎煮提取，提取液加乙醇至含醇量为70%-80%，过滤，滤液调节pH为弱碱性，过滤，滤液调节pH至中性，回收乙醇，得制何首乌提取物；更进一步的，提取液进行两次醇沉，第一次醇沉浓度为70%，第二次为80% ;更进一步的，所述弱碱性为pH8.0-9.0 ;更进一步的,进行醇沉及调节pH后，静置12-36小时；
[0068]本发明所述水提醇沉法系指在中药水提浓缩液中，加入乙醇使达到规定的含醇量(即醇沉浓度)，某些成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，滤过，取乙醇溶液，回收乙醇得提取物，使水提液得以精制的方法。
[0069]本发明还公开了该中药组合物在制备治疗抑郁症药物中的应用。
[0070]进一步,其特征在于升高脑内单胺神经递质；更进一步，其特征在于升高海马中5-羟色胺和/或多巴胺的含量。
[0071]进一步,其特征在于降低血液中的单胺神经递质；更进一步，其特征在于降低血液中NE、多巴胺、5-羟色胺的含量。
[0072]进一步，其特征在于降低血清促肾上腺皮质激素、皮质酮和/或β内啡肽的含量。
[0073]进一步，其特征在于增加脑内神经元数目。
[0074]进一步，其特征在于减轻肾上腺病理改变。
[0075]进一步，其特征在于减小模型鼠的肾上腺皮质厚度。
[0076]实验研究表明，本发明中药组合物(CF4)能明显升高CUMS模型鼠的Open-field评分、体重、胸腺和脾脏系数、海马5-HT、NE、DA的含量以及海马CA3区神经元总数目和正常神经元的百分比(P均〈0.05)，能明显降低血清5-HT、NE、DA、ACTH、CORT、β -EP含量、肾上腺系数以及肾上腺皮质厚度(P均〈0.05)。
【专利附图】
【附图说明】
[0077] 图1大鼠海马CA3区神经元，HE染色，X 400，
[0078]图1-1、正常组的大鼠海马CA3区神经元，HE染色，X 400，
[0079]图1-2、模型组的大鼠海马CA3区神经元，HE染色，X 400，
[0080]图1-3、模型+舍曲林组的大鼠海马CA3区神经元，HE染色，X 400，
[0081]图1-4、模型+HLS组的大鼠海马CA3区神经元，HE染色，X 400，
[0082]图1-5、模型+CF4组的大鼠海马CA3区神经元，HE染色，Χ400。
[0083]效果实验例
[0084]实验例I
[0085]I 材料
[0086]1.1动物清洁级全雄昆明鼠260只，6~8周龄，体质量24~29g，四川大学实验动物中心提供，合格证:川实动管质第10号，实验前动物适应性饲养3~5天。饲养环境，室温20~25°C，湿度55~70%，自由摄食饮水。
[0087]1.2药品与试剂
[0088]对照药物盐酸舍曲林片(Sertraline) (110801)，大连辉瑞制药有限公司，临用前配制成37.5%, 62.5%浓度的0.5%CMC-Na混悬液。
[0089]实验药物I HLS:制何首乌1000g、黄芪440g、黄精(制)440g、淫羊藿300g、枸杞子300g、丹参 220g ；
[0090]制备方法:以上六味，制何首乌、丹参、枸杞子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至糖浆状，放冷，加乙醇使含醇量达70%，放置，滤过，滤液再加乙醇使含醇量达80%，放置，滤过，以10%氢氧化钠溶液调节pH值至8.0,放置,滤过,滤液用10%盐酸液调节pH值至7.0,回收乙醇，药液备用；淫羊藿、黄精加水煎煮二次，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至适量，放冷，加乙醇至含醇量达65 %，静置，滤过，滤液加乙醇使含醇量达80 %，静置，滤过，滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，静置，滤过，滤液用10%盐酸溶液调节pH值至7.0，回收乙醇，药液备用；黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约95ml，药液备用。合并以上备用药液，搅匀，冷藏放置，滤过，加水至1000ml，加入适量无糖型甜味剂，滤过，滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，即得。
[0091]实验药物2 CFl:制何首乌1000g、枸杞子300g、黄精(制)440g ；
[0092]制备方法:取制何首乌1000g、枸杞子300g，加入煮提三次，合并滤液，过滤，加热浓缩至糖浆状，放冷，加乙醇使含醇量达70%，静置12小时，过滤，滤液再加乙醇使含醇量达80%，再静置24小时，过滤，滤液以10%的NaOH调节pH至8.0，放置24小时，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节PH至7.0,回收乙醇，药液备用。取黄精440g，加10倍量水，煮提两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，静置，取上清液浓缩至适量，放冷后加入一醇至含醇量达65%，静置24小时，过滤，滤液加乙醇使含醇量达80%，静置，24小时，过滤，滤液用10%氢氧化钠溶液调节PH值至8.0，静置24小时，过滤，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节PH至7.0，回收乙醇，药液备用。合并以上备用液，搅匀，冷藏放置12小时，过滤，加水至1000ml，过滤，滤液用10%氢氧化钠调节pH值至7.0，加热煮沸灭菌，即得。
[0093]实验药物3 CF2:淫羊藿300g
[0094]制备方法:称取淫羊藿药材300g，加10倍量水，煮提两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，静置，取上清液浓缩至适量，放冷后加入一醇至含醇量达65%，静置24小时，过滤，滤液加乙醇使含醇量达80%，静置，24小时，过滤，滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至
8.0，静置24小时，过滤，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节pH至7.0,回收乙醇，过滤，加水至1000ml，过滤，滤液用10%氢氧化钠调节pH值至7.0，加热煮沸灭菌，即得。
[0095]实验药物4 CF3:淫羊藿药材300g、制何首乌100g ；
[0096]制备方法:称取淫羊藿药材300g，加10倍量水，煮提两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，静置，取上清液浓缩至适量，放冷后加入一醇至含醇量达65%，静置24小时，过滤，滤液加乙醇使含醇量达80%，静置，24小时，过滤，滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，静置24小时，过滤，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节pH至7.0，回收乙醇，备用；称取100g制何首乌，加入煮提三次，合并滤液，过滤，加热浓缩至糖浆壮，放冷，加乙醇使含醇量达70%，静置12小时，过滤，滤液再加乙醇使含醇量达80%，再静置24小时，过滤，滤液以10%的NaOH调节pH至8.0,放置24小时，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节PH至7.0,回收乙醇，备用；取淫羊藿提取液、何首乌提取液搅匀，冷藏放置12小时，过滤，加水至1000ml，过滤，滤液用10%氢氧化钠调节pH值至7.0，加热煮沸灭菌，即得。
[0097]实验药物5 CF4:为实施例1制备口服液。
[0098]实验药物6 CF5:制何首乌1000g、黄芪440g、淫羊藿300g、丹参220g ；
[0099]制备方法:取制何首乌lOOOg，丹参220g，加水煮提三次，合并滤液，过滤，加热浓缩至糖浆状，放冷，加乙醇使含醇量达70%，静置12小时，过滤，滤液再加乙醇使含醇量达80%，再静置24小时，过滤，滤液以10%的NaOH调节PH至8.0,放置24小时，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节pH至7.0，回收乙醇，药液备用。称取淫羊藿药材300g，加10倍量水，煮提两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，静置，取上清液浓缩至适量，放冷后加入一醇至含醇量达65%，静置24小时，过滤，滤液加乙醇使含醇量达80%，静置，24小时，过滤，滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，静置24小时，过滤，滤过，滤液用10%的盐酸调节调节pH至7.0，回收乙醇，备用。称取黄芪440g，加10倍量水提取三次，每次1.5小时，合并提取液，过滤，浓缩备用。将上述提取液混合搅匀，冷藏放置12小时，过滤，加水至3000ml，过滤，滤液用10%氢氧化钠调节pH值至7.0-7.5，加热煮沸灭菌，即得。
[0100]上述实验药物中所用“制何首乌”和“黄精(制)”分别为何首乌和黄精的炮制品，具体制备方法参照2010版《中国药典》第一部收载的“制何首乌”和“黄精炮制品”的制备方法。
[0101]1.3 主要仪器 MK3 酶标仪(美国 Thermo) ;A1 legra X-22R Centrifuge (美国Backman) ；81m-25光学显微镜(Olympus公司);ZZ_6小鼠自主活动仪(成都泰盟科技有限公司)，TH-86-340-WA-80°C超低温冰箱(德国)，I/万Sartorius电子分析天平(德国);I/千电子分析天平(德国)；250Q大白鼠固定器；无盖木制敞箱等。
[0102]2 方法
[0103]2.1 实验
[0104]2.1.1分组与给药选取96只小鼠按体重分层随机均分为8组，即正常(0.5%CMC-Na20ml.kg_l.d_l)、阳性对照(Sertraline，5mg.kg-1.d_l)、HLS 及其 CF1、2、
3、4、5 (均给予对应口服液20ml.kg-1.d_l)共8组，12只/组，分别连续灌胃给药7d。
[0105]2.1.2悬尾实验最后一次给药后Ih,将小鼠尾巴l_2cm处悬挂在铁架台上,用胶布固定，让小鼠保持倒悬挂姿势适应Imin,测定在5min内的不动时间。
[0106]2.1.3游泳实验选取96只昆明鼠，按2.1.1步骤，最后一次给药Ih后，将小鼠置于水温25± I°C、水容量20X 10X 13cm3的长方体白色塑料盒中，游泳6min，测定后5min内的悬于水面不动时间。
[0107]2.2统计学分析实验数据以}? 土 S表示，SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析，检验方差齐性，Ρ>0.05使用LSD法，ρ〈0.05采用Dunnett Τ3法，ρ〈0.05为差异明显。*表示与正常组相比Ρ〈0.05，#表示与模型组相比Ρ〈0.05。
[0108]3 结果
[0109]各实验药物对小鼠悬尾和游泳不动时间的影响结果见表1。
[oho] 表1对小鼠悬尾和游泳不动时间的影响(X ± S，11=12)
[0111]
【权利要求】
1.一种中药组合物在制备治疗抑郁症药物中的应用，其特征在于，该中药组合物的原料药主要组成为:淫羊藿、制何首乌、黄芪。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物升高脑内单胺神经递质。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物降低血液中的单胺神经递质。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，该药物组合物升高海马中5-羟色胺和/或多巴胺的含量。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，该药物组合物降低血液中NE、多巴胺、5-羟色胺的含量。
6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物降低血清促肾上腺皮质激素、皮质酮和/或β内啡肽的含量。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物增加脑内神经元数目。
8.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物减轻肾上腺病理改变。
9.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该药物组合物减小模型鼠的肾上腺皮质厚度。
10.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该中药组合物的原料药组成为: 淫羊藿8-35重量份、制何首乌20-75重量份、黄芪10-50重量份； 或，淫羊藿9-30重量份、制何首乌25-70重量份、黄芪12-45重量份； 或，淫羊藿10-25重量份、制何首乌30-65重量份、黄芪15-35重量份； 或，淫羊藿10-20重量份、制何首乌35-65重量份、黄芪15-27重量份； 或，淫羊藿提取物8-35重量份、制何首乌提取物、20-75重量份、黄芪提取物10-50重量份。
【文档编号】A61K36/704GK104069189SQ201310108287
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2013年3月29日 优先权日:2013年3月29日
【发明者】姚华, 王军, 杜军, 王春燕, 李芳
申请人:成都地奥集团天府药业股份有限公司