丙氨酸作为疫苗佐剂的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及生物医药领域，具体公开了丙氨酸作为疫苗佐剂的应用。本发明通过在疫苗添加或不添加丙氨酸，发现试验动物在添加丙氨酸后较不添加丙氨酸的死亡率显著减少，说明丙氨酸可提高疫苗的免疫效果，可以作为疫苗的免疫佐剂。
【专利说明】丙氨酸作为疫苗佐剂的应用【技术领域】
[0001]本发明涉及生物医药领域，更具体地，涉及丙氨酸作为疫苗佐剂的应用。
【背景技术】
[0002]丙氨酸是构成蛋白质的基本单位，是组成人体蛋白质的21种氨基酸之一。它的分子式是C3H7O2N,具有预防肾结石、协助葡萄糖的代谢，有助缓和低血糖，改善身体能量。
[0003]疫苗佐剂是一类同抗原一起或预先注射进机体，能增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。目前最经典的疫苗佐剂是弗氏佐剂，但该佐剂主要用于动物实验，但动物多次注射后常会发生佐剂病。因此发现新的安全、有效、不会引起毒副作用的免疫佐剂具有很重要的应用价值。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中疫苗佐剂种类的不足，提供丙氨酸作为疫苗佐剂的应用。
[0005]本发明所要解决的上述技术问题通过以下技术方案予以解决:
[0006]丙氨酸或其衍生物或其盐在制备疫苗佐剂方面的应用。
[0007]作为一种优选方案,所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。
[0008]作为一种最优选方案，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
[0009]丙氨酸在制备疫苗佐剂中的应用。
[0010]作为一种优选方案,所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。
[0011]作为一种最优选方案，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
[0012]丙氨酸作为疫苗佐剂在制备疫苗中的应用。
[0013]作为一种优选方案,所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。作为一种最优选方案，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
[0014]作为一种优选的方案，所述的疫苗为注射制剂，丙氨酸在所述注射制剂中的含量为 10 u moL ~Imol。
[0015]佐剂是非特异性免疫增强剂，当与抗原一起注射或预先注入机体时，可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。可以作为佐剂的物质，例如弗氏佐剂，对所有疫苗均具有佐剂作用。故丙氨酸作为佐剂同样可用于任何种类疫苗佐剂。
[0016]本发明具有如下有益效果:(1)本发明提供了一种新型的疫苗免疫佐剂；(2)本发明所述的免疫佐剂安全、有效、不会引起毒副作用。
【具体实施方式】
[0017]以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。
[0018]实施例1迟钝爱德华菌EIB202菌株的培养和处理[0019]挑取胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)平板上的迟钝爱德华菌EIB202单克隆于TSB试管中，30°C培养24h，按照1:100转接于IOOmL的TSB培养基中扩大培养。当0D600值达到1.0时离心收菌，用生理盐水洗涤两次后，用生理盐水悬浮菌体使0D600为1.0 (细菌数约109个菌/毫升)，用于实验小鼠的攻毒。
[0020]同时另取部分细菌，加入0.1%的甲醛，30°C孵育24小时使细菌灭活。然后用生理盐水洗涤3次后，用生理盐水悬浮使0D600为1.0(约109cfu/mL)，再用生理盐水稀释10倍(约108cfu/mL)，得灭活菌疫苗，用于实验小鼠的灭活菌免疫。
[0021 ] 实施例2小鼠的免疫
[0022]90只4周龄昆明鼠(平均体重25g)随机分配成3组:对照组、灭活菌免疫组和灭活菌+丙氨酸免疫组。对照组每只小鼠腹腔注射100 μ L生理盐水；灭活菌免疫组每只小鼠腹腔注射上述制备好的灭活菌疫苗100 μ L (约IO7个细菌);灭活菌+丙氨酸免疫组每只小鼠腹腔注射注射上述制备好的灭活菌疫苗100 μ L和内含丙氨酸120 μ moL的混合物。连续免疫两次，间隔7天。最后I次免疫后7天，采用EIB202攻毒，剂量为3X IO8CFU/只，观察15天，统计小鼠的死亡情况。根据公式(相对免疫保护率=[1 一(免疫对象的死亡率/未免疫对象的死亡率)]X 100%)计算相，对免疫保护率。结果见表1。
[0023]表1小鼠的免疫效果
【权利要求】
1.丙氨酸或其衍生物或其盐在制备疫苗佐剂方面的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
4.丙氨酸在制备疫苗佐剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
7.丙氨酸作为疫苗佐剂在制备疫苗中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活疫苗、减毒活疫苗或基因重组疫苗。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为灭活迟钝爱德华菌疫苗。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为注射制剂，丙氨酸在所述注射制剂中的浓度为IOymoL~Imol。
【文档编号】A61K39/39GK103520717SQ201310395462
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年9月2日 优先权日:2013年9月2日
【发明者】彭宣宪, 李惠, 王超 申请人:中山大学