环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺的制作方法
【专利摘要】环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺属于化学【技术领域】，更具体的说，本发明涉及一种环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺的改进。本发明提供一种成本低廉，合成率高，产出物肠吸收效果好的环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺。本发明的环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺，采用以下步骤：称取F68溶于125mL蒸馏水作为水相；另取50mgCyA与适量EudragitS100溶于无水乙醇制成有机相；以7号撑骨髓穿刺针迅速将有机相注入400r·min搅拌的水相中；注射完毕后持续搅拌并转入60℃水浴中，挥净有机溶剂，即得CyA-NP胶体溶液。
【专利说明】 环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺
【技术领域】
[0001]本发明属于化学【技术领域】，更具体的说，本发明涉及一种环孢素A-PH敏感性纳米粒的制备工艺的改进。
【背景技术】
[0002]环孢素A(CyA)作为一种强效的免疫抑制剂，已成功地应用于临床实体器官移植和骨髓移植，预防和治疗排斥反应，以及对多种自身免疫性疾病具有良好的疗效，是一种改变移植医学面貌的药物。然而CyA的不可逆肾毒性累及了 80%的移植病人；其强亲脂性，加上受体内广泛的外排机制和生物转化的影响，使其普通制剂口服生物利用度低，个体差异性大。目前临床上常用的自微乳制剂新山地明(Neoral)虽然改善了 CyA 口服吸收，但是自微乳中含有的增溶剂CremophorRMO能引起严重的肾脏毒性和过敏反应BI，因此开发不含CremophorRH40的新型CyA制剂已成国内外热点课题。
[0003]pH敏感性纳米粒目前比较多的用于口服给药的研究，利用胃肠道生理pH值的不同采用相应的PH敏感性载体材料制备纳米粒，口服给药后可达到胃肠道定位给药的目的，从而增加在吸收部位的药物浓度，提高药物的口服生物利用度。此外，纳米粒载带药物，可被胃肠道派依尔氏班(Peyer’ sPatches，PP)大量吸收，据报道50nm的粒子约45.4% -12.9%被吸收；且粒子越小，越易吸收，10am的粒子的吸收率为0.5—1m粒子的15—120倍；PP组织比相邻非PP组织多吸收200倍的纳米粒。环孢素A优特奇类(Eudragit)纳米粒的大鼠口服药动学，证实了 PH敏感性纳米粒能够改善CyA的口服吸收。
【发明内容】
[0004]本发明就是针对上述问题，提供了一种成本低廉，合成率高，产出物肠吸收效果好的环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺。
[0005]为实现本发明的上述目的，本发明采用如下技术方案，本发明的环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺，采用以下步骤。
[0006]称取F68溶于125mL蒸懼水作为水相；另取50mgCyA与适量EudragitSlOO溶于无水乙醇制成有机相；以7号撑骨髓穿刺针迅速将有机相注入400r -min搅拌的水相中；注射完毕后持续搅拌并转入60°C水浴中，挥净有机溶剂，即得CyA-NP胶体溶液。
[0007]本发明的有益效果。
[0008]本发明的环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺速率快，转化率高，能耗低。具有突出的经济效益。
[0009]另外，本发明可应用于工厂内，与实验室方法不同，其产量高，可实现产业化。
[0010]第三，本发明肠溶性非常好，可以快速扩散被人体吸收，达到前所未有的效果。
【具体实施方式】
[0011]本发明的环孢素A-PH敏感性纳米粒的制备工艺，采用以下步骤。
[0012]称取F68溶于125mL蒸馏水作为水相；另取50mgCyA与适量EudragitSlOO溶于无水乙醇制成有机相；以7号撑骨髓穿刺针迅速将有机相注入400r -min搅拌的水相中；注射完毕后持续搅拌并转入60°C水浴中，挥净有机溶剂，即得CyA-NP胶体溶液。
[0013]在对影响CyA.NP包封率、粒径和跨距的处方因素考察基础上，确定药物与载体材料EudragitSlOO质量比(药载比)(A)、油水比(B)、F68质量浓度(C) 3个主要因素，采用正交设计表L。(34)安排实验，进行处方工艺优化。其中药载比为1:4，1:5和1:6);油水比为1:5，2:5和3:5疋68质量浓度为0.1%,0.25%和0.5%0取新鲜制备的CyANP胶体溶液，经0.45斗m微孔滤膜过滤后，取续滤液8mL置于离心管中，超速离心2h(250000r -min一，10C )，分取上层清液，进样20mL，HPLC法分别测定续滤液和上清液中的CyA含量。色谱条件:色谱柱为PhenomenexlunaC18 (250mmX4.6mm, 5斗m)分析柱,流动相为乙腈.甲醇.水(8:1:1)，流速为1.0mL.rain?，检测波长为210nm，柱温为70°C。CyA质量浓度在I?100斗g-mL—内线性关系良好，r=0.9998按照下式计算纳米粒的回收率、包封率及载药量。精密吸取CyA — NP胶体溶液和Neoral溶液0.5mL(CyA为3mg -mL 一 )分别置于pH值为1.0,2.0,3.5,4.5,5.5,6.0,6.8,7.4的磷酸盐缓冲溶液(含SDS为0.1 % )中，放置到37oC, 10r *ram 一速度振荡的恒温摇床中，振荡2h后,将释放介质超速离心2h (250000r.ram?10°C )，分取上层清液，进样20mL，HPLC法分别测定上清液中的CyA含量。计算CyA的释放百分率。将CyA.NP胶体溶液放置在透光的血清瓶中。
[0014]闻温实验:40 C放直1d,取O, 5, 1d的样品，测定考察项目。强光照射实验:将装有CyA.NP胶体溶液的血清瓶放置在光照强度为(4500 士 500) Lx的条件下，取0，5，1d的样品测定考察项目。选择F68为乳化剂制备纳米粒，取代现有市售Neoral制剂中采用CremophorRMO作为增溶剂，1:3服给药可以有效避免Neoral产生的过敏反应，且利用肠溶材料EudragitSlOO为载体制备的pH敏感性纳米粒具有小肠突释效应,有利于小肠的吸收，可望发展一种新型CyA 口服制剂。
【权利要求】
1.环孢素A-pH敏感性纳米粒的制备工艺，其特征在于:采用以下步骤: 称取F68溶于125mL蒸懼水作为水相；另取50mgCyA与适量EudragitSlOO溶于无水乙醇制成有机相；以7号撑骨髓穿刺针迅速将有机相注入400r -min搅拌的水相中；注射完毕后持续搅拌并转入60°C水浴中，挥净有机溶剂，即得CyA-NP胶体溶液。
【文档编号】A61K38/13GK104434804SQ201310417772
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年9月15日 优先权日:2013年9月15日
【发明者】李志刚, 冯明煦, 周鹏涛 申请人:李志刚