奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体及其制备方法。该脂质体由药物、磷脂、胆固醇类化合物和水相介质组成；其中，药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1：2～100：1～35；所述的药物为奎宁类药物和长春新碱类药物。本发明利用奎宁类药物和长春新碱类药物的协同作用，使奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体具有抑制多药耐药性和降低用药毒性的特点。本发明共载脂质体的制备方法，制备工艺简单、条件温和、控制参数较少，有利于降低生产成本，易于工业化生产。
【专利说明】奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及脂质体类药剂【技术领域】，特别涉及一种奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体及其制备方法。
【背景技术】
[0002]肿瘤是威胁人类健康的主要疾病之一，而化疗药物在肿瘤的治疗中一直占据着不可替代的地位。但由于化疗药物的大量使用，肿瘤细胞极易对化疗药物产生多药耐药性(multidrug resistance, MDR),而MDR的产生是目前肿瘤化学治疗失败的一个主要原因。
[0003]长春新碱(Vincristine，VCR)是从夹竹桃科植物长春花叶中提取出来的一种二聚吲哚型的生物碱，它自1962年问世以来，一直是应用比较多的一种抗肿瘤药物。VCR对急性淋巴细胞白血病、乳腺癌、支气管肺癌、何杰金及非何杰金淋巴瘤等均具有较为显著的抗肿瘤活性。目前直接药用产品为硫酸长春新碱注射液，长春新碱虽然抗肿瘤作用良好，但是硫酸长春新碱注射液的半衰期较短，毒副作用大，神经系统毒性和胃肠道系统毒性都较强，另外其注射的局部刺激也较大，这些缺点大大限制了其在临床上的使用。
[0004]此外，由于长春新碱、阿霉素等抗肿瘤药物的大量使用容易使细胞产生多药耐药性，这是当下临床上成功地治疗癌症的一大障碍，为解决这些问题，目前主要尝试采用以下方法来逆转多药耐药性:1)MDR逆转剂；2)化疗药物的化学修饰；3)联用化疗敏感药物；4)运用纳米粒载体及后两者(即3)和4)两者)相结合。
[0005]奎宁(Quinine)，俗称金鸡纳霜，一直以来是作为一种安全、有效且价廉的预防和治疗疟原虫感染的药物使用。已有国外文献报道，奎宁可作为一些耐药相关蛋白的抑制剂，与抗癌药物联用，可降低细胞的多药耐药性，从而达到较好的抑癌效果(Reversal ofMRP-Mediated Doxorubicin Resistance with Quinoline-Based Drugs, [J]BiochemicalPharmacology, 2000, Vol.59, 1`245 - 1252.)，如多药耐药蛋白 I (MRPl)0 MRPl 属于三磷酸腺苷(ATP)结合盒(ABC)转运家庭，它能够广泛性地将胞内的抗癌药物泵出细胞外，从而大大削弱药物的抗癌作用，使细胞产生耐药(Pharmacogenomics of ABC transporters andits role in cancer chemotherapy,[J]Drug Resistant Update, 2003，Vol.6，71-84)。以往的技术中将奎宁与抗癌药物联用用以降低细胞的多药耐药性从而使抗癌药物达到较好的抑癌效果时采用的是注射用奎宁溶液(即奎宁注射液)，但早期研究已表明注射使用奎宁溶液毒性很大，甚至危及生命，而且用作耐药逆转剂时往往用量相对较大，而硫酸长春新碱注射液半衰期较短，毒副作用大，神经系统毒性和胃肠道系统毒性都较强，注射的局部刺激也较大，若奎宁注射液与硫酸长春新碱注射液联用将使毒副作用更为严重，因此迫切需要通过其它手段给以解决。
[0006]在过去的20年里，控制药物释放和肿瘤靶向的药物运载系统作为一种有吸引力的治疗手段被临床医生广泛应用，在运用的载体中，有纳米粒、白蛋白微球以及脂质体等，而脂质体作为一种化疗药物载体最近被重新探讨，由此发现了脂质体不仅可以改善药物体内分布，并能显著增加药物的抗癌效率，同时减少对正常细胞的毒性。药物用脂质体包裹后，能靶向作用于病变部位，从而提高药物的治疗指数，同时还可以减少药物的治疗剂量，降低全身不良反应，提高用药安全性。因此，现在关于长春新碱的研究多往长春新碱脂质体方向发展，主要用来降低长春新碱的神经毒性。目前，已批准临床使用或正在进行临床评价的长春新碱制剂主要是脂质体制剂，如注射用长春新碱脂质体，商品名Marqibo，虽然一定程度上减少了药物的治疗剂量，降低了长春新碱的神经毒性及对正常细胞的毒性，但是仍存在着容易使细胞产生耐药性以致抗癌效果不佳的问题。此外，现有的注射用长春新碱脂质体如中国发明专利ZL200410014200.9、中国发明专利申请CN201210030558.5等中公开的可供静脉注射的硫酸长春新碱脂质体均存在着容易使细胞产生耐药性以致抗癌效果不佳的问题。
[0007]中国发明专利申请CN02820117.5中公开了一种前胶束组合物，具有含有药物活性成分的中心的组合物，其中中心包封在含有酯化的C12-C18脂肪酸的膜中，且所述的脂肪酸在组合物中的浓度低于15wt.%，其中心可以是含有一个含有长春新碱或奎宁的亲水相和一个含有胆固醇、磷脂、亲脂性表面活性剂和未酯化脂肪酸的连续亲水相的脂质体；该发明主要是利用中心包封在含有酯化的C12-C18脂肪酸的膜中前胶束组合物在哺乳动物肠内，暴露给C12-C18脂肪酸会导致前胶束转化成稳定的胶束，以有效的输送药物活性成分到循环系统中，是一种前药的制备方案，解决多种药物无法口服给药的难题，是针对药物剂型做的研究，并未涉及针对多种药物之间的相互作用、降低抗肿瘤药物的多药耐药性等方面的研究。
【发明内容】
[0008]本发明提供了一种载体选择面广、药物包封率高的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，利用奎宁类药物和长春新碱类药物的协同作用，一定程度上克服了多药耐药性，并降低了奎宁类药物和长春新碱类药物如奎宁和长春新碱以游离形式使用时不可忽视的毒副作用。
[0009]本发明还提供了一种奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体的制备方法，采用薄膜分散法将奎宁类药物和长春新碱类药物(如奎宁和长春新碱)两者共同装载入脂质体，制得奎宁类药物和长春新碱类药物 共载脂质体，制备工艺简单、条件温和、控制参数较少，有利于降低生产成本，易于工业化生产。
[0010]一种奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，由药物、磷脂、胆固醇类化合物和水相介质组成；其中，药物、磷脂与胆固醇类化合物的质量比为1:2~100:1~35 ;
[0011]所述的药物为奎宁类药物和长春新碱类药物。
[0012]优选的，所述的药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1:6.6~40:1.6~25 ;进一步优选，药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1:6.6~25:1.6~4。
[0013]所述的奎宁类药物和长春新碱类药物为主要的药效成分，奎宁类药物和长春新碱类药物的比例可以由本领域技术人员根据实际需要任意调整，奎宁类药物和长春新碱类药物的质量比可以是I~100:1~100，优选为1:0.5~5，进一步优选为1:0.5~2。优选的用量，奎宁类药物和长春新碱类药物的协同增效作用更显著。
[0014]所述的奎宁类药物包括奎宁、奎宁与酸所成的盐中的一种或多种；所述的奎宁与酸所成的盐可选用一盐酸奎宁、二盐酸奎宁、硫酸奎宁等中的一种或多种。
[0015]所述的长春新碱类药物包括长春新碱、硫酸长春新碱等中的一种。[0016]所述的磷脂可选用天然磷脂、合成磷脂中的一种或两种；所述的天然磷脂选用大豆磷脂、卵磷脂中的一种或两种；所述的合成磷脂选用中性磷脂、负电性磷脂或聚乙二醇修饰磷脂中的至少一种，合成磷脂具体选用二豆蘧酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二棕榈酰磷脂酰甘油酯(DPPG)、磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰丝氨酸(PS)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)中的至少一种。
[0017]所述的胆固醇类化合物可选用普通胆固醇、聚乙二醇(PEG)修饰的胆固醇中的一种或者两种，所述的聚乙二醇(PEG)修饰的胆固醇选用聚乙二醇单甲醚胆固醇琥珀酸酯(CHS-PEG)0
[0018]所述的水相介质选用磷酸盐缓冲系统(即PBS缓冲液)或水。所述的磷酸盐缓冲系统选用PH值为7.0~7.6的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液，优选pH值为7.4的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液。
[0019]所述的水相介质主要是用于乳化磷脂和胆固醇得到脂质体，其用量并没有严格的限制，以能够得到脂质体悬液为宜。
[0020]本发明所述的原料均可采用现有产品，如现有市售产品。
[0021]所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体的制备方法，包括以下步骤:
[0022]将磷脂和胆固醇类化合物溶于有机溶剂中，再加入用有机溶剂溶解的药物，充分溶解后混合均匀，除去有机溶剂，然后加入水相介质混合均匀，分离出游离药物，得到奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体。
[0023]上述步骤中，所述的有机溶剂选用无水乙醇或者氯仿(三氯甲烷)。所述的有机溶剂用于溶解磷脂、胆固醇类化合物和药物，其用量并没有严格的限制，以能够完全溶解目标物质(如磷脂、胆固醇类化合物和/或药物)为宜。
[0024]上述步骤中，除去有机溶剂`，然后加入水相介质后，可通过高压匀乳、超声或微射流进行粉碎，使其混合均匀，得到粒径低于IOOnm的脂质体悬液。
[0025]上述步骤中，分离出游离药物的方法可采用S印hadex G_50凝胶柱层析法或透析法。
[0026]所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体可作为抗癌药物治疗癌症等疾病，对肿瘤细胞具有较高的杀伤力。
[0027]本发明采用动态光散射粒径仪(Malvern Zetasizer Nano_S90,英国)检测粒径。
[0028]本发明具有如下优点:
[0029]( I)本发明奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体使奎宁类药物和长春新碱类药物协同作用，从而提高了对肿瘤细胞的杀伤力，并且奎宁类药物和长春新碱类药物的协同作用相对可以减少药物的使用量，减小了毒副作用。
[0030](2)本发明奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，能够有效抑制细胞的多药耐药性，可以明显逆转单一长春新碱类药物脂质体的耐药性。
[0031](3)在奎宁的毒性范围内(<50μ g/ml)，奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体随着奎宁类药物的量的增多，半抑制浓度(IC50)降低。
[0032](4)本发明磷脂选择面广，可使用天然卵磷脂或大豆磷脂，也可使用合成的中性磷脂或负电性磷脂等。
[0033]( 5 )通过本发明方法制得的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，药物包封率可达到70%以上，粒径可低于lOOnm，具有包封率高、稳定性好、成本低等优点。
[0034](6)采用薄膜分散法将奎宁类药物和长春新碱类药物同时装载入脂质体，制备奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，制备方法操作简便，且包封率高，可控性和重现性好。
【具体实施方式】
[0035]下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明权利范围的限制。
[0036]实施例1
[0037]称取350mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和70mg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和20mg—盐酸奎宁(即长春新碱和一盐酸奎宁均溶解于无水乙醇中，下同)，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为38.6nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为70.39%，载药量为3.35%。
[0038]实施例2
[0039]称取400mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和40mg —盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为45.8nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为83.90%，载药量为3.36%ο
[0040]实施例3
[0041 ] 称取400mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和80mg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和IOmg —盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为35.7nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为79.20%，载药量为3.30%ο
[0042]实施例4
[0043]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和80mg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的IOmg长春新碱和IOmg—盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为40.6nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为90.90%，载药量为1.57%。
[0044]实施例5
[0045]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，置于烧瓶中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg硫酸长春新碱和20mg—盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mLPBS(磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml硫酸长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该硫酸长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为37.6nm，用Sephadex G-50凝胶柱层析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，硫酸长春新碱包封率为80.90%，载药量为2.70%。
[0046]实施例6
[0047]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和IOOmg胆固醇溶解于4mL无水乙醇中，再加入用2ml无水乙醇溶解的20mg硫酸长春新碱和20mg —盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为39.6nm,用Sephadex G_50凝胶柱层析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物,长春新碱包封率为83.90%，载药量为2.80%。
[0048]实施例7
[0049]称取420mg 二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、80mg磷脂酰乙醇胺(PE)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和20mg —盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mLPBS ( 磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为43.6nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为97.90%，载药量为3.26%。
[0050]实施例8
[0051]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)，50mg胆固醇和聚乙二醇单甲醚(分子量为2000)胆固醇琥珀酸酯(CHS-PEG2000) 50mg溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和20mg—盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为45.7nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为94.90%，载药量为3.16%。
[0052]实施例9
[0053]称取400mgDSPC、IOOmgDPPG和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和20mg—盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为35.9nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为96.50%，载药量为3.22%。
[0054]实施例10
[0055]称取480mg 二豆蘧酰磷脂酰胆碱(DMPC)、120mg磷脂酰丝氨酸(PS)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg长春新碱和20mg —盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mLPBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml长春新碱和奎宁共载脂质体悬液，测得该长春新碱和奎宁共载脂质体悬液的平均粒径(数均)为41.7nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，长春新碱包封率为98.90%，载药量为2.82%。
[0056]对比例I
[0057]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg硫酸长春新碱，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS(磷酸盐，pH=7.4)缓冲液,润旋5min,最后用细胞粉碎仪超声IOmin,得到5ml硫酸长春新碱单载脂质体悬液，测得该硫酸长春新碱单载脂质体悬液的平均粒径(数均)为48.9nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，硫酸长春新碱包封率为96.41%，载药量为3.21%。
[0058]对比例2
[0059]称取500mg大豆磷脂(磷脂酰胆碱纯度>76%)和IOOmg胆固醇溶解于6mL无水乙醇中，再加入用4ml无水乙醇溶解的20mg—盐酸奎宁，充分溶解后混合均匀，然后减压蒸去有机溶剂乙醇，使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成均匀脂膜，然后加入5mL PBS (磷酸盐，pH=7.4)缓冲液，涡旋5min`，最后用细胞粉碎仪超声lOmin，得到5ml —盐酸奎宁单载脂质体悬液，测得该一盐酸奎宁单载脂质体悬液的平均粒径(数均)为58.6nm，用透析法分离脂质体和未被包封在内的游离药物，奎宁包封率为86.41%，载药量为2.88%。
[0060]细胞毒性对比实验
[0061]将作为对照组I的游离硫酸长春新碱水溶液和作为对照组2的游离一盐酸奎宁水溶液、对比例制备的脂质体、实施例制备的各种长春新碱类药物和奎宁类药物不同比例的脂质体分别用于细胞实验，采用MTT (噻唑蓝)比色法进行实验，步骤如下:
[0062]对数生长期的的癌细胞用胰蛋白酶消化、含0.05%吐温-20的PBS缓冲液(即:含
0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液)洗涤、离心后将其制备成浓度为IX 104/ml~5 X 104/ml的细胞悬液，将该悬液按100 μ I/孔均匀加入96孔细胞培养板中，每孔细胞数为1000~5000个。将细胞板置于37°C孵箱中，孵育24h，显微镜下观察可见细胞融合贴壁生长。分别将载药脂质体及奎宁溶于生理盐水中，所有溶液以其中长春新碱的含量为基准，稀释成不同浓度，向上述96孔细胞培养板中加入上述不同浓度的长春新碱溶液25ul/孔，培养48h后，每孔加入32 μ I浓度为5mg/ml噻唑蓝(MTT)溶液，继续培养4h，吸出上清液，加Λ 200 μ I 二甲基亚砜(DMS0)，然后振摇5min。用酶标仪检测各孔570nm处的OD值，记录结果。上述实验，每组重复3次，每个浓度设4个复孔。
[0063]IC50即50%抑制浓度或半抑制浓度，是抑制半数癌细胞生长时的药物浓度，IC50值越低，说明细胞毒性作用越大。试验中IC5tl值由IC5tl.exe软件计算得到。并且实验结果显示，同一奎宁类药物和长春新碱类药物比例，不同种类的磷脂和胆固醇对于IC5tl几乎没有影响。
[0064]对照组1、对照组2、对比例1、对比例2及实施例2、3、4和5制备的脂质体对两种敏感细胞株HCT-8 (结肠癌细胞)和MCF-7 (人乳腺癌细胞)及对应的耐药细胞株HCT-8/V和MCF-7/A的IC5tl ( μ g/ml)值，如表1和表2所示:
【权利要求】
1.一种奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，由药物、磷脂、胆固醇类化合物和水相介质组成；其中，药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1:2~100:1~35 ； 所述的药物为奎宁类药物和长春新碱类药物； 所述的奎宁类药物为奎宁、奎宁与酸所成的盐中一种或多种； 所述的长春新碱类药物为硫酸长春新碱、长春新碱中的一种； 所述的胆 固醇类化合物为胆固醇、聚乙二醇修饰的胆固醇中的一种或者两种。
2.根据权利要求1所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1:6.6~40:1.6~25。
3.根据权利要求2所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的药物、磷脂和胆固醇类化合物的质量比为1:6.6~25:1.6~4。
4.根据权利要求1所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的奎宁与酸所成的盐为一盐酸奎宁、二盐酸奎宁、硫酸奎宁中的一种或两种以上。
5.根据权利要求1所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂中的一种或两种；所述的天然磷脂为大豆磷脂、卵磷脂中的一种或两种；所述的合成磷脂为中性磷脂、负电性磷脂或聚乙二醇修饰磷脂中的一种或两种以上。
6.根据权利要求5所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的合成磷脂为二豆蘧酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰甘油酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇中的一种或两种以上。
7.根据权利要求1所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的水相介质为磷酸盐缓冲系统或水。
8.根据权利要求7所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的磷酸盐缓冲系统为pH值为7.0~7.6的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液。
9.根据权利要求1所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体，其特征在于，所述的奎宁类药物和长春新碱类药物的质量比为I~100:1~100。
10.根据权利要求1~9任一项所述的奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 将磷脂和胆固醇类化合物溶于有机溶剂中，再加入用有机溶剂溶解的药物，充分溶解后混合均匀，除去有机溶剂，然后加入水相介质混合均匀，分离出游离药物，得到奎宁类药物和长春新碱类药物共载脂质体。
【文档编号】A61K31/475GK103520159SQ201310459568
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年9月29日 优先权日:2013年9月29日
【发明者】邱利焱, 许玉珍 申请人:邱利焱