皮肤外用剂及正常皮肤细胞赋活化剂的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种皮肤外用剂及正常皮肤细胞赋活化剂，其含有番茄红素及虾青素，且番茄红素及虾青素的总含量为0.00001质量％～0.2质量％的范围。
【专利说明】皮肤外用剂及正常皮肤细胞赋活化剂
【技术领域】
[0001] 本发明涉及皮肤外用剂及正常皮肤细胞赋活化剂。
【背景技术】
[0002] 已知类胡萝卜素具有各种生理活性。例如，在Mol. Cancer Ther.，2005, Vol. 4(1)， PP177-186中对于某种癌与类胡萝卜素的关系进行了公开。此外，在日本特表2009-511570 号公报中公开了番茄红素或其衍生物抑制乳腺癌细胞或前列腺癌细胞的增殖。然而，没有 进行关于在其以外的细胞中的效果的详细研究。
[0003] 此外，在化妆品领域，已知有配合了作为类胡萝卜素的一种的番茄红素的化妆料 等。记载了通过在化妆料中配合番茄红素，可以得到抗氧化、活性氧除去等效果（例如，日 本特开2000-229827号公报、日本特开2002-128651号公报）。
[0004] 此外，已知樱草、石松等具有真皮成纤维细胞、表皮细胞的赋活化效果（日本专利 3507055号公报、日本专利3389580号公报）。
【发明内容】
[0005] 发明所要解决的课题
[0006] 如上所述，迄今为止对番茄红素所具有的生理活性进行了研究，但尚未进行其全 面的阐明。
[0007] 另一方面，将具有细胞赋活化之类的生理活性效果的成分配合到皮肤外用剂等制 剂中时，还要求制剂的经时稳定性。然而，尚未提供同时实现优异的细胞赋活化效果和良好 的经时稳定性的皮肤外用剂。
[0008] 本发明是鉴于上述情况而完成的，其课题是提供具有细胞赋活化效果、且经时稳 定性优异的皮肤外用剂。
[0009] 用于解决课题的方案
[0010] 用于解决上述课题的方案如下所述。
[0011] [1] 一种皮肤外用剂，其含有番茄红素及虾青素，且番茄红素与虾青素的总含量为 0· 00001质量％?0· 2质量％的范围。
[0012] [2]根据[1]所述的皮肤外用剂，其中，以包含番茄红素的分散物的形式含有番茄 红素。
[0013] [3]根据[2]所述的皮肤外用剂，其含有包含番茄红素、选自单糖或多糖的脂肪酸 酯及聚甘油脂肪酸酯中的至少1种、和卵磷脂的分散物。
[0014] [4]根据[1]?[3]中任一项所述的皮肤外用剂，其中，以包含虾青素的分散物的 形式含有虾青素。
[0015] [5]根据[4]所述的皮肤外用剂，其含有分散物，所述分散物包含虾青素、选自单 糖或多糖的脂肪酸酯及聚甘油脂肪酸酯中的至少1种、和卵磷脂。
[0016] [6]根据[1]?[5]中任一项所述的皮肤外用剂，其中，番茄红素与虾青素的质量 比为 0· 01 : 1 ?25 : 1。
[0017] [7]根据[1]?[6]中任一项所述的皮肤外用剂，其还包含选自由生育酚及其衍生 物组成的化合物组中的至少1种。
[0018] [8]根据[7]所述的皮肤外用剂，其中，番茄红素及虾青素与选自由生育酚及其衍 生物组成的化合物组中的至少1种的质量比为1 : 50?1 : 0. 5。
[0019] [9]根据[1]?[8]中任一项所述的皮肤外用剂，其中，皮肤外用剂为水性化妆料。
[0020] [10] -种正常皮肤细胞赋活化剂，其含有番茄红素及虾青素，且番茄红素与虾青 素的总含量为〇. 00001质量％?〇. 2质量％的范围。
[0021] [11]根据[10]所述的正常皮肤细胞赋活化剂，其中，番茄红素与虾青素的质量比 为 0· 01 : 1 ?25 : 1。
[0022] [12] -种皮肤外用剂，其包含[10]或[11]所述的正常皮肤细胞赋活化剂。
[0023] [13] -种化妆料，其包含[10]或[11]所述的正常皮肤细胞赋活化剂。
[0024] 发明效果
[0025] 根据本发明，能够提供具有细胞赋活化效果、且经时稳定性优异的皮肤外用剂。
【具体实施方式】
[0026] 以下，对本发明进行详细说明。
[0027] 另外，本说明书中使用"?"表示的数值范围表示包含"?"的前后记载的数值分 别作为最小值及最大值的范围。
[0028] 本发明中所谓"水相"不论溶剂的种类如何作为相对于"油相"的词语使用。
[0029] 本说明书中"工序"的词语不仅包括独立的工序，在无法与其他工序明确区别的情 况下只要可达成本工序的所期望的效果，也就包含在本用语中。
[0030] 本发明中，关于组合物中的各成分的量，在组合物中存在多种符合各成分的物质 的情况下，只要没有特别说明，是指组合物中存在的该多种物质的总量。
[0031] [皮肤外用剂]
[0032] 本发明的皮肤外用剂含有番茄红素及虾青素，它们的总含量为0. 00001质量％? 0. 2质量％的范围。
[0033] 本发明的皮肤外用剂通过含有番茄红素及虾青素这两者，且将它们的总含量设为 规定的范围内，可以发挥细胞赋活化效果及制成制剂时的稳定性这两者。
[0034] 本发明的皮肤外用剂中，番茄红素及虾青素作为可作为在正常皮肤细胞中具有细 胞赋活化效果的有效成分发挥功能的成分含有。
[0035] 这里，本发明中的所谓"细胞赋活化效果"是指促进皮肤细胞的增殖或活性亢进， 结果是促进皮肤中的抗皱纹、抗老化、抗松弛、保湿等效果。
[0036] 此外，本发明中所谓"经时稳定性"是指将皮肤外用剂进行制剂化时，制剂的稳定 性不会因经时而损害地持续。
[0037] 以下，对本发明的皮肤外用剂中含有的各成分进行详细说明。
[0038] 本发明的皮肤外用剂中，番茄红素及虾青素是作为在正常皮肤细胞中具有细胞赋 活化效果的功能性成分含有的成分。
[0039] 本发明的皮肤外用剂中，番茄红素及虾青素的总含量为0. 00001质量％?0. 2质 量％的范围，在该范围内，可以使细胞赋活效果亢进，同时经时稳定性也变得优异。
[0040] 番茄红素及虾青素的总含量的下限值为0.00001质量％以上，优选0.00005质 量％以上,更优选0. 0001质量％以上。若番爺红素及奸青素的总含量低于0. 00001质量％, 则得不到细胞赋活效果。
[0041] 作为番茄红素及虾青素的总含量，更优选为0. 0005质量％以上且0. 2质量％以 下，进一步优选为0. 001质量％以上且0. 1质量％以下。
[0042] 番茄红素及虾青素的总含量的上限值为0. 2质量％以下，若超过0. 2质量％，则经 时稳定性受损。例如，若是要求透明性的制剂，则浊度上升而商品价值受损。
[0043] 番茄红素与虾青素的质量比（番茄红素：虾青素）优选为0.01 : 1?25 : 1，更 优选为0.05 : 1?15 : 1，进一步优选为0.05 : 1?10 : 1。
[0044] 〈番茄红素〉
[0045] 本发明中的番茄红素（lycopene)是以化学式C4(IH56表示的类胡萝卜素，属于类胡 萝卜素的一种胡萝卜素类，是在474nm(丙酮）下显示最大吸收的红色色素。
[0046] 番茄红素中还存在分子中央的共轭双键的顺式_、反式-的异构体，例如可列举出 全反式_、9-顺式体和13-顺式体等，但本发明中，可以是它们中的任一者。
[0047] 番茄红素也可以作为从含有其的天然物中分离或提取的含番茄红素的油或含番 茄红素的糊剂而包含于本发明的皮肤外用剂中。
[0048] 番茄红素在天然中包含于西红柿、柿子、西瓜、粉红葡萄柚中，上述的含番茄红素 的油也可以是从这些天然物中分离或提取的油。在产品中的形态已知有油型、乳化液型、糊 剂型、粉末型这4种。
[0049] 此外，本发明中使用的番茄红素可以是提取物、将提取物根据需要适当纯化而得 到的物质、或合成品。
[0050] 作为本发明中的番茄红素的特别优选的形态之一，可列举出从西红柿浆料中提取 的脂溶性提取物。从在包含脂溶性提取物的组合物中的稳定性、品质或生产率的方面出发， 从西红柿浆料中提取的脂溶性提取物是特别优选的。
[0051] 其中，从西红柿浆料中提取的脂溶性提取物是指从通过对将西红柿粉碎而得到的 粉碎物进一步进行离心分离而得到的浆料状的固体物质中使用油性溶剂提取的提取物。
[0052] 作为脂溶性提取物即番茄红素，可以使用作为含番茄红素的油或糊剂广泛市 售的西红柿提取物，例如可列举出由Sunbright Co.，Ltd.出售的Lyc-0-Mato 15 %、 Lyc-〇-Mato 6%、由协和发酵工业（株）出售的番茄红素18等。
[0053] 本发明的皮肤外用剂中，优选以包含番茄红素的分散物的形式含有番茄红素。通 过以分散物的形态含有番茄红素，可以使番茄红素在皮肤外用剂的体系中稳定地含有。
[0054] 包含番茄红素的分散物可以是水包油型分散物（0/W型分散物），也可以是油包水 型分散物（W/0型分散物），可以根据皮肤外用剂的剂型选择。包含番茄红素的分散物更优 选为包含番茄红素作为油相成分之一的水包油型分散物。
[0055] 包含番茄红素的分散物也可以在包含番茄红素的同时包含虾青素，兼作后述的包 含虾青素的分散物。
[0056] 本发明的皮肤外用剂中的番茄红素的含量根据皮肤外用剂的剂型的不同而不同， 相对于皮肤外用剂的总质量，优选为超过〇. 00001质量％且低于〇. 2质量％，更优选为 0. 00005质量％?0. 1质量％，进一步优选为0. 0001质量％?0. 05质量％。
[0057] 〈虾青素〉
[0058] 本发明中的虾青素包含虾青素及虾青素的酯等衍生物中的至少一者。本发明中只 要没有特别指定，将它们总称为"虾青素"。
[0059] 本发明中使用的虾青素除了可以是植物类、藻类、甲壳类及细菌等天然物以外，只 要是按照常规方法得到的则均可以使用。
[0060] 作为天然物的虾青素，例如可列举出红发夫酵母、绿藻红球藻、海洋性细菌、磷虾 等。此外，可列举出从来自其培养物的提取物等中提取的提取物。
[0061] 虾青素也可以作为从含有虾青素的天然物中作为分离或提取物得到的含虾青素 的油包含于本发明的皮肤外用剂中。虾青素也可以是进一步将来自该天然物的分离或提取 物根据需要适当纯化而得到的物质，此外，也可以是合成品。
[0062] 作为虾青素，从红球藻中提取的物质（也称为红球藻提取物。）、及来自磷虾的色 素从品质或生产率的方面出发是特别优选的。
[0063] 作为本发明中可使用的来自红球藻提取物的虾青素，具体而言，可列举出来自从 雨生红球藻（Haematococcus pluvialis)、湖泊红球藻（Haematococcus lacustris)、好 望角红球藻（Haematococcus capensis)、Haematococcus droebakensis、津巴布韦红球藻 (Haematococcus zimbabwiensis)等中提取的提取物的奸青素，但并不限定本发明。
[0064] 本发明中可使用的红球藻提取物也可以通过对上述的原料根据需要利用例如日 本特开平5-68585号公报等中公开的方法将细胞壁破碎后加入丙酮、醚、氯仿及醇（乙醇、 甲醇等）等有机溶剂、或超临界状态的-氧化碳等提取溶剂进行提取而获得。
[0065] 此外，本发明中，可以使用广泛市售的红球藻提取物，例如可以作为武田纸器 (株）制的六51'(^5-5、六51'(^5-2.5 0、六51'(^5-5 0、六51'(^5-100等、富士化学工业（株）制 的 AstaREAL Oil 50F、AstaREAL Oil 5F等、东洋酵素化学（株）制的 BioAstin SCE7 等获 得。
[0066] 从组合物制造时的处理的观点出发，本发明中可使用的红球藻提取物中的虾青素 类的以色素纯分计的含量优选为〇. 001质量％?50质量％，更优选为0. 01质量％?25质 量％。
[0067] 另外，本发明中可使用的红球藻提取物也可以与日本特开平2-49091号公报记载 的色素同样地作为色素纯分包含虾青素或其酯体，这种情况下，可以优选使用通常包含50 摩尔％以上、优选包含75摩尔％以上、更优选包含90 %摩尔以上的酯体的物质。
[0068] 本发明的皮肤外用剂中，虾青素优选作为包含虾青素的分散物含有。通过以分散 物的形态含有虾青素，可以使虾青素在皮肤外用剂的体系中稳定地含有。
[0069] 包含虾青素的分散物可以是水包油型分散物（0/W型分散物），也可以是油包水型 分散物（W/0型分散物），可以根据皮肤外用剂的剂型选择。包含虾青素的分散物更优选为 包含虾青素作为油相成分之一的水包油型分散物。
[0070] 本发明的皮肤外用剂中的虾青素的含量只要满足本发明所述的番茄红素及虾青 素的总含量，则可以根据皮肤外用剂的形态适当选择。从细胞赋活化效果及经时稳定性的 观点出发，相对于皮肤外用剂的总质量，优选为超过〇. 00001质量％且低于〇. 2质量％，更 优选为〇. 00005质量％?0. 1质量％，进一步优选为0. 0001质量％?0. 05质量％。
[0071] 〈表面活性剂〉
[0072] 本发明的皮肤外用剂中，以包含番茄红素的分散物的形态含有番茄红素时，包含 番茄红素的分散物优选为含有1种或2种以上表面活性剂的分散物。此外，本发明的皮肤 外用剂中，作为乳液等乳化组合物构成皮肤外用剂的剂型时，也可以含有表面活性剂作为 乳化剂。
[0073] 此外，本发明的皮肤外用剂中，以包含虾青素的分散物的形态含有虾青素时，包含 虾青素的分散物优选为含有1种或2种以上表面活性剂的分散物。
[0074] 此外，本发明的皮肤外用剂中，作为乳液等乳化组合物构成皮肤外用剂的剂型时， 也可以含有表面活性剂作为乳化剂。
[0075] 作为本发明中可适用的表面活性剂，可以是阴离子性表面活性剂、阳离子性表面 活性剂、两性表面活性剂、及非离子性表面活性剂中的任一种。
[0076] 此外，作为本发明中的表面活性剂，从乳化力的观点出发，HLB优选为10以上，更 优选为12以上。若HLB过低，则有时乳化力变得不充分。另外，从抑泡效果的观点出发，也 可以并用HLB = 5以上且低于10的表面活性剂。
[0077] 这里，HLB是通常在表面活性剂的领域中使用的亲水性-疏水性的平衡，可以使用 通常采用的计算式、例如川上式等。下面示出川上式。
[0078] HLB = 7+11. 71og(Mw/Mo)
[0079] 其中，Mw为亲水基的分子量，Mo为疏水基的分子量。
[0080] 此外，也可以使用商品目录等中记载的HLB的数值。
[0081] 此外，由上述的式子获知，利用HLB的加成性，可以得到任意的HLB值的乳化剂。
[0082] 表面活性剂中，从为低刺激性、对环境的影响少等出发，优选非离子性表面活性 齐U。作为非离子性表面活性剂的例子，可列举出单糖或多糖的脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、 有机酸单甘油酯、丙二醇脂肪酸酯、聚甘油缩合蓖麻醇酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙 烯山梨糖醇酐脂肪酸酯等。
[0083] 作为包含番茄红素的分散物、包含虾青素的分散物中包含的表面活性剂，从分散 物的稳定性的观点出发，优选包含选自单糖或多糖的脂肪酸酯、及聚甘油脂肪酸酯中的至 少1种。
[0084] 作为构成单糖或多糖的脂肪酸酯的单糖或多糖，可列举出葡萄糖、蔗糖等。
[0085] 作为单糖或多糖的脂肪酸酯，更优选单糖或多糖与碳原子数为6?22的直链或具 有支链的脂肪酸的酯体。从制作稳定性高的皮肤外用剂的观点出发，进一步优选蔗糖肉豆 蘧酸酯、蔗糖棕榈酸酯、蔗糖硬脂酸酯、蔗糖油酸酯，最优选蔗糖硬脂酸酯。
[0086] 作为聚甘油脂肪酸酯，更优选聚合度为2以上的聚甘油与碳原子数为6?22的直 链或具有支链的脂肪酸的酯体。
[0087] 作为聚甘油脂肪酸酯，从制作稳定性高的皮肤外用剂的观点出发，进一步优选月 桂酸聚甘油酯-6、肉豆蘧酸聚甘油酯_6、硬脂酸聚甘油酯-6、油酸聚甘油酯-6、月桂酸聚 甘油酯-10、肉豆蘧酸聚甘油酯-10、硬脂酸聚甘油酯-10、单油酸十甘油酯、油酸聚甘油 酯-10。此外，最优选单油酸十甘油酯、油酸十甘油酯-10。
[0088](磷脂质）
[0089] 进而，本发明的皮肤外用剂中，以包含番茄红素的分散物的形态含有番茄红素时， 包含番茄红素的分散物优选为含有卵磷脂等磷脂质的分散物。
[0090] 此外，本发明的皮肤外用剂中，以包含虾青素的分散物的形态含有虾青素时，包含 虾青素的分散物优选为含有卵磷脂等磷脂质的分散物。
[0091] 此外，本发明的皮肤外用剂中，作为乳液等乳化组合物构成皮肤外用剂的剂型时， 也可以含有磷脂质作为乳化剂。
[0092] 本发明中可使用的磷脂质是包含甘油骨架和脂肪酸残基及磷酸残基、且其上键合 有喊或多兀醇等的物质，也称为卵憐脂。憐脂质由于在分子内具有未水基和疏水基，所以一 直以来在食品、医药品、化妆品领域中作为乳化剂被广泛使用。
[0093] 产业上卵磷脂纯度为60%以上的物质作为卵磷脂被利用，本发明中也可以利用， 但从微细的油滴粒径的形成及功能性油性成分的稳定性的观点出发，优选通常称为高纯度 卵磷脂的物质，其是卵磷脂纯度为80%以上、更优选为90%以上的物质。
[0094] 作为磷脂质，可列举出从植物、动物及微生物的生物体中提取分离的以往公知的 各种磷脂质。
[0095] 作为这样的磷脂质的具体例子，例如可列举出来自大豆、玉米、花生、油菜籽、麦等 植物、蛋黄、牛等动物及大肠杆菌等微生物等中的各种卵磷脂，其中优选为来自蛋黄的卵磷 脂或来自大豆的卵磷脂，更优选来自大豆的卵磷脂。
[0096] 若以化合物名例示出这样的卵磷脂，则可列举出磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌 醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甲基乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、双磷脂酸、双磷脂酰甘 油（心磷脂）、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰胆碱等甘油卵磷脂；鞘磷脂等鞘卵磷 脂等。
[0097] 此外，本发明中，除了上述的高纯度卵磷脂以外，还可以使用氢化卵磷脂、酶分解 卵磷脂、酶分解氢化卵磷脂、羟基卵磷脂等。本发明中可使用的这些卵磷脂可以单独或以多 种混合物的形态使用。
[0098]〈其他成分〉
[0099] 本发明的皮肤外用剂中，根据其形态、目的等，可以适当选择含有番茄红素及虾青 素以外的其他成分。作为其他成分的合适的例子，例如可列举出功能性油性成分、乳化剂、 其他添加成分等。
[0100](功能性油性成分）
[0101] 作为功能性油性成分，只要是不溶解于水性介质、溶解于油性介质的油溶性成分， 就没有特别限定，可以适当选择使用具有与目的对应的物性或功能性的物质。作为其他油 性成分，可列举出通常作为紫外线吸收剂、抗炎症剂、保湿剂、毛发保护剂、美白剂、抗老人 斑剂、细胞赋活剂、润肤剂、角质溶解剂、抗静电剂、脂溶性维生素类、代谢综合症改善剂、降 压剂、镇静剂等使用的物质。
[0102] 其中，功能性油性成分是指存在于生物体内时在生物体中可期待发挥所期望的生 理学作用的油性成分。
[0103] 作为功能性油性成分的例子，可列举出包含天然型神经酰胺类、鞘糖脂质等糖改 性神经酰胺等神经酰胺及神经酰胺类似物的神经酰胺类、橄榄油、山茶油、澳洲坚果油、蓖 麻油、椰子油等油脂类；液体石蜡、石蜡、凡士林、纯地蜡、微晶蜡、角鲨烷等烃；巴西棕榈 蜡、小烛树蜡、霍霍巴油、蜂蜡、羊毛脂等蜡类；肉豆蘧酸异丙酯、肉豆蘧酸2-辛基十二烷基 酯、2-乙基己酸鲸蜡酯、苹果酸二异硬脂酯等酯类；棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸等脂肪酸类； 鲸蜡醇、硬脂醇、异硬脂醇、2-辛基十二烷醇等高级醇类；甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧 烷等硅油；甘油的脂肪酸酯类；维生素 E (生育酚）类、维生素 A类、维生素 D类等脂溶性维 生素；此外，高分子类、番茄红素及叶黄素以外的其他类胡萝卜素类等油溶性色素类、油溶 性蛋白质等。此外，也包含作为它们的混合物的各种来自植物的油、来自动物的油。从使包 含番茄红素及虾青素的皮肤外用剂的经时稳定性显著提高的方面考虑，本发明的皮肤外用 剂优选配合维生素 E (生育酚）类作为功能性油性成分。
[0104] 作为维生素E (生育酚）类，可列举出选自由生育酚及其衍生物组成的化合物组中 的物质。它们可以单独使用，也可以组合多种使用。
[0105] 作为由生育酚及其衍生物组成的化合物组，包含dl-α -生育酚、dl-β -生育酚、 dl- γ -生育酚、dl- δ -生育酚、醋酸dl- α -生育酚、醋酸dl- β -生育酚、醋酸dl- γ -生 育酚、醋酸dl- δ -生育酚、烟酸dl- α -生育酚、烟酸dl- β -生育酚、烟酸dl- γ -生育酚、 烟酸dl- δ -生育酚、亚油酸dl- α -生育酚、亚油酸dl- β -生育酚、亚油酸dl- γ -生育酚、 亚油酸dl- δ -生育酚、琥珀酸dl- α -生育酚、琥珀酸dl- β -生育酚、琥珀酸dl- γ -生育 酚、琥珀酸dl-δ-生育酚等。它们中，更优选dl-α-生育酚、dl-β-生育酚、dl-γ-生 育酚、dl- δ -生育酚及它们的混合物（混合生育酚）。此外，作为生育酚衍生物，优选醋酸 dl- α -生育酚、醋酸dl- β -生育酚、醋酸dl- γ -生育酚、醋酸dl- δ -生育酚及它们的混合 物（醋酸生育酚）。
[0106] 作为本发明的皮肤外用剂中的生育酚及其衍生物的含量，相对于皮肤外用剂的总 质量，优选为0. 00001质量％?2质量％，更优选为0. 00005质量％?1. 5质量％，进一步 优选为〇. 0001质量％?1质量％。
[0107] 番茄红素及虾青素与生育酚及其衍生物的质量比（番茄红素+虾青素：生育酚及 其衍生物）优选为1 : 50?1 : 0.5,更优选为1 : 25?1 : 0.75,进一步优选为1 : 10? 1 ： 1〇
[0108] (其他添加成分）
[0109] 除了上述成分以外，可以使本发明的皮肤外用剂中根据其形态适当含有在食品、 化妆品等领域中通常使用的添加成分。
[0110] 其他添加成分可以根据其特性作为油溶性或水溶性的添加成分含有于本发明的 皮肤外用剂中。
[0111] 例如，作为其他添加成分，可列举出甘油、1，3-丁二醇等多元醇；Κ-角叉菜聚糖、 刺槐豆胶、瓜尔胶、羟丙基瓜尔胶、黄原胶、剌梧桐树胶、罗望子种子多糖、阿拉伯树胶、黄蓍 胶、透明质酸、透明质酸钠、软骨素硫酸钠、糊精等单糖类或多糖类；山梨糖醇、甘露糖醇、 麦芽糖醇、乳糖、麦芽三糖醇、木糖醇等糖醇；氯化钠、硫酸钠等无机盐；酪蛋白、白蛋白、甲 基化胶原、水解胶原、水溶性胶原、明胶等分子量超过5000的蛋白质；甘氨酸、丙氨酸、缬氨 酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、羟基 赖氨酸、精氨酸、组氨酸、苯基丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、乙酰基羟基脯 氨酸等氨基酸及它们的衍生物；羧基乙烯基聚合物、聚丙烯酸钠、聚乙烯基醇、聚乙二醇、环 氧乙烷?环氧丙烷嵌段共聚物等合成高分子；羟乙基纤维素?甲基纤维素等水溶性纤维素 衍生物；类黄酮类（儿茶素、花青苷、黄酮、异黄酮、黄烷、黄烷酮、芦丁）、抗坏血酸或其衍生 物（抗坏血酸、抗坏血酸钠、抗坏血酸钾、抗坏血酸钙、L-抗坏血酸磷酸酯、磷酸抗坏血酸 镁、磷酸抗坏血酸钠、硫酸抗坏血酸、硫酸抗坏血酸2钠盐、及抗坏血酸-2-葡糖苷等）、生育 三烯酚及其衍生物、酚酸类（氯原酸、鞣花酸、没食子酸、没食子酸丙酯）、木酚素类、姜黄素 类、香豆素类、包括蝶芪等的羟基芪、等，基于其功能，也可以作为例如功能性成分、赋型剂、 粘度调整剂、自由基捕捉剂等包含。
[0112] 此外，本发明中，可以并用例如各种药效成分、pH调节剂、pH缓冲剂、紫外线吸收 齐U、防腐剂、香料、着色剂等通常在该用途中使用的其他添加物。
[0113] 对本发明的皮肤外用剂的形态没有特别限制，也可以制成除了有效成分以外还包 含作为医药可允许的载体、根据需要使用的其他任意成分的组合物的形态。作为组合物的 形态，可列举出油组合物、乳化组合物等。作为乳化组合物，优选为水包油型乳化组合物。
[0114] 〈用途〉
[0115] 本发明的皮肤外用剂可以适用于化妆料用途、经皮医药品用途等用途中。
[0116] 作为可适用本发明的皮肤外用剂的化妆料，可列举出皮肤化妆料（化妆水、美容 液、乳液、雪花膏等）、口红、防晒化妆料、化装化妆料等，但并不限制于这些。
[0117] 特别是优选在化妆水、美容液、乳液、膏状面膜?剥撕式面膜（pack)、剥撕式面膜、 洗发用化妆品、香水化妆品、液体身体洗涤料、UV护理化妆品、防臭化妆品、口腔护理化妆品 等（化妆品的情况）等水性化妆料中使用本发明的皮肤外用剂。在水性化妆料中使用时， 可得到具有透明感的产品，并且抑制长期保存或灭菌处理等苛刻条件下的不溶物的析出、 沉淀或项圈（neck ring)等不良现象的发生。
[0118] 对于化妆水、美容液，通常要求具有透明性，要求其经时变化后也为透明。这里所 谓的"透明性"是指625nm下的吸光度为0. 1以下，从制剂的稳定性的观点出发，为所需的 性能。
[0119] 本发明中作为"透明性"的指标的吸光度可以通过公知的测量方法来测定。例如， 可以通过市售的分光光度计测定吸光度。本发明中，使用分光光度计（V-630iRM)日本分光 (株）制进行测定。
[0120] 另外，本说明书中的吸光度是在室温下测定的值。
[0121] 〈皮肤外用剂的制造方法〉
[0122] 本发明的皮肤外用剂的制造方法没有特别限定，可以按照公知的方法进行制造。
[0123] 例如，在制造以分散物的形式含有番茄红素及虾青素中的至少一者的皮肤外用剂 的情况下，优选由以下工序组成的制造方法：a)在水性介质（水等）中溶解非离子性乳化 剂而得到水相，此外，b)将包含番茄红素或虾青素、或者番茄红素及虾青素的油性成分混合 或溶解，得到油相组合物，c)在搅拌下将该水相组合物与油相组合物混合，进行乳化分散， 得到分散物后，配合其他成分，由此得到皮肤外用剂。
[0124] 特别优选通过在熔点以上的温度下进行加热处理，使油相中包含的番茄红素、虾 青素等油性成分充分地溶解后，与水相混合，进行乳化处理。
[0125] 在番茄红素及虾青素这两者以分散物的形式含有于皮肤外用剂中的情况下，可以 分别制备包含番茄红素的分散物及包含虾青素的分散物，也可以制备包含番茄红素及虾青 素这两者的分散物。
[0126] 在通过上述制造方法来制造以分散物的形式含有番茄红素及虾青素中的至少一 者的皮肤外用剂的情况下，油相组合物及水相组合物中含有的成分没有特别限定，但从制 作稳定性高的皮肤外用剂的观点出发，优选包含表面活性剂等成分，优选包含i)单糖或多 糖的脂肪酸酯、ii)聚甘油脂肪酸酯、iii)磷脂质中的任一种或多种。
[0127] 上述的乳化分散中的油相与水相的比率（质量）没有特别限定，但以油相/水相 比率（质量％ )计优选为〇· 1/99. 9?50/50,更优选为0· 5/99. 5?30/70,进一步优选为 1/99 ?20/80。
[0128] 通过将油相/水相比率设为0. 1/99. 9以上，由于有效成分不会变低，所以倾向于 不会产生含有番茄红素、或虾青素的分散物的实用上的问题，优选。此外，通过将油相/水 相比率设为50/50以下，倾向于表面活性剂浓度不会变稀，含有番茄红素、或虾青素的分散 物的稳定性不会恶化，优选。
[0129] 乳化分散可以进行1个步骤的乳化操作，但从能够得到均匀且微细的粒子的方面 考虑进行2个步骤以上的乳化操作是优选的。
[0130] 具体而言，除了使用利用剪切作用的普通的乳化装置（例如、搅拌器或叶轮搅拌、 均质混合机、连续流通式剪切装置等）进行乳化分散这样的1个步骤的乳化操作以外，特别 优选利用通过高压均化器、超声波分散机等进行乳化分散等方法将2种以上的乳化装置并 用。通过使用高压均化器，能够使分散物一致成为更均匀的微粒的液滴。此外，为了制成更 均匀的粒径的液滴，也可以进行多次。
[0131] 作为用于将分散物微细化的有用的方法，已知有PIT乳化法、凝胶乳化法等界面 化学乳化法。该方法具有消耗能量小这样的优点，适合于将容易因热而劣化的材料微细地 进行乳化分散的情况。
[0132] 此外，作为通用的乳化法，可适用利用机械力的方法、即通过从外部给予强的剪切 力而使油滴分裂的方法。作为机械力最普通的是高速、高剪切搅拌机。作为这样的搅拌机， 市售有均质混合机、分散混合机及被称为UltraMixer的机器。
[0133] 此外，作为对于微细化是有用的、且其他的机械乳化装置，有高压均化器，市售有 各种装置。高压均化器由于与搅拌方式相比能够给予更大的剪切力，所以即使乳化剂的量 比较少也能够微细化。
[0134] 高压均化器中大致分类，有具有固定的节流孔部的腔室型高压均化器、和控制节 流孔的开度的类型的均质阀型高压均化器。
[0135] 作为腔室型高压均化器的例子，可列举出Microfluidizer(Microfluidics公司 制）、Nanomizer (吉田机械兴业株式会社制）、Altimizer (Sugino Machine Limited 制） 等。
[0136] 作为均质阀型高压均化器，可列举出Gaulin型均化器（APV公司制）、Lanier型均 化器（Lanier Co.，Ltd.制）、高压均化器（Niro Soavi公司制）、均化器（三和机械株式会 社制）、高压均化器（Izumi Food Machinery Co.，Ltd.制）、超高压均化器（Ika Co.，Ltd. 制）等。
[0137] 作为能量转换效率比较良好的分散装置、且具有简单的结构的乳化装置，有超声 波均化器。作为也能够进行制造的高输出功率超声波均化器的例子，可列举出超声波均化 器US-600、超声波均化器US-1200T，超声波均化器RUS-1200T、超声波均化器MUS-1200T (以 上，（株）日本精机制作所制）、超声波处理器ΠΡ2000、超声波处理器ΠΡ-4000、超声波处 理器ΠΡ-8000、超声波处理器ΠΡ-16000(以上，Hielscher公司制）等。这些高输出功率 超声波照射装置以25kHz以下、优选15?20kHz的频率来使用。
[0138] 此外，作为其他公知的乳化方法，使用不具有来自外部的搅拌部、仅需要低能量的 静态混合机、微通道、微型混合机、膜乳化装置等的方法也是有用的方法。
[0139] 本发明中的乳化分散时的温度条件没有特别限定，但从功能性油性成分的稳定性 的观点出发，优选为10?100°c，可以根据所处理的功能性油性成分的熔点等适当选择优 选的范围。
[0140] 此外，在本发明中使用高压均化器的情况下，优选以优选50MPa以上、更优选50? 280MPa、进一步优选100?280Mpa的其压力进行处理。
[0141] 此外，经乳化分散的组合物即乳化液在刚通过腔室后在30秒以内、优选3秒以内 通过某些冷却器进行冷却，从保持分散粒子的粒径的观点出发是优选的。
[0142] [正常皮肤细胞赋活化剂]
[0143] 本发明的正常皮肤细胞赋活化剂含有番茄红素及虾青素，且番茄红素及虾青素的 总含量为〇. 00001质量％?〇. 2质量％的范围。
[0144] 发现本发明的正常皮肤细胞赋活化剂通过含有番茄红素及虾青素这两者，且将它 们的总含量设为规定的范围内，从而在使用了人表皮角化细胞的细胞赋活化效果试验中， 具有表皮角化细胞增殖功能。
[0145] 本发明的正常皮肤细胞赋活化剂可以用作皮肤外用剂、化妆料、及经皮医药品的 材料。
[0146] 本发明的正常皮肤细胞赋活化剂可以与已述的皮肤外用剂同样地进行制造。
[0147] 其中，本发明中所谓"正常皮肤细胞"是指没有癌化的表皮细胞。表皮细胞中包含 角化细胞、黑色素细胞、朗格汉斯细胞、α树状细胞、梅克尔细胞，但本发明中的正常皮肤细 胞优选为包含角化细胞的表皮细胞。
[0148] 正常皮肤细胞赋活化剂中的番茄红素与虾青素的质量比（番茄红素：虾青素）优 选为0.01 : 1?25 : 1，更优选为0.05 : 1?15 : 1，进一步优选为0.05 : 1?10 : 1。
[0149] 实施例
[0150] 以下，通过实施例对本发明进行详细说明，但本发明不受它们的任何限定。
[0151] [实施例 1-1 ?1-4、比较例 Α-1 ?Α-2、Β_1 ?Β-2]
[0152] 在实施例1-1?1-4、比较例Α-1?Α-2、Β_1?Β-2中，对以本发明中的规定的总 含量含有番茄红素及虾青素与单独使用它们时相比可得到优异的细胞赋活化效果进行了 确认。
[0153] 实施例1?4中使用的试样是将番茄红素及虾青素的含量设为本发明中的这些成 分的总含量的范围内的试样。另一方面，比较例Α-1?Α-2、Β-1?Β-2中使用的试样是将 番茄红素及虾青素的含量设为本发明中的这些成分的总含量的范围外的试样。
[0154] 〈细胞赋活化效果的确认试验〉
[0155] 将HaCaT细胞株（人表皮角化细胞株、从DKFZ，Germany购入、以下相同）使用添 加有1(^八％?85的01^11培养基，播种到96孔板中，在371：、5%〇) 2下培养至达到80%汇 合。
[0156] 对于各实施例及比较例中使用的细胞株，置换成按照最终浓度达到下述表1或表 2中所示的添加量的方式添加有溶解于DMSO中的番茄红素（和光纯药工业（株）制）lOmM 溶液、和/或虾青素（和光纯药工业（株）制）溶液的DMEM培养基，在37°C下5% C02下 培养24小时。另外，将用仅添加了 0. 1质量％的DMS0的培养基培养的细胞株作为对照。
[0157] 将培养的细胞用PBS洗涤2次后，置换成将0. 5mg MTT试剂（D0JIND0)溶解于1ml PBS中而得到的溶液，在37°C、5% C02下孵育2小时。
[0158] 之后，在各孔（well)中分别添加100μ 1 DMSO : PBS = 4 : l(v/v)的溶液，轻轻 地进行超声处理，利用酶标仪（产品名：SUNRISE Rainbow Thermo RC、Tecan Japan Co.， Ltd.制）测定570nm的吸光度，对于各评价用样品中的细胞增殖率（％)的变化，将对照设 为100 %进行比较。
[0159] 将实施例1_1?1-3、比较例A-1?A-2的结果不于下述表1中。另外，关于番爺 红素及虾青素的添加量，以"质量％ "进行表示，同时关于转换成" μ M"的值，也一并记于表 1中。
[0160] [表 1]
[0161]
【权利要求】
1. 一种皮肤外用剂，其含有番茄红素及虾青素，且番茄红素与虾青素的总含量为 0· 00001质量％?0· 2质量％的范围。
2. 根据权利要求1所述的皮肤外用剂，其中， 以包含番茄红素的分散物的形式含有番茄红素。
3. 根据权利要求2所述的皮肤外用剂，其含有分散物，所述分散物包含番茄红素、选自 单糖或多糖的脂肪酸酯及聚甘油脂肪酸酯中的至少1种、和卵磷脂。
4. 根据权利要求1?3中任一项所述的皮肤外用剂，其中， 以包含虾青素的分散物的形式含有虾青素。
5. 根据权利要求4所述的皮肤外用剂，其含有分散物，所述分散物包含虾青素、选自单 糖或多糖的脂肪酸酯及聚甘油脂肪酸酯中的至少1种、和卵磷脂。
6. 根据权利要求1?5中任一项所述的皮肤外用剂，其中， 番爺红素与奸青素的质量比为0.01 : 1?25 : 1。
7. 根据权利要求1?6中任一项所述的皮肤外用剂，其还包含选自由生育酚及其衍生 物组成的化合物组中的至少1种。
8. 根据权利要求7所述的皮肤外用剂，其中， 番茄红素及虾青素与选自由生育酚及其衍生物组成的化合物组中的至少1种的质量 比为 1 : 50 ?1 : 0· 5。
9. 根据权利要求1?8中任一项所述的皮肤外用剂，其为水性化妆料。
10. -种正常皮肤细胞赋活化剂，其含有番茄红素及虾青素，且番茄红素与虾青素的总 含量为0. 00001质量％?0. 2质量％的范围。
11. 根据权利要求10所述的正常皮肤细胞赋活化剂，其中， 番爺红素与奸青素的质量比为0.01 : 1?25 : 1。
12. -种皮肤外用剂，其包含权利要求10或11所述的正常皮肤细胞赋活化剂。
13. -种化妆料，其包含权利要求10或11所述的正常皮肤细胞赋活化剂。
【文档编号】A61K47/24GK104114146SQ201380009294
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2013年2月22日 优先权日:2012年2月24日
【发明者】乾江梨子, 金泽克彦 申请人:富士胶片株式会社