经皮或粘膜给予用疫苗组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及经皮或粘膜给予用疫苗组合物。提供一种疫苗组合物，其包含在利用抗原的经皮或经粘膜给予来进行的细胞免疫诱导中能够相对于各种抗原普遍地进行使用的细胞免疫刺激剂，该疫苗组合物的便利性高、且通过经皮或经粘膜给予而发挥高的细胞免疫诱导效果。本发明提供经皮或经粘膜给予用疫苗组合物，其用于细胞免疫诱导，所述组合物包含：（i）抗原；以及（ii）作为第一细胞免疫诱导促进剂的、药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐。
【专利说明】经皮或粘膜给予用疫苗组合物
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及经皮或经粘膜给予用疫苗组合物。
【背景技术】
[0002]通常广泛使用的疫苗为了诱导免疫而给予微生物或病毒等病原体或其一部分。除此之外，还有癌症疫苗，其目的在于使细胞免疫系统识别癌细胞特异性抗原，从而通过免疫体系诱导对癌细胞的特异性攻击，其用作癌症治疗手段之一。
[0003]通常，微生物、病毒由于其尺寸的原因，其侵入会被皮肤阻止，因此，疫苗需要侵入式地给予到体内。因而，免疫通常使用注射。但是，注射存在如下的问题:疼痛、恐惧心理、注射伤痕及注射伤痕发展而成的疤痕、只有医疗工作者才能进行注射、免疫效果高的皮内注射的给予手艺难、存在医疗工作者的针扎感染事故的风险、进行反复给予时需要经常去医院而成为患者的生活负担、产生注射针等需要特殊废弃的医疗废弃物等问题，因此，其并不能说是最佳的给予途径。
[0004]作为疫苗的给予途径，皮下或皮内注射是最一般的，除此以外，也尝试了利用各种各样的给予途径例如经皮给予(专利文献I及非专利文献I)、颊部给予、鼻腔给予、舌下给予等(非专利文献2、专利文献2以及专利文献3)的免疫诱导。
[0005]作为利用注射来进行的免疫中通常使用的佐剂，实际使用氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝这样的铝盐；MF59、AS03这样的包含角鲨烯的乳液等，除了这些之外，还广泛研究了鞭毛成分、核酸、细胞因子、阳离子聚合物、多肽等。作为在注射以外的途径例如利用经皮给予、经粘膜给予来进行的免疫中进行研究的佐剂，可列举出氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝这样的铝盐；霍乱毒素、大肠杆菌不耐热肠毒素这样的毒素类等，但尚未投入使用。它们基本上都用作为了预防由病毒、细菌等引发的感染症而诱导使抗体产生的体液免疫的佐剂。另一方面，仅在细胞免疫诱导范畴内，对注射而言，研究了弗氏佐剂、Montanide、GM-CSF、IL-2、IL-12、IFN-Y,但尚未投入使用，就经皮给予、粘膜给予而言，霍乱毒素、大肠杆菌不耐热肠毒素这样的毒素类、核酸类也处于仅存在少量报告的程度。
[0006]现有技术文献
[0007]专利文献
[0008]专利文献1:美国专利申请公开US2008/0193487号
[0009]专利文献2:日本特表2002-531415号公报
[0010]专利文献3:美国专利申请公开US2008/0112974号
[0011]专利文献4:日本特表平7-505883号公报
[0012]专利文献5:日本特表2007-529531号公报
[0013]非专利文献
[0014]非专利文献1:Hosoi Akihiro et al., Cancer Research, 68, 3941-3949 (2008)
[0015]非专利文献2:Zhengrong Cui et al.,Pharmaceutical Research,Vol.19,N0.7,947-953 (2002)
【发明内容】
[0016]发明要解决的问题
[0017]作为解决与注射相关的各种问题点的手段，考虑了经皮给予和经粘膜给予。但是，尚未报告有能够在利用抗原的经皮或经粘膜给予来进行的细胞免疫诱导中使用的有效的细胞免疫诱导促进剂，经皮或经粘膜给予与注射相比有可能无法获得充分的细胞免疫诱导效果。
[0018]因而，本发明的目的在于，提供便利性高、且通过经皮或经粘膜给予而发挥高的细胞免疫诱导效果的疫苗组合物。
[0019]用于解决问题的方案
[0020]本发明人等 对在利用抗原的经皮或经粘膜给予来进行的细胞免疫诱导中适合的物质进行了探索，结果发现，药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐会发挥促进细胞免疫诱导的效果。进而还发现:通过将所述酸或盐与选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上细胞免疫诱导促进剂组合使用，细胞免疫得到显著增强。进而还发现:通过本发明的疫苗制剂的经皮或经粘膜给予，能够获得比注射给予更强的细胞免疫诱导效果。
[0021]另外，在本发明的一个实施方式中，本发明的疫苗组合物为经皮给予用的制剂时，通过在低刺激条件下进行给予，能够进一步提高细胞免疫诱导效果。具体而言，通过在选择作为给予经皮给予用疫苗组合物前的皮肤刺激评价用动物模型的皮肤的指标的、经皮水分散发量(TEWL) (g/h.m2)为50以下的低刺激状态的基础上，给予经皮给予用疫苗组合物，能够获得高的细胞免疫诱导效果。或者，通过将经皮给予用疫苗组合物的皮肤刺激特性设为给予结束时的皮肤刺激评价用动物模型的皮肤内TSLP水平(pg/mg蛋白质)为10000以下的低刺激特性，也能够获得高的细胞免疫诱导效果。
[0022]因此，本发明提供以下列举的实施方式:
[0023](I) 一种经皮或经粘膜给予用疫苗组合物，其用于细胞免疫诱导，所述组合物包含:
[0024](i)抗原；以及
[0025](ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐；
[0026](2)根据(I)所述的疫苗组合物，其中，药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐为有机酸或其药理学上容许的盐；
[0027](3)根据(2)所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐为包含羧基的有机化合物或包含磺酸基的有机化合物、或其药理学上容许的盐；
[0028](4)根据(2)所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐是饱和直链部分的碳数为8~20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪酸或乳酸或苹果酸或水杨酸或马来酸或柠檬酸、或者包含磺酸基的有机化合物、或其药理学上容许的盐；
[0029](5)根据(2)所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐为选自由癸酸、月桂酸、肉豆蘧酸、异硬脂酸、棕榈酸、硬脂酸以及油酸组成的组中的脂肪酸或乳酸或水杨酸或柠檬酸或甲磺酸、或其药理学上容许的盐；
[0030](6)根据(I)~(5)中任一项所述 的疫苗组合物，其还包含选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上细胞免疫诱导促进剂；
[0031](7)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TLR配体；
[0032](8)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为环状二核苷酸；
[0033](9)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为免疫调节低分子药物；
[0034](10)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为环氧酶抑制剂；
[0035]( 11)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为前列腺素受体拮抗剂，进而，前列腺素受体拮抗剂为ΕΡ2受体拮抗剂、ΕΡ4受体拮抗剂、DP受体拮抗剂、IP受体拮抗剂；
[0036](12)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为前列腺素受体激动剂，进而，前列腺素受体激动剂为ΕΡ3受体激动剂；
[0037](13)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TSLP产生抑制剂；
[0038](14)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为腺苷酸环化酶抑制剂；
[0039](15)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为ω-3脂肪酸；
[0040](16)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为PPAR激动剂，进而，PPAR激动剂为PPAR- α激动剂、PPAR- δ激动剂、PPAR- Y激动剂；
[0041](17)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为多巴胺受体拮抗剂，进而，多巴胺受体拮抗剂为Dl受体拮抗剂、D5受体拮抗剂；
[0042]( 18)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为多巴胺受体激动剂，进而，多巴胺受体激动剂为D2受体激动剂、D3受体激动剂、D4受体激动剂；
[0043](19)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为组胺受体拮抗剂，进而，组胺受体拮抗剂为Hl受体拮抗剂、Η2受体拮抗剂；[0044](20)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为组胺受体激动剂，进而，组胺受体激动剂为Hl受体激动剂、H3受体激动剂、H4受体激动剂；
[0045](21)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血清素受体拮抗剂，进而，血清素受体拮抗剂为5-HT2受体拮抗剂、5-HT4受体拮抗剂、5-HT6受体拮抗剂、5-HT7受体拮抗剂；
[0046](22)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血清素受体激动剂，进而，血清素受体激动剂为5-HT1受体激动剂、5-HT2受体激动剂；
[0047](23)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为加压素受体拮抗剂，进而，加压素受体拮抗剂为V2受体拮抗剂；
[0048](24)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为加压素受体激动齐?，进而，加压素受体激动剂为Vi受体激动剂；
[0049](25)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为毒蕈碱受体拮抗剂，进而，毒蕈碱受体拮抗剂为Ml受体拮抗剂、M3受体拮抗剂、M5受体拮抗剂；
[0050](26)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为毒蕈碱受体激动剂，进而，毒蕈碱受体激动剂为Ml受体激动剂、M2受体激动剂、M3受体激动剂、M4受体激动剂、M5受体激动剂；
[0051](27)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为肾上腺素受体拮抗剂，进而，肾上腺素受体拮抗剂为α I受体拮抗剂、β I受体拮抗剂、β 2受体拮抗剂、β 3受体拮抗剂；
[0052](28)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为肾上腺素受体激动剂，进而，肾上腺素受体激动剂为α I受体激动剂、α 2受体激动剂；
[0053](29)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血管紧张素受体激动剂，进而，血管紧张素受体激动剂为ΑΤ2受体激动剂；
[0054](30)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为GABA受体激动剂，进而，GABA受体激动剂为GABAb受体激动剂；
[0055](31)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为凝血酶受体拮抗剂，进而，凝血酶受体拮抗剂为PAR-1受体拮抗剂；
[0056](32)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为凝血酶受体激动剂，进而，凝血酶受体激动剂为PAR-1受体激动剂；
[0057](33)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为阿片类受体激动剂；
[0058](34)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为白三烯受体拮抗剂，进而，白三烯受体拮抗剂为CysLTl受体拮抗剂、CysLT2受体拮抗剂；
[0059](35)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为白三烯受体激动剂，进而，白三烯受体激动剂为BLT受体激动剂。
[0060](36)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为褪黑素受体激动剂。
[0061](37)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为生长抑素受体激动剂。[0062](38)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为大麻素受体激动剂。
[0063](39)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为鞘氨醇1-磷酸受体激动剂。
[0064](40)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为代谢型谷氨酸受体激动剂，进而，代谢型谷氨酸受体激动剂为mGluR2受体激动剂、mGluR3受体激动剂、mGluR4受体激动剂、mGluR6受体激动剂、mGluR7受体激动剂、mGluR8受体激动剂。
[0065](41)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为ADP受体激动剂；
[0066](42)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为磷脂酶A2抑制剂；
[0067](43)根 据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TGF-β产生抑制剂；
[0068](44)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为Th2细胞因子抑制剂；
[0069](45)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为辅助肽；
[0070](46)根据(6)所述的疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为选自由TLR配体、环状二核苷酸、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上与辅助肽的组合；
[0071](47)根据(I)~(46 )中任一项所述的疫苗组合物，其中，抗原为选自由生存素2B肽和/或经改变的生存素2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽、PRl肽和/或经改变的PRl肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽、以及MUCl肽和/或经改变的MUCl肽组成的组中的肽；
[0072](48 )根据(I)~(47 )中任一项所述的经皮给予用疫苗组合物，其在低刺激条件下进行给予；
[0073](49)根据(48)所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的给予前的经皮水分散发量(TEWL)为50g/h.m2以下的条件；以及
[0074](50 )根据(48 )或(49 )所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的给予结束时的皮肤内TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以下的条件。
[0075]在其它的实施方式中，本发明的疫苗组合物可以用于疾病的治疗或预防。因此，本发明还提供以下列举的实施方式:
[0076](51)—种癌症的治疗或预防方法，其包括将对治疗有效的量的(i)癌抗原、以及(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐经皮或经粘膜给予到对象；
[0077](52)根据(51)所述的方法，其中，癌抗原为选自由生存素2B肽和/或经改变的生存素2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、PRl肽和/或经改变的PRl肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、以及MUCl肽和/或经改变的MUCl肽组成的组中的癌抗原肽；
[0078](53) 一种病毒性疾病的治疗或预防方法，其包括将对治疗有效的量的(i)病毒抗原、以及(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐经皮或经粘膜给予到对象；以及
[0079](54)根据(53)所述的方法，其中，病毒抗原为选自由IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽以及HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽组成的组中的的肽。
[0080]在其它的实施方式中，本发明还提供药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐作为抗原的经皮 或经粘膜给予用细胞免疫刺激剂的应用。因而，本发明还提供以下的实施方式:
[0081](55)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐在利用经皮或经粘膜给予来进行的免疫中作为细胞免疫刺激剂的应用；以及
[0082](56) (i)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐与(ii)选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上物质的组合在利用经皮或经粘膜给予来进行的免疫中作为细胞免疫刺激剂的应用。
[0083]另外，本发明还提供以下记载的实施方式:
[0084]( 57) 一种细胞免疫诱导方法，其包括将(i )抗原以及(ii )药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐经皮或经粘膜给予到对象；
[0085](58)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐在刺激利用抗原的经皮或经粘膜给予来进行的细胞免疫中的应用；
[0086](59) (i)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐与(ii)细胞免疫诱导促进剂的组合在刺激利用抗原的经皮或经粘膜给予来进行的细胞免疫中的应用，所述细胞免疫诱导促进剂选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上；
[0087](60) (i)抗原与(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐的组合在对抗原进行细胞免疫诱导中的应用，该组合进行经皮或经粘膜给予；
[0088](61) (i)抗原、(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐、以及(iii)细胞免疫诱导促进剂的组合在对抗原进行细胞免疫诱导中的应用，该组合进行经皮或经粘膜给予，所述细胞免疫诱导促进剂选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP 受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上；
[0089](62) (i)癌抗原与(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐的组合在癌症的治疗或预防中的应用，该组合进行经皮或经粘膜给予；
[0090](63) (i)病毒抗原与(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐的组合在病毒性疾病的治疗或预防中的应用，该组合进行经皮或经粘膜给予；
[0091](64) (i)抗原和(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐在用于诱导细胞免疫的经皮或经粘膜给予用疫苗组合物的制造中的应用；
[0092](65) (i)癌抗原和(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐在用于癌症的治疗或预防的经皮或经粘膜给予用疫苗组合物的制造中的应用；以及
[0093](66) (i)病毒抗原和(ii)药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐在用于病毒性疾病的治疗或预防的经皮或经粘膜给予用疫苗组合物的制造中的应用。
[0094]发明的效果
[0095]本发明的疫苗组合物由于能够经皮给予或经粘膜给予(尤其是包括舌下粘膜的口腔粘膜给予)而具有以下优点:优异的依从性，例如非侵入式给予、无痛、不产生对注射的恐惧、因给予方便而患者可以自行给予、还可以避免医务工作者的针扎感染事故的风险、能够减少反复给予时的去医院的频率而有助于提高患者的生活品质、不产生注射针这样的需要特殊废弃的医疗废弃物。另外，为巴布剂、带状制剂(tapes)等贴剂形态时，具有能够可靠地给予规定的给予量、能够任意地控制药物释放速度、并且给予时不会附着在其它部位的优点。进而，贴剂可以容易地贴附/撕除，因此，还具有在产生副作用时等自应用部位除去贴剂从而患者自己便能立即终止给予的优点。进而，本发明的疫苗组合物还具有与单独给予抗原相比效能显著提高的优点。进而，本发明的疫苗组合物的效能还具有与注射给予相比诱导更强的细胞免疫的优点。【具体实施方式】
[0096]为了更容易理解本发明，定义本说明书中使用的术语。未进行定义的术语只要没有上下文不同的启示就表示本领域技术人员、尤其是医学、药学、免疫学、细胞生物学、生物化学、高分子化学等领域的从业者所通常理解的意思。
[0097]1.定义
[0098]在本说明书中使用时，术语“抗原”是指能够诱导免疫应答的所有物质，例如可列举出蛋白质、肽等。在要求抗原的皮肤渗透性或粘膜渗透性的经皮或经粘膜给予中，优选使用分子量小的抗原，例如可以使用由约8~约12个氨基酸构成的肽。在本发明中，例如可以将以下记载的 生存素2B肽、GPC3肽、HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽、IPEP87肽、PRl肽、HER2/neu_A02 肽、MAGE3_A02 肽、HBVenv 肽、HER2/neu E75 肽、MUCl 肽等用作抗原。在一个实施方式中，本发明的疫苗组合物中使用的抗原不包含选自由癌症疫苗用途的WTl肽、以及癌症疫苗用途的经改变的WTl肽组成的组中的I种以上的肽。在一个实施方式中，本发明的疫苗组合物中使用的抗原不包括选自由癌症疫苗用途的HER2/neu E75肽和/或癌症疫苗用涂的经改变的HER2/neu E75肽组成的组中的I种以上的肽。
[0099]在本说明书中使用时，术语“生存素2B肽”是指由序列Ala Tyr Ala Cys Asn ThrSer Thr Leu (序列号I)构成的、来源于癌基因产物生存素的肽。
[0100]在本说明书中使用时，术语“GPC3肽”是指由序列Glu Tyr He Leu Ser Leu GluGlu Leu (序列号2)构成的、来源于癌基因产物GPC3的肽。
[0101]在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A24肽”是指由序列Thr Tyr Leu Pro ThrAsn Ala Ser Leu (序列号3)构成的、来源于癌基因产物HER2/neu的HLA-A24限制性肽。
[0102]在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A24肽”是指由序列lie Met Pro Lys Ala GlyLeu Leu Ile (序列号4)构成的、来源于癌基因产物MAGE3的HLA-A24限制性肽。
[0103]在本说明书中使用时，术语“IPEP87肽”是指由序列Asp Leu Met Gly Tyr IlePro Ala Val (序列号5)构成的、来源于丙型肝炎病毒(HCV)蛋白质的肽。
[0104]在本说明书中使用时，术语“PR1肽”是指由序列Val Leu Gln Glu Leu Asn ValThr Val (序列号6)构成的、来源于癌基因产物蛋白酶-3的肽。
[0105]在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A02肽”是指由序列Lys Val Phe Gly SerLeu Ala Phe Val (序列号7)构成的、来源于癌基因产物HER2/neu的HLA-A02限制性肽。
[0106]在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A02肽”是指由序列Lys Val Ala Glu He ValHis Phe Leu (序列号8)构成的、来源于癌基因产物MAGE3的HLA-A02限制性肽。
[0107]在本说明书中使用时，术语“HBVenv肽”是指由序列Trp Leu Ser Leu Leu ValPro Phe Val (序列号9)构成的、来源于乙型肝炎病毒(HBV)蛋白质的肽。
[0108]在本说明书中使用时，术语“HER2/neu E75肽”是指由序列Lys He Phe Gly SerLeu Ala Phe Leu (序列号10)构成的、来源于癌基因HER2/neu的产物(HER2蛋白质)的肽。
[0109]在本说明书中使用时，术语“MUC1肽”是指由序列Ser Thr Ala Pro Pro Val HisAsn Val (序列号11)构成的、来源于在多个癌细胞上高度表达的糖蛋白即MUCl蛋白的肽。
[0110]在本说明书中使用时，术语“WT1肽”是指由癌基因WTl (Wilm’s肿瘤)的产物WTl蛋白片段化而得到的、由约8~约15个、优选约8~约12个氨基酸构成的部分肽，其中包括Db 126肽、Db235肽(均记载在日本专利第4422903号公报中)等。另外，W02000/06602中公开的WTl产物的部分肽、W02005/095598中记载的来源于WTl的HLA-A26结合性癌抗原肽、W02007/097358 中记载的 HLA-A * 3303 限制性 WTl 肽、及 W02008/081701 中记载的 HLA-A*k 1101限制性WTl肽也包含在本说明书的“WT1肽”中。
[0111]在本说明书中使用时，术语“经改变的XX肽”(XX为任意肽的名称)是指XX肽的全部或一部分氨基酸通过置换、修饰等而被改变了的肽。
[0112]经改变的XX肽包括例如:
[0113](a)由在XX肽的氨基酸序列中置换、缺失或附加I个~数个、例如I个、2个、3个、4个或5个氨基酸而得到的氨基酸序列构成的肽；及
[0114](b)由在XX肽的氨基酸序列中全部或一部分氨基酸、例如I个或多个、例如I个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸经过修饰而得到的氨基酸序列构成的肽。
[0115]作为经改变的XX肽可以具有的氨基酸的“修饰”，并不限定于此，例如可以列举出乙酰化、甲基化等烷基化、糖基化、羟基化、羧基化、醛化、磷酸化、磺酰化、甲酰化、豆蘧酰化、棕榈酰化、硬脂酰化这样的脂肪链附加修饰、辛酰化、酯化、酰胺化、脱酰胺化、胱氨酸修饰、谷胱甘肽修饰、巯基乙酸修饰这样的二硫键形成修饰、糖化、泛素化、琥珀酰亚胺形成、谷酰化、异戊二烯化等。经改变的XX肽也可以包含组合I个以上氨基酸的置换、缺失或附加、和I个以上氨基酸的修饰。
[0116]在优选的实施方式中，本发明的经皮给予用疫苗组合物所含有的抗原为选自由生存素2B肽和/或经改变的生存素2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽、PRl肽和/或经改变的PRl肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽、以及MUCl肽和/或经改变的MUCl肽组成的组中的肽。或者，作为抗原可以使用HER2/neu E75肽和/或经改变的HER2/neu E75肽。
[0117]上述列举的肽可以为游离形态或药理学上容许的任意的盐形态，例如酸盐(醋酸盐、TFA盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、氢溴酸盐、琥珀酸盐、硝酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、丙酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、苦味酸盐、苯磺酸盐、十二烷基硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、戊二酸盐、各种氨基酸盐等)、金属盐(碱金属盐(例如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐)、铝盐等)、胺盐(三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等)的形态。优选的药理学上容许的盐为醋酸盐或TFA盐。本发明中能够用作抗原的上述肽可以使用利用公知的方法来合成或生产、并进行分离及精制而得到的肽。
[0118]在本说明书中使用时，术语“细胞免疫诱导促进剂”是指能够使一同给予的抗原的诱导细胞免疫的效率与没有给予其时的效率相比得到改善的所有物质，不受促进细胞免疫诱导的作用机制限定，是指本申请说明书中特定的物质。
[0119]在本说明书中使用时，本发明的组合物含有的作为第一细胞免疫诱导促进剂的、“药理学上容许的酸”是指不对给予对象产生有害的作用、且不会使该组合物中的成分的药理活性消失的酸。本发明的优选的实施方式中，药理学上容许的酸为有机酸，更优选为包含羧基的有机化合物或包含磺酸基的有机化合物，进一步优选为饱和直链部分的碳数为8~20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪酸或乳酸或苹果酸或水杨酸或马来酸或柠檬酸、或包含磺酸基的有机化合物，更进一步优选为饱和直链部分的碳数为8~16的饱和或不饱和的直链或支链脂肪酸或乳酸或苹果酸或水杨酸或马来酸或柠檬酸、或包含磺酸基的有机化合物，再进一步优选为选自由癸酸、月桂酸、肉豆蘧酸、异硬脂酸、棕榈酸、硬脂酸以及油酸组成的组中的脂肪酸、或乳酸或水杨酸或柠檬酸或甲磺酸。
[0120]在本说明书中使用时，本发明的组合物中可含有的“药理学上容许的盐”是指不对给予对象产生有害的作用、且不会使该组合物中的成分的药理活性消失的盐，包括无机酸盐(例如盐酸盐、磷酸盐)、有机酸盐(例如醋酸盐、邻苯二甲酸盐、TFA盐)、金属盐(碱金属盐(例如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐)、铝盐等)、胺盐(三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等)，但并不限定于此。
[0121]在本说明书中使用时，术语“TLR配体”是指Toll样受体(TLR)的配体，例如包括TLRl~9的配体。作为TLR配体，可列举出TLRl及TLR2的异质二聚体配体(TLR1/2配体)、TLR2及TLR6的 异质二聚体配体(TLR2/6配体)、TLR2及Dectinl配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR5配体、TLR7和/或TLR8配体、TLR9配体等，在本发明中均可用作细胞免疫诱导促进剂。本发明的优选的实施方式中，TLR配体为TLR1/2配体、TLR2及Dectinl配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR7和/或TLR8配体、和/或TLR9配体。
[0122]在本说明书中使用时，术语“TLR1/2配体”是指Toll样受体(TLR) I及Toll样受体(TLR) 2的异质二聚体的配体，例如包括来源于细菌的细胞壁的三酰化脂蛋白及其盐，它们也可以是提取物、生成物或合成品，但并不限定于它们。
[0123]本发明的优选的实施方式中，TLR1/2配体为Pam3CSK4。Pam3CSK4具有式
[0124]
【权利要求】
1.一种经皮或经粘膜给予用疫苗组合物，其用于细胞免疫诱导，所述组合物包含: (i)抗原；以及 (ii)作为第一细胞免疫诱导促进剂的、药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐。
2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，药理学上容许的酸或其药理学上容许的盐为有机酸或其药理学上容许的盐。
3.根据根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐为包含羧基的有机化合物或包含磺酸基的有机化合物、或其药理学上容许的盐。
4.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐是饱和直链部分的碳数为8~20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪酸或乳酸或苹果酸或水杨酸或马来酸或柠檬酸、或者包含磺酸基的有机化合物、或其药理学上容许的盐。
5.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，有机酸或其药理学上容许的盐为选自由癸酸、月桂酸、肉豆蘧酸、异硬脂酸、棕榈酸、硬脂酸以及油酸组成的组中的脂肪酸或乳酸或水杨酸或柠檬酸或甲磺酸、或其药理学上容许的盐。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的疫苗组合物，其还包含选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上第二细胞免疫诱导促进剂。
7.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其中，第二细胞免疫诱导促进剂为辅助肽。
8.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其中，第二细胞免疫诱导促进剂为选自由TLR配体、环状二核苷酸、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、以及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上与辅助肽的组合。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的疫苗组合物，其中，抗原为选自由生存素2B肽和/或经改变的生存素2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽、PRl肽和/或经改变的PRl肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽、以及MUCl肽和/或经改变的MUCl肽组成的组中的肽。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的经皮给予用疫苗组合物，其在低刺激条件下进行给予。
11.根据权利要求10所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的该组合物的给予前的经皮水分散发量即TEWL为50g/h.m2以下的条件。
12.根据权利要求10或11所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的该组合物的给予结束时的皮肤内胸腺基质淋巴细胞生成素即TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以 下的条件。
【文档编号】A61K47/12GK103961698SQ201410042825
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2014年1月29日 优先权日:2013年2月5日
【发明者】前田佳己, 大久保胜之, 浅利大介, 冈崎有道, 宍户卓矢, 松下恭平, 李文婧, 堀光彦, 杉山治夫 申请人:日东电工株式会社