硫环红素a在制备抗菌药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了从豚草的须根中分离得到的硫环红素A在制备抗菌药物中的应用。硫环红素A的制备方法包括以下步骤：包括超临界萃取、聚酰胺柱层析、氧化铝柱层析以及重结晶等步骤。制备得到的硫环红素A可用于制备抗菌药物。
【专利说明】硫环红素A在制备抗菌药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于医药领域，涉及硫环红素A及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用。
【背景技术】
[0002]硫环红素A (Thiarubrin A)，分子式为C13H8S2,分子量为228.34，结构式为:
硫环红素A是从菊科(Compositae)豚草Ambrosia artemisiifolia L.的须根中分离得到的一种活性物质。硫环红素A对白色念珠菌和苏烟色麴菌有强的抗菌作，作用浓度与两性霉素B相当；对白色念珠菌、枯草杆菌及线虫有细胞毒活性；具有光敏毒性；具有抗病毒作用，在UV-A存在下对鼠巨细胞病毒MCMV和Sindbis病毒敏感；在微分子浓度和紫外光辐射下，有好的抗HIV活性。
[0003]通过文献检索，国内尚未见硫环红素A用于制备抗菌药物或保健品。
【发明内容】
[0004]为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗细菌感染疾病，应用硫环红素A制备抗菌药物或保健品。
[0005]硫环红素A 的结构分析:MS m/z (rel.1nt.):228 (M+, 100),83 (25),119 (13)，183 (20),184 (49)。
[0006]上述硫环红素A的制备方法，包括以下步骤:
1)超临界萃取:取豚草的须根粉碎，投入到超临界CO2萃取釜中，再加入适量有机溶剂作为夹带剂，通入CO2，在萃取压力20-35MPa，萃取温度30_50°C条件下进行萃取，CO2流速为10-30L/h，进行萃取l_3h，收集萃取物；
2)聚酰胺柱层析:将萃取物加入聚酰胺树脂柱中，控制流速0.5-1.5BV/h，先用水洗脱至无色，再用30-90%乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩至相对密度1.08-1.12，得硫环红素A粗提物；
3)氧化铝柱层析:将硫环红素A粗提物用3-4倍量的酸性氧化铝吸附，50°C以下低温烘干，干法装柱，用混合溶剂梯度洗脱，收集含高含量硫环红素A的流分，减压浓缩至小体积，结晶，得粗晶；
4)重结晶:将粗晶用乙酸乙酯-丙酮混合溶液重结晶，得到高纯度的硫环红素A单体化合物。
[0007]步骤(1)所述夹带剂为60-90%的乙醇或丙酮溶液,加入量为相当于原料重量的5-15%。
[0008]步骤(3)所述的混合溶剂为石油醚、乙酸乙酯、甲醇、丙酮、乙醇的混合溶液。
[0009] 本发明用于制备抗菌药物时，其口服或非口服给药均是安全有效的。口服给药可以制成任何常规剂型，如:散剂、颗粒、胶囊、片、口崩片、滴丸、软胶囊等；非口服给药，可制成各种常规剂型，如注射液等。
[0010]本发明用于制备抗菌药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。
[0011]本发明用于制备抗菌药物时，其辅料及制备方法可选用任何药学可接受的形式。
[0012]本发明的剂量可根据服用方式、病人的年龄、病情严重程度等因素而改变，成人口服剂量为l-200mg/日，成人注射剂量为l_50mg/日。
[0013]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0014]实施例1:
将豚草的须根粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为80%的乙醇溶液作为夹带剂，加入量为0.3kg (原料重量的6%)，在萃取压力25MPa，萃取温度45°C，CO2流量18L/h条件下萃取2h，得掌石蕊萃取物，萃取物用热水分散，上聚酰胺树脂柱，流速1.0BV/h,先用水洗至水洗液无色,再用30%乙醇洗脱，最后用80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩至相对密度为1.08，得到硫环红素A粗提物，将硫环红素A粗提物用3倍量的酸性氧化铝吸附，于50°C低温烘干，干法上柱，用不同比例的石油醚、石油醚-乙酸乙酯、乙醇梯度洗脱，薄层层析检查，收集高含量硫环红素A流分，减压浓缩至小体积，结晶，将粗晶用乙酸乙酯-丙酮重结晶，得到548mg硫环红素A单体化合物，其含量为95.7%
为了更好的理解本发明的实质，下面将用硫环红素A的药理实验及药理来说明其在制药和保健品中的用途。
[0015]1、受试提取物:硫环红素A提取物
(I)性状:结晶，味苦。
[0016](2)规格:含硫环红素A≥90%ο
[0017](3)溶剂:乙醇或甲醇。
[0018](4)储存条件:4°C，密封保存。
[0019]2、抗菌作用
(O实验材料:供试菌种，白色念珠菌，由南京大学生命科学学院实验室提供，LS-Sll全自动立式电热压力蒸汽灭菌器，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；GZX-9246MBE电热恒温鼓风干燥箱，上海博讯实业有限公司医疗设备厂。
[0020](2)实验方法与结果:采用液体培养基法，取硫环红素A，用甲醇配置成不同浓度(2-50 μ g/ml)的溶液，分别加入液体培养基和白色念珠菌菌悬液，同时以水和甲醇作为对照，加入白色念珠菌菌悬液，搅拌均匀，于37°C恒温震荡8小时，测定吸光度值，各样品吸光值均出现较大程度下降，结果如下:
表1硫环红素A的抗菌实验结果(液体培养法)
【权利要求】
1.结构式如下所示的硫环红素A在制备抗菌药物中的应用。
【文档编号】A61P31/04GK104069100SQ201410266221
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年6月16日 优先权日:2014年6月16日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司