Egcg棕榈酸酯在制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及医药新用途【技术领域】，具体公开了一种EGCG棕榈酸酯在制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物中的应用。本发明证实了EGCG棕榈酸酯在体外对丙型肝炎病毒感染细胞试验中具有良好的抗病毒作用，能够预防和治疗丙型肝炎病毒的感染，其作用效果与阳性对照药IFN-α1相当，揭示该药物有开发成抗丙型肝炎病毒药物的前景。
【专利说明】EGCG棕榈酸酯在制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物 中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药新用途【技术领域】，更具体涉及一种EGCG(表没食子儿茶素没食子 酸酯）棕榈酸酯在制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 丙型肝炎病毒是在1974年首次被发现的，而后在1989年被命名。丙型肝炎主要 是由丙型肝炎病毒经血液传播而形成的病毒性传染病，根据世界卫生组织的统计，在全世 界范围内已经有130-170万患者。每100个感染者中有75-85%的病人会发展成慢性感染， 60-70%会演变成慢性疾病，5-20%的患者会引发肝硬化甚至肝细胞癌变（HCC)、死亡。由此 可见，丙型肝炎对患者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。
[0003] 丙型肝炎病毒Ofepatitis C Virus，简称HCV)是一种属于黄病毒科家族的带有包 膜的RNA病毒，包含一条长为9600个碱基的正义单链RNA基因组。其中5'和3'非编码 区（NCR)分别有319-341bp，和27-55bp，含有几个顺向和反向重复序列，可能与基因复制有 关。在5'非编码区下游紧接一开放的阅读框（0RF)，其中基因组排列顺序为5'-C-El-E2 -P7-NS2-NS3-NS4-NS5-3'，能编码一长度大约为3014个氨基酸的多聚蛋白前体，后者可经 宿主细胞和病毒自身蛋白酶作用后，裂解成10种病毒蛋白，包括三种结构蛋白，即分子量 19KD的核衣壳蛋白和两种糖蛋白，p7编码一种膜内在蛋白，其功能可能是一种离子通道。 非结构蛋白部分则包括NS2、NS3、NS4A、NS5A和NS5B，非结构蛋白与病毒的生活周期相关。 其中NS5B则具有RNA依赖的RNA聚合酶活性，参与HCV基因组复制。
[0004] HCV主要有两大传播途径，包括血液传播和垂直传播。血液传播是丙肝病毒最主要 的传播方式，主要是通过献血员和血液制品进行传播。垂直传播指的是丙肝病毒的母婴垂 直传播，携带丙肝病毒的女性在分娩过程中容易将丙肝病毒传染给婴儿。目前针对HCV尚 无有效的预防疫苗，治疗手段主要是靠长效干扰素联合病毒唑，所以对于HCV的治疗药物 的开发是很有必要的。
[0005] 茶多酚是茶叶中的一类活性成分，茶多酚又以儿茶素类为主，表没食子儿茶素没 食子酸酯（EGCG)是儿茶素中含量最高的组分，占茶多酚总量的27- 59%。EGCG具有非常 强的抗氧化活性，在抗菌、抗病毒、抗氧化、抗动脉硬化、抗血栓形成、抗血管增生、抗炎以及 抗肿瘤等方面都有出色的表现。然而，EGCG的脂溶性和水溶性都较差，无法稳定地存在于 人体内，很难用于抗病毒实验和制备抗病毒药物。
[0006] 表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸（后简称EGCG棕榈酸酯）是通过EGCG与棕榈 酰氯的酯化来制备的脂溶性化合物，其抗氧化活性已被证实。EGCG棕榈酸酯在保留了 EGCG 的强抗氧化活性的同时还能作为脂类被小肠吸收，最终到达肝脏，解决了 EGCG具有的脂溶 性差、在人体内不稳定以及生物利用度低等问题。这使得EGCG棕榈酸酯具有更好的应用前 景，有望进一步开发成治疗抗肝炎病毒的药物。
[0007] 已有研究报告表明EGCG棕榈酸酯在预防或治疗感冒病毒、腺病毒、艾滋病毒、乙 型肝炎病毒等方面都有一定的作用。没有提及其对丙型肝炎病毒感染后的治疗效果。故本 发明是针对其新药用价值的发现，为丙型肝炎病毒（HCV)的预防和治疗提供了一种新的有 效药物。
【发明内容】
[0008] 针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是在于提供了一种EGCG棕榈酸酯在 制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物中的应用，该药物是一种纯天然化合物的酯修饰 物，具有无毒无副作用，在体内稳定等优势，并且有明显的预防和治疗作用，可外涂、口服等 多种给药方式，使用方便。该物质为非核苷类化合物，兼有抗炎作用，故能提高治疗过程中 的耐受性，提高治疗质量和给药依从性，减轻治疗痛苦和副作用，同时不会诱发病毒突变。 本发明从细胞和分子层面对EGCG棕榈酸酯抗HCV病毒作用进行了评价，为其进一步开发应 用奠定了良好的基础。表明该药物具有开发成抗HCV病毒的有效药物而应用于临床的前 旦 -5^ 〇
[0009] 为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：
[0010] 通过CCK-8细胞活性检测与Real-Time荧光定量PCR试验，对前期筛选的有效药 物的给药剂量及有效性做出分析。同时采用体外细胞模型--HuH7细胞，从直接杀病毒、 抑制病毒的吸附与入侵、抑制病毒的复制、影响病毒出膜等方面研究药物的抗病毒机制。 [0011] 研究结果表明EGCG棕榈酸酯在细胞水平上对HCV病毒具有良好的预防病毒感染 和抗病毒作用，并且具有一定的抗感染作用，同时在临床上用于抗病毒抗肿瘤有很好的应 用基础，表明该药物可以作为临床上潜在的抗病毒药物进一步开发。从而为临床上丙型肝 炎病毒（HCV)性疾病的治疗提供一种安全有效、毒副作用小的脂溶性药物。为其进一步开 发应用奠定了良好的基础。
[0012] 相对于目前其他抗HCV病毒药物而言，本发明具有以下优点和效果：
[0013] 1、EGCG棕榈酸酯在较大浓度范围内没有细胞毒性。
[0014] 2、EGCG棕榈酸酯能够提高细胞对病毒感染的预防作用。
[0015] 3、EGCG棕榈酸酯能够降低病毒在细胞中的复制效率，对病毒感染有治疗作用。
[0016] 4、EGCG棕榈酸酯来源于绿茶中的主要成分，资源广泛，提取和制备相对简单。
[0017] 5、具有结果稳定，毒副作用小等优点。
[0018] 6、既有治疗作用，也有预防作用。
[0019] 7、可口服或外用给药，使用方便。
【专利附图】
【附图说明】
[0020] 图1为实施例3中用荧光定量PCR检测EGCG棕榈酸酯对HCV病毒预防作用的反 应中非结构蛋白NS5B的mRNA水平上表达量的影响。
[0021] 图2为实施例3中用荧光定量PCR检测EGCG棕榈酸酯对HCV病毒感染活性的抑 制作用的反应中非结构蛋白NS5B的mRNA水平上表达量的影响。
[0022] 图3为实施例3中用荧光定量PCR检测EGCG棕榈酸酯对HCV病毒感染的治疗作 用的反应中非结构蛋白NS5B的mRNA水平上表达量的影响。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合具体实施例，进一步阐明本发明的技术方案。应理解，这些实施例仅用于 说明本发明而不用于限制本发明请求保护的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验 方法，通常按照常规实验条件如Sambrook等人，分子克隆，实验手册（第三版）（New York : Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2002)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条 件。
[0024] 以下实施例中：
[0025] 所用的药物EGCG棕榈酸酯为一种结构式如下的单取代的EGCG棕榈酸酯：
[0026]
【权利要求】
1. EGCG棕榈酸酯在制备治疗或预防丙型肝炎病毒感染药物中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的EGCG棕榈酸酯为结构式如下的单 取代EGCG棕榈酸酯：
【文档编号】A61K31/353GK104138371SQ201410359357
【公开日】2014年11月12日 申请日期:2014年7月25日 优先权日:2014年7月25日
【发明者】吴建国, 徐德, 邬开朗, 刘倩瑛, 刘映乐, 潭秋萍, 刘芳 申请人:武汉胜达康生物科技有限公司