一种三黄散超微粉及其制备方法和应用的制作方法

一种三黄散超微粉及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及渔药制剂领域，尤其是涉及一种三黄散超微粉及其制备方法和应用。超微粉按重量百分比计，黄芩25-35％、黄柏25-35％、大黄25-35％、大青叶5-10％。三黄散超微粉具有清热、凉血、抗病毒、解毒之功效，对水体以及水产动物(鳃、体表等)组织致病菌有强大的抑菌、灭菌、抗病毒作用，特别适用主治水产动物由假单胞菌、弧菌、嗜气单胞菌、爱德华氏菌引起的细菌性肠炎病。经过试验表明，三黄散破壁超微粉对南美白对虾的白便肠炎病及加州鲈败血症具有一定的改善和治疗作用，能够增强加州鲈抗嗜水气单胞菌感染的能力，可以显著降低用量2-3倍，是一种有效保护肠道的防治水产动物细菌性肠炎的新型渔药。
【专利说明】一种三黄散超微粉及其制备方法和应用

【技术领域】
[0001] 本发明涉及渔药制剂领域，尤其是涉及一种三黄散超微粉及其制备方法和应用。

【背景技术】
[0002] 近年来，随着水产养殖集约化程度的不断提高，养殖密度日益增加，水产动物疾病 的发生也日益严重，出现了以肠炎疾患为主要特征的疾病，其症状为消化道变红色，胃部最 明显，中肠后部也变红或肿胀，直肠（后肠）变混浊。病鱼/虾不活泼、厌食、生长缓慢， 此病常与细菌性烂鳃病、赤皮病并发，严重时死亡率可达90%以上。究其病因有以下几点： 1.养殖密度大，容易引起水环境恶化；2.强化投喂的饲料配方单一，容易导致机体营养失 衡，代谢失调；3.许多养殖户饲料储存方法不当，导致饲料发霉变质，饲喂后对水生动物的 肠道损害很大；4.乱用药物，造成机体免疫力下降。该病近年来已普遍流行于全国各地，尤 其是鱼、虾发病率高，危害的对象主要是鲤、鲫、草鱼、罗非鱼、凡纳滨对虾、海参，也常见于 鳖。肠炎病是导致水产养殖经济损失的主要疾病之一。在渔药市场上，用于防治肠炎病的 药物种类很多，在禁止使用呋喃类、磺胺类中某些药物之后，许多厂家转向生产一些以磺胺 类、喹诺酮类、土霉素类等抗生素为原料的药物，大量、长期地使用这些药物，极容易产生耐 药菌株，导致局部地区肠炎病频频暴发，出现用药量加大和久治不愈等现象。药量加大及药 残也造成水产动物潜在性地危害人体健康。因此，在肠炎疾病防治中正确地选择药物无论 对疾病防治还是从消费者健康上考虑都是非常重要的。
[0003] 从一定程度上而言，肠炎病已成为影响水产养殖业健康发展的一大障碍，寻求在 养殖过程中可以预防、保护动物肠道以及感染后可以治疗肠炎病的有效办法，已成为当前 广大水产养殖者和相关研究人员高度关注的一个内容。中草药具有天然性、营养性、增强免 疫功能、抗应激、抗微生物、驱（杀）虫、双向调节、毒副残留小、无抗药性等多种优点。我国 利用中草药治疗水产动物疾病已有较长的历史，但渔用中草药的加工和使用方法仍然很单 一，多数以粗粉碎的散剂为主，或以水煎煮后泼洒，存在剂量大、剂型粗、外观差等不足，有 效成分不能充分释放，生物利用率低，严重影响了中药质量和治疗效果，制约了在临床上的 应用。中药超微粉碎是指在遵循中医药用药理论的前提下，采用现代粉体技术，将中药材微 粉化。中药微粉目前比较公认的粒径范围在10?30微米。中药微粉化的主要目的在于通 过增大药物颗粒的表面积，增强药物的溶出和吸收，从而提高药物疗效，节省药材资源。另 夕卜，在中药超微粉碎的基础上，运用现代制剂技术，能有效改善中药制剂的外观及应用新剂 型，进一步促进中药现代化。


【发明内容】

[0004] 本发明目的在于提供一种三黄散超微粉及其制备方法和应用。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
[0006] -种三黄散超微粉，超微粉为按重量百分比计，黄芩25-35%、黄柏25-35%、大黄 25-35%和大青叶5-10%混合粉碎至500目以下。
[0007] -种三黄散超微粉的制备方法，将清洗后黄芩、黄柏、大黄和大青叶按上述比例混 合，混合后于40-80°C下恒温烘干至含水量在8%以下，烘干后分别经过粗粉碎、冲击磨超 微粉碎机粉碎和微粉分级机粉碎，最终得到500目以下28 μ m)的粉末，即为三黄散超 微粉成品。
[0008] 具体是：
[0009] (1)粗粉碎：将烘干后的黄芩、黄柏、大黄和大青叶分别切段至3-5cm，而后用中药 粉碎机进行粗粉碎，粉碎后过50-80目筛获得粗粉；
[0010] (2) -级超微粉（冲击磨超微粉）：将上述所得粗粉通过冲击磨超微粉碎机粉碎， 获得细度为300目以下（颗粒< 50 μ m)的物料，即为一级超微粉；
[0011] (3)超微粉分级（微粉分级机）：将所得一级超微粉通过精细分级设备--微粉分 级机，分离出500目以下28 μ m)的三黄散超微粉成品；
[0012] (4)二级超微粉（气流超微粉）：上述微粉分级机粉碎收集的300目-500目的颗 粒通过管道送入超高速气流粉碎机内再次进行超微粉碎，将物料的颗粒细度粉碎至500目 (< 28 μ m)以下，并与步骤（3)所得500目以下的三黄散超微粉成品合并即为三黄散超微 粉成品。
[0013] 一种三黄散超微粉的应用，所述三黄散超微粉用于制备预防/治疗水产动物细菌 性肠炎病的药物。
[0014] 所述三黄散超微粉用于制备预防水产动物细菌性肠炎病的药物时，添加在水产饲 料中；其中，添加量为水产饲料重量的〇. 5-1. 0%。
[0015] 所述三黄散超微粉用于制备治疗水产动物细菌性肠炎病的药物时，添加在水产饲 料中；其中，添加量为〇. 5-1. Og/每Ikg体重鱼或虾，连用4?6日。
[0016] 本发明所采用的优点：
[0017] 本发明超微粉由黄连、黄芩、黄柏、大黄等制成。原材料价廉、易得。黄连清热解毒 燥湿，含小檗碱及黄连碱等多种生物碱，对大肠杆菌、葡萄球菌、伤寒杆菌等均有显著抑制 作用，还能增强白细胞吞噬能力。黄柏主含小檗碱，清下焦湿热，对多种细菌、真菌有较强的 抑制作用，其抗菌谱效力同黄连。黄芩清热解毒、利尿，对痢疾杆菌、伤寒杆菌、溶血性大肠 杆菌、绿脓杆菌及葡萄球菌、链球菌，具有较强的抗菌抗毒作用。
[0018] 本发明采用冲击磨超微粉-微粉分级-气流超微粉的多种技术结合的方式，将不 同的技术特点结合实现了物料的高产量与高细度，将传统中草药的颗粒细度提高了 8-10 倍，使中草药的物理性质及生物利用度、生理活性发生了巨大的变化。由于颗粒细度的降 低，直接可以被生物体粘膜吸收，颗粒表面积增加，使有效成分极易于溶解和吸收，其生物 利用度成倍提高，中草药吸收程度达到了提取物的程度，生理活性增强。同时，由于中草药 超微粉采用的是物理方法，客观上完全保留了中草药的全息性，使其各种有效成分得到了 完整保留，未受到任何破坏。
[0019] 本发明三黄散的超微粉散剂主要用于水产动物的细菌性肠炎、出血性肠炎、肠道 败血症的治疗及改善胃肠道微环境。所得三黄散超微粉散剂具有有效成分溶解和释放快， 吸收好，生物利用度高；另外制剂主要用于提高水产动物免疫功能，适用于免疫功能低下动 物，提高疫苗免疫效果，配合其他药物治疗各种细菌性疾病。
[0020] 本发明产品配方合理、有效成分释放完全、添加量小、起效迅速、效果确实、无毒副 作用，方法易于实施，可适用于大规模生产。经过试验表明，三黄散破壁超微粉对南美白对 虾的白便肠炎病及加州鲈败血症具有一定的改善和治疗作用，能够增强加州鲈抗嗜水气单 胞菌感染的能力，相对目前市场上普通粗粉碎的中药制剂而言，可以显著降低用量2-3倍， 是一种有效保护肠道的防治水产动物细菌性肠炎的新型渔药。

【专利附图】

【附图说明】
[0021] 图1为本发明实施例提供的加州鲈感染嗜水气单胞菌后的肝脾肾组织病理变化 图。
[0022] 图2为本发明实施例提供的连续给药7天后对加州鲈的组织病理学检查情况图。

【具体实施方式】
[0023] 实施例1
[0024] 超微粉为按重量百分比计，黄芩30%、黄柏30%、大黄30%和大青叶10%混合粉 碎至500目以下。
[0025] 制备方法：
[0026] (1)烘干：将原料黄苳、黄柏、大黄和大青叶清洗后按上述比例混合并于60°C下恒 温烘干，使含水量控制在8%以下；而后分别制成3_5cm长段备用。
[0027] (2)粗粉碎：用中药粉碎机进行粗粉碎过50-80目筛获得粗粉；
[0028] (3) -级超微粉（冲击磨超微粉）：分级式冲击磨是利用高速旋转的回转体上的锤 头与物料的猛烈冲击，同时在冲击锤头与齿圈之间的间隙处受到冲击、磨损、剪切，实现对 物料的超细粉碎，并且可以通过改变分级机转速和风速来调节产品的粒度和产量。通过冲 击磨超微粉碎机可以获得物料的细度为300目以下（颗粒< 50 μ m)，即为一级超微粉。
[0029] (4)超微粉分级（微粉分级机）：将所得一级超微粉通过精细分级设备--微粉分 级机，分离出符合最终产品标准（500目以下）的三黄散超微粉成品。
[0030] (5)二级超微粉（气流超微粉）：上述微粉分级机粉碎收集的300目-500目的颗 粒通过管道送入超高速气流粉碎机内再次进行超微粉碎，将物料的颗粒细度粉碎至500目 以下，合并收集两次500目以下28 μ m)的超微粉为合格三黄散超微粉成品。然后收集 较粗的颗粒（300目-500目）输送至二级超微粉碎，以提高粉碎作业效率，并控制产品的粒 度分布。
[0031] (6)分装、杀菌：按照普通散剂的制备方法，将上述三黄散超微粉末定量称重、分 装、杀菌处理，即得三黄散的超微粉散剂。
[0032] 实施例2
[0033] 本发明制剂的治疗对虾白便肠炎病临床效果通过以下试验得到验证：
[0034] 滨州市博兴县乔庄镇养虾池，池塘面积11亩，密度6万/亩，在2013年8月4日 的时候，其养殖的南美白对虾出现白便、空肠空胃等现象，已部分游塘，初步判断是由细菌 引起的肠炎。
[0035] 检查：所取20尾虾仅1尾检测到白斑综合症病毒，桃拉病毒和传染性皮下及造血 器官坏死病毒都呈阴性；部分对虾弧菌感染严重；病理组织切片观察所取空肠虾普遍肝胰 腺腺管间水肿，腺管萎缩、脱落。胃与肝胰腺开口，导管上皮脱落，胃腔有脱落腺上皮，肠道 具有典型白肠的特征，表层黄色素，肠腔内有脱落上皮，环形肌两侧有大量增生细胞，大量 脱落的肝胰腺腺管上皮、增生的肠道上皮和肠壁增生细胞形成"白便"。
[0036] 分析原因：对虾拉"白便"主要是应激性肠炎引起的。诱发疾病的主因是天气和水 质，同时高蛋白的饲料投料量过大，首先会导致对虾的消化不良，其次会影响水质，使水里 面的溶氧减少，酸碱度变化，水质变坏，容易引发对虾消化道的问题，引起应激性肠炎。此时 对虾消化能力减弱，饲料中某些营养成份吸收不了，使得肠道脱水，然后跟粪便粘在一起， 形成白色粘液，也就是大家所说的"白便"。
[0037] 治疗：按每公斤体重对虾使用Ig三黄散超微粉的添加量，进行拌料投喂，连续使 用药饵4-6天以后，对虾开始正常摄食，检查肠道逐渐恢复正常，治愈率提高了 40%以上， 经过广大用户使用，发病率降低了 50%。
[0038] 实施例3
[0039] 本发明制剂的防治加州鲈细菌性败血症临床效果通过以下试验得到验证：
[0040] 1.试验目的
[0041] 评估三黄散破壁超微粉对于加州鲈细菌性败血症的防治效果。
[0042] 2.试验内容
[0043] 采用在饲料中添加的方式，检测不同浓度三黄散破壁超微粉对人工感染嗜水气单 胞菌的加州鲈临床表现、存活率、肝脾肾病理特征的影响。
[0044] 3.试验时间和地点
[0045] 试验于2013年11月至2014年1月在中国水产科学研究院珠江水产研究所内进 行。
[0046] 4.试验材料
[0047] 4.1试验药品
[0048] 上述实施例制备获得的三黄散破壁超微粉。
[0049] 4. 2对照药品
[0050] 三黄散散剂由山西康派伟业生物科技有限公司提供，兽药生产批准文号：兽药字 (2011)040069211，生产批号：20130501。
[0051] 4. 3试验动物
[0052] 健康加州鲈鱼540尾，体重（83. 3±2)g，购自广东省佛山市三水某养殖场。
[0053] 4. 4试验菌株
[0054] 试验用嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila)由珠江水产研究所水产动物病害 与免疫研究室提供。
[0055] 5.试验设计
[0056] 试验在500L同规格塑料桶中进行。试验前用高锰酸钾进行消毒处理，彻底清洗干 净后加入400L自来水，曝气48h。测得pH7. 38,溶解氧7. 82mg/L，水温（28±0. 2) °C。
[0057] 选择规格一致、体格健壮、采食活跃、无病无伤的加州鲈，进行一周的驯养（投喂 日常颗粒饲料）。
[0058] 试验用加州鲈暂养一周后随机分为6组，分别为空白对照组（不感染不给药）、感 染不给药对照组、〇. 125g/kg剂量组、0. 25g/kg剂量组、0. 5g/kg剂量组、对照药品组。每组 各设3个平行，每个平行30尾。空白对照组和感染不给药对照组投喂日常颗粒饲料，其余 剂量试验组分别在日常颗粒饲料上包被相应剂量的三黄散破壁超微粉，对照药品组在日常 颗粒饲料上包被三黄散散剂（0.5g/kg)。用药试验开始前先对各组试验加州鲈采用嗜水气 单胞菌进行感染，即对试验鱼浸泡嗜水气单胞菌菌液（菌液浓度需先进行预试验，需达到 加州鲈80%以上发生败血病的浓度）操作1次，空白对照组浸泡以等量的生理盐水代替菌 液，之后连续用药6d，停药后观察1周。
[0059] 6.测定指标
[0060] 6. 1临床表现及存活率
[0061] 试验期间，每天观察和记录加州鲈的外观体征、游泳情况、摄食情况、死亡时间和 死亡数，计算各组的存活率。
[0062] 6. 2肝肾脾等组织病变情况
[0063] 分别于败血症诱发处理前、连续给药6天后、以及停药观察1周后分3次从各组随 机选取10尾加州鲈，先对各组加州鲈的肝脏、脾脏进行外观形态观察和记录，之后采集肝 脏、脾脏、肾脏固定，制作切片，并进行病理学镜检（参见图1)。
[0064] 根据试验结果计算各组的有效率。计算公式如下：
[0065] 有效率（％ )=症状好转动物数/发病动物数X 100% ;
[0066] 7.统计分析
[0067] 试验数据用Origins. 0软件进行方差分析、显著性及相关性检验，结果用平均数 土标准差（mean 土 SD)表不。
[0068] 8.试验结果
[0069] 8. 1临床表现及存活率
[0070] 整个试验期间，空白对照组的试验鱼活动未见任何异常，鱼体健康，反应灵敏。感 染嗜水气单胞菌的对照组和试验组试验鱼鱼体发黑，鳃充血，肛门红肿突出，尾鳍和腹鳍充 血，有腹水，病鱼游动缓慢。各试验组加州鲈的存活率如表1所示。
[0071] 表1.各试验组加州鲈的存活率（％ )
[0072]

【权利要求】
1. 一种三黄散超微粉，其特征在于：超微粉为按重量百分比计，黄芩25-35 %、黄柏 25-35%、大黄25-35%和大青叶5-10%混合粉碎至500目以下。
2. -种权利要求1所述的三黄散超微粉的制备方法，其特征在于：将清洗后黄芩、黄 柏、大黄和大青叶按上述比例混合，混合后于40-80°C下恒温烘干至含水量在8%以下，烘 干后分别经过粗粉碎、冲击磨超微粉碎机粉碎和微粉分级机粉碎，最终得到500目以下 (< 28 y m)的粉末，即为三黄散超微粉成品。
3. 按权利要求1所述的三黄散超微粉的制备方法，其特征在于： (1) 粗粉碎：将烘干后的黄芩、黄柏、大黄和大青叶分别切段至3-5cm，而后用中药粉碎 机进行粗粉碎，粉碎后过50-80目筛获得粗粉； (2) -级超微粉（冲击磨超微粉）：将上述所得粗粉通过冲击磨超微粉碎机粉碎，获得 细度为300目以下（颗粒< 50 y m)的物料，即为一级超微粉； (3) 超微粉分级（微粉分级机）：将所得一级超微粉通过精细分级设备--微粉分级 机，分离出500目以下28 y m)的三黄散超微粉成品； (4) 二级超微粉（气流超微粉）：上述微粉分级机粉碎收集的300目-500目的颗粒 通过管道送入超高速气流粉碎机内再次进行超微粉碎，将物料的颗粒细度粉碎至500目 (< 28 y m)以下，并与步骤（3)所得500目以下的三黄散超微粉成品合并即为三黄散超微 粉成品。
4. 一种权利要求1所述的三黄散超微粉的应用，其特征在于： 所述三黄散超微粉用于制备预防/治疗水产动物细菌性肠炎病的药物。
5. 按权利要求4所述的三黄散超微粉的应用，其特征在于：所述三黄散超微粉用于制 备预防水产动物细菌性肠炎病的药物时，添加在水产饲料中；其中，添加量为水产饲料重量 的 0? 5-1. 0%。
6. 按权利要求4所述的三黄散超微粉的应用，其特征在于：所述三黄散超微粉用于制 备治疗水产动物细菌性肠炎病的药物时，添加在水产饲料中；其中，添加量为〇. 5-1. 0g/每 lkg体重鱼或奸，连用4?6日。
【文档编号】A61K36/756GK104352617SQ201410532879
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年10月11日 优先权日:2014年10月11日
【发明者】王宝杰, 王安林, 王雷, 刘梅, 蒋克勇 申请人:中国科学院海洋研究所, 山西康派伟业生物科技有限公司