一种香薷总黄酮的制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种香薷总黄酮的制备方法及其应用，其主要制备方法包括：a.将香薷全草阴干、粉碎，过40目筛；b.超声波提取；c.大孔吸附树脂柱纯化，乙醇洗脱，收集洗脱液；d.浓缩，干燥，即得香薷总黄酮。通过体外肿瘤细胞抑制试验，观察香薷总黄酮的抗肿瘤作用，结果表明香薷总黄酮对肺癌和结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将香薷总黄酮与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂和口服液中的一种。
【专利说明】一种香薷总黄酮的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种香薷总黄酮的制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 香薷，又名香菜、香茅，为唇形科石荠苧属植物，具有解表、化湿、祛暑、消肿之功 效，临床主要用于恶寒发热、腹痛吐泻、小便不利等症状的暑湿感冒。香薷含有多种黄酮类 化合物成分，据研究，香薷全草中含有7-甲基黄芩素、芹菜素、木犀草素、咖啡酸和槲皮素 等黄酮类化合物。
[0003] 黄酮类化合物具有降脂、抗衰老、抗氧化、抗血栓、清除自由基、抗心律失常、抗癌 等功效。目前，对香薷化学成分的研究主要集中在挥发油，对其黄酮类成分的研究少见报 道。
[0004] 传统的提取方法包括溶剂提取、沉淀分离法、水蒸气蒸馏法、分子蒸馏技术等。虽 然这些方法在天然产物提取被大多数人采用，但也存在不少缺点，如提取过程中普遍使用 大量有机溶剂；处理时间长；操作步骤多等。因而实验过程中样品损失严重，产生的误差较 大。
[0005] 本发明采用现代的超声提取技术，快速高效的提取香薷总黄酮。且通过文献检索， 国内尚未见香薷总黄酮用于制备抗肿瘤药物。
【发明内容】
[0006] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤疾病，本发明提供一种香薷总黄 酮的制备方法及其抗肿瘤应用。
[0007] 为实现上述目的，本发明的技术方案如下： a. 将香薷全草阴干、粉碎，过40目筛； b. 将处理后的原料置于频率为20KHz的超声装置中，加入原料:Γ4倍的7(Γ80%的乙醇 溶液，设置超声温度为7(T80°C，时间为2~3h，过滤，滤渣重复提取1次，合并滤液； c. 将合并的滤液浓缩至原体积的1/8~1/10,浓缩液加入大孔吸附树脂柱纯化，先用 2?3BV的蒸馏水洗脱，再用6515%的乙醇洗脱，收集洗脱液； d. 洗脱液浓缩，干燥，即得香薷总黄酮。
[0008] 步骤c中所述的大孔吸附树脂类型为AB-8、HPD100、XDA-I中的一种。
[0009] 通过体外肿瘤细胞抑制试验，观察香薷总黄酮的抗肿瘤作用，结果表明香薷总黄 酮对GLC4肺癌和COLO结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。
[0010] 本发明的有益效果通过以下实验得到了验证： 实验方法： 1、 受试提取物：香薷总黄酮 2、 细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株C0L0。
[0011] 3、给药剂量和方法 香薷总黄酮组：l〇mg/kg/天,灌胃给药,隔一天一次,共五天。
[0012] 阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0013] 阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿啼陡肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0014] 灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。
[0015] 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2X10 6细胞悬液，注射 至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对 模型动物存活率的影响。
[0016] (2)肺内种植瘤肺转移模型：取2 X 10 6细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15 天取肺，测量瘤重和肺转移数。
[0017] (3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。
[0018] 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，香薷总黄酮组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移 的作用，可延长实验小鼠的生存期。
[0019] 表1香薷总黄酮对种植瘤的抑制作用（11=20，^ ±S)
【权利要求】
1. 一种香薷总黄酮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： a. 将香薷全草阴干、粉碎，过40目筛； b. 将处理后的原料置于频率为20KHz的超声装置中，加入原料:Γ4倍的7(Γ80%的乙醇 溶液，设置超声温度为7(T80°C，时间为2~3h，过滤，滤渣重复提取1次，合并滤液； c. 将合并的滤液浓缩至原体积的1/8~1/10,浓缩液加入大孔吸附树脂柱纯化，先用 2?3BV的蒸馏水洗脱，再用6515%的乙醇洗脱，收集洗脱液； d. 洗脱液浓缩，干燥，即得香薷总黄酮。
2. 根据权利要求1所述的一种香薷总黄酮的制备方法，其特征在于，步骤c中所述的 大孔吸附树脂类型为AB-8、HPD100、XDA-1中的一种。
3. 根据权利要求1或2所述方法制备的香薷总黄酮在制备抗肿瘤药物中的应用，其特 征在于，香薷总黄酮在肺癌药物中的应用。
4. 根据权利要求1或2所述方法制备的香薷总黄酮在制备抗肿瘤药物中的应用，其特 征在于，香薷总黄酮在结肠癌药物中的应用。
【文档编号】A61K36/53GK104288223SQ201410550340
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司