一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，由下列质量百分比的组分组成：蒜头果神经酸1～10%、豆腐果苷1～10%、薏苡仁内酯1～10%、余量为辅料。本发明提供的药物有助于老年人的睡眠时间的延长，薏苡仁内酯能防癌抑制多种癌细胞增殖，三者合用能有效防止和控制老年痴呆症的发生和治愈，给老龄化越来越严重的全世界带来一种纯植物萃取的安全有效的植物组合物。本发明采用的组方配伍合理，原料均来自天然植物，同时本发明提供的中药组合物的制备方法，可操作性强，尤其是根据各味中药有效成分化学性质涉及提取工艺，所得提取物有效成分含量高，具有药效高、临床用量少等优点，且工艺稳定，适合工业大生产。
【专利说明】一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药【技术领域】，涉及一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物。
【背景技术】
[0002]随着我国经济的发展，以及人口政策的实施，我国人口的年龄结构发生了很大的转变。中国的预期寿命从1990年的68.4岁上升到2008年的73.8岁，老年人口占总人口的比重越来越大，根据经济合作与发展组织提供的数据，与中国的总人口相对而言，估计超过65岁的人口比率将从2005年的7.8%上升到2030年的16.3%。
[0003]研究人员发现，鲨鱼的脑组织受到重创后，能自动恢复功能，因为鲨鱼的脑组织中含有一种叫“神经酸”的物质，能修复大脑神经信息传递通道——神经纤维，并促使神经细胞再生。如今，神经酸(NA)已经被各国的科学家一直公认为是大脑神经纤维和神经细胞的核心天然有效成分。神经酸还能有效的治疗老年痴呆、脑瘫、脑萎缩、记忆力衰退、失眠健忘等脑部疾病。而人类和鲨鱼不同，人类自身无法合成神经酸，随着年龄增长或脑部受到创伤，都有可能造成神经酸的衰减，导致疾病。
[0004]从鲨鱼中提取神经酸必须杀死鲨鱼，破坏海洋生态平衡，随着国际组织禁止捕杀鲨鱼的呼声越来越高，欧美等国家都十分重视从植物中挖掘神经酸资源，经研究发现，含有2%以上神经酸的植物有十余种，其中以中国特有单种植物——蒜头果中神经酸含量最高，并且高达62.6%，其开发价值和经济价值巨大，可称为“植物中的黄金果”。
[0005]蒜头果(Malaniaoleifera Chun et Lee)是铁青树科似/acaceae),蒜头果属(Malania)植物。又称山桐果，马兰后。属于国家二级保护植物。在云南的东南部如富宁、广南、文山均有分布。蒜头果的种仁富含丰富的油脂，是合成麝香酮的理想原料。蒜头果种子含油量高达50?60%，经皂化后的脂肪酸含有40?50%的二十四碳-15-烯酸，即神经酸，它有助于恢复神经末梢活性，促进神经细胞生长和发育，有抗老年痴呆的作用。
[0006]据统计，现在世界上有2400万痴呆患者。在我国，老年痴呆症的患病人数达500多万，而且每年还有30万的新发病例。老年痴呆症的发病机理以及新药研发正受到世界各国的高度重视。因此，以蒜头果为原料，开发治疗老年痴呆症的食用油、保健品和药物具有广大的市场潜力和医疗价值。
[0007]薏该仁(Coix ,是禾本科多年生草本植物薏该(Coix lacryma-jobi L.)的成熟果仁，薏苡仁在我国大部分地区均有出产，由于薏苡的营养价值很高，被誉为世界禾本科植物之王。薏苡仁含有约2.7%左右的薏苡仁油，慧苡仁种仁含蛋白质16.2%，脂肪4.65%，碳水化物79.17%，少量维生素薏苡种子含多种氨基酸(包括亮氨酸、赖氨酸、精氨酸、酪氨酸等)还含有薏苡素、薏苡酯、三萜化合物等物质。薏苡仁中抑制多种肿瘤细胞增殖的有效成份是薏苡酯、薏苡仁内酯，该类化合物还具有增强激素调节功能和促进免疫系统和酶系统的功能，对细胞免疫和体液免疫也有促进作用，大量动物实验和临床证实薏苡仁油有增强免疫力和抗肿瘤作用。薏仁在我国各地都有种植，云南省以曲靖市师宗县为代表，薏仁资源比较丰富，是我国重要的薏仁生区之一。薏苡仁营养丰富，并且具有很好的抗肿瘤、活血化瘀等药用价值，市场上已陆陆续续出现了一些薏苡仁产品，薏仁保健酒、薏仁醋、薏仁粉、薏仁茶等，非常受广大消费者的欢迎。但与国外薏仁的产品相比，国内薏仁产品开发相对不足，薏仁的利用基本还停留在人们的饮食中，深加工产品严重缺乏。
[0008]豆腐果，别称母猪果，豆腐果提取物为豆腐果昔人对甲醛苯-O-β -D-阿咯批喃糖苷，又名昆明神衰果素，为云南野生植物山龙眼科萝卜树(HeIieiaerra6c:Hook.f)的果实(俗称豆腐渣果)，其化学结构类与天麻素相似。药理和临床研究表明，豆腐果昔对中枢神经系统的作用与天麻素相似，但其镇静、止痛作用较天麻素强，对神经官能症引起的头痛、头昏、睡眠障碍的治疗作用显效快，同时对记忆力、思维力具有较好改善和调节作用，应用前景广阔。母猪果主要分布在云南省南部和西南部分地区，以普洱市和红河州分布最多，大多数处于野生状态，亟待人工育种保护和深加工产品的开发利用。
[0009]本发明以三种在云南省集中分布或栽培的药用植物为研究对象，采用植物化学提取手段分别从这三种植物中提取预防老年痴呆症、抗抑郁和抗肿瘤的有效成分，并采用药剂学手段制备成中药保健片剂或胶囊剂，为中老年患者提供一种安全有效的中药保健品。
【发明内容】
[0010]为解决现有技术中预防老年痴呆症、抗抑郁和抗肿瘤药品的原料难以获得以及目前药品存在副作用等问题，本发明提供一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，以使用纯植物原料制备抗老年痴呆、神经衰弱、抗肿瘤的药物。
[0011]本发明通过下列技术方案实现:一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，其特征在于由下列质量百分比的组分组成:
蒜头果神经酸I?10%、
豆腐果苷I?10%、
薏该仁内酯I?10%、
余量为辅料。
[0012]所述辅料包括药学领域常规的糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉、羟丙基纤维素。
[0013]所述蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化:
(1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为I?10:5?50，用3?4°C的浓度为20mM、pH=6.0?7.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理30?50min，于3?4°C下进行抽提过夜，然后过滤，再在3?4°C下以5000?8000 r/min的转速进行离心分离30?40 min，重复两次，去除上清液得剩余物；
(2)将步骤(I)所得剩余物按固液比g/mL=l?5:5?20加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣2-3次，每次浸泡30?60min后过滤，合并滤液，再在40?50°C下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到蒜头果油；
(3)按上样量:硅胶量=1?10:10?100的质量比称取硅胶G，先按固液比g/mL=l?5:2?10加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌20?30min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL=l?5:1?10加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚:乙酸乙酯=50:1?30:1 (V/V)的馏分，于40?50°C以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸。
[0014]用薄层色谱法将神经酸标准品与该无色结晶在同一薄层板上点样，展开，进行比对，结果该无色结晶和神经酸标准品在同一薄层板的相同位置显示相同紫的斑点，并且在三种不同展开系统中均具有相同颜色斑点和相同Rf值，证明该无色结晶即为神经酸。此方法得到的神经酸含量大于95%。
[0015]所述步骤(I)的磷酸盐缓冲液按下列操作配制:将浓度为0.2M的磷酸氢二钠溶液与浓度为0.2M磷酸二氢钠溶液按体积比为12.3?61:87.7?39混合，即得到pH=6.0?7.0的磷酸盐缓冲液。
[0016]所述步骤(I)的上清液经后续纯化分离得到蛋白质沉淀。
[0017]所述步骤(3)的硅胶G的粒度为200?300目。
[0018]所述豆腐果苷按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
(1)豆腐果种子粉碎，过100目筛，再加入体积浓度为50?70%的乙醇在20?30°C下冷浸30?60min,再超声波提取30?60min,过滤,滤液在45?55°C下进行旋转蒸发浓缩，回收乙醇，得到母猪果乙醇提取物；
(2)在步骤(I)所得豆腐果乙醇提取物中按固液比g/mL为I?5:5?25加入纯水进行溶解，上大孔树脂DlOl型，先用纯水洗脱除去多糖、蛋白质等水溶性杂质，再用体积浓度为30?50%的乙醇洗脱4?5个保留体积，收集大孔树脂体积浓度为30?50%的乙醇流出液，经减压浓缩，再加入浓缩物体积2?3倍的浓度为90?95%的乙醇，在3?4°C下静置12?24h以析出结晶，再抽滤出结晶，即得到豆腐果苷纯品。所得豆腐果苷纯度大于95%。
[0019]所述薏苡仁内酯按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
将薏苡仁粉碎，过100目筛，再将薏苡仁粉在温度35?40°C、压力37?40MPa、CO2流量为10?20kg/h的条件下进行超临界二氧化碳萃取I?2h，采用体积浓度为70?95%的乙醇溶解萃取物质，再经旋转蒸发去除乙醇，得到黄色的油脂，即为薏苡仁内酯。
[0020]上述蒜头果神经酸、豆腐果苷、薏苡仁内酯提取物按比例充分混合，再加入药学上可接受的辅料制备成任何一种常用的口服制剂，如胶囊剂、颗粒剂、口服液、丸剂或片剂。
[0021]本发明具备的优点和效果:本发明提供的药物主要为脂肪酸、内酯等小分子化合物的组合体，通过植物化学提取手段，从云南特有和大面积种植的几种植物中提取有效成分，其中神经酸具有显著的抗老年痴呆症的作用，豆腐果苷能舒缓老年痴呆患者焦虑紧张的情绪，有助于老年人的睡眠时间的延长，薏苡仁内酯能防癌抑制多种癌细胞增殖，三者合用能有效防止和控制老年痴呆症的发生和治愈，给老龄化越来越严重的全世界带来一种纯植物萃取的安全有效的植物组合物。本发明采用的组方配伍合理，原料均来自天然植物，同时本发明提供的中药组合物的制备方法，可操作性强，尤其是根据各味中药有效成分化学性质涉及提取工艺，所得提取物有效成分含量高，具有药效高、临床用量少等优点，且工艺稳定，适合工业大生产。
【具体实施方式】
[0022]以下通过实施例来进一步说明本发明。
[0023]实施例1 治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，由下列质量百分比的组分组成: 蒜头果神经酸2%、 ?腐果昔6%、
薏苡仁内酯5%、
辅料87%，
其中辅料为糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉。
[0024]其中蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化:
(1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为10:50，用4°C的浓度为20mM、pH=6.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理40min，于:TC下进行抽提过夜，然后用4层纱布过滤，再在3°C下以6000 r/min的转速进行离心分离40 min,重复两次，去除上清液得剩余物；其中磷酸盐缓冲液按下列操作配制:将浓度为0.2M的磷酸氢二钠溶液与浓度为
0.2M磷酸二氢钠溶液按体积比为61:39混合，即得到pH=7.0的磷酸盐缓冲液；上清液经后续纯化分离得到蛋白质沉淀；
(2)将步骤(I)所得剩余物按固液比g/mL=3:20加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣3次，每次浸泡50min后过滤，合并滤液，再在40°C下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到淡黄色的蒜头果油；
(3)按上样量:硅胶量=5:60的质量比称取粒度为300目的硅胶G，先按固液比g/mL=3:8加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌25min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL=5:10加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚:乙酸乙酯=40:1 (V/V)的馏分，于50°C以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸。
[0025]用薄层色谱法将神经酸标准品与该无色结晶在同一薄层板上点样，展开，进行比对，结果该无色结晶和神经酸标准品在同一薄层板的相同位置显示相同紫的斑点，并且在三种不同展开系统中均具有相同颜色斑点和相同Rf值，证明该无色结晶即为神经酸。此方法得到的神经酸含量大于95%。神经酸得率为蒜头果油的10.462%。
[0026]其中豆腐果苷按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
(1)豆腐果种子粉碎，过100目筛，再加入体积浓度为70%的乙醇在25°C下冷浸40min，再超声波提取60min，过滤，滤液在45°C下进行旋转蒸发浓缩，回收乙醇，得到母猪果乙醇提取物；
(2)在步骤(I)所得豆腐果乙醇提取物中按固液比g/mL为5:25加入纯水进行溶解，上大孔树脂DlOl型，先用纯水洗脱除去多糖、蛋白质等水溶性杂质，再用体积浓度为50%的乙醇洗脱5个保留体积，收集大孔树脂体积浓度为30%的乙醇流出液，经减压浓缩，再加入浓缩物体积3倍的浓度为92%的乙醇，在3°C下静置20h以析出结晶，再抽滤出结晶，即得到豆腐果苷纯品。所得豆腐果苷纯度大于95%，豆腐果苷的得率为母猪果种子的1.06%。
[0027]其中薏苡仁内酯按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
将薏苡仁粉碎，过100目筛，再将薏苡仁粉在温度40°C、压力37MPa、CO2流量为15kg/h的条件下进行超临界二氧化碳萃取lh，采用体积浓度为70%的乙醇溶解萃取物质，再经旋转蒸发去除乙醇，得到黄色的油脂，即为薏苡仁内酯。所得薏苡仁内酯萃取得率为5.3%。
[0028]上述蒜头果神经酸、豆腐果苷、薏苡仁内酯提取物按比例充分混合，再加入药学上可接受的辅料制备成任何一种常用的胶囊剂。
[0029]实施例2
治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，由下列质量百分比的组分组成: 蒜头果神经酸1%、
豆腐果苷10%、
薏苡仁内酯10%、
辅料79%，
其中辅料为糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉、羟丙基纤维素。
[0030]其中蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化:
(1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为1:30，用3°C的浓度为20mM、pH=7.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理50min，于4°C下进行抽提过夜，然后用4层纱布过滤，再在4°C下以5000r/min的转速进行离心分离35min，重复两次，去除上清液得剩余物；其中磷酸盐缓冲液按下列操作配制:将浓度为0.2M的磷酸氢二钠溶液与浓度为0.2M磷酸二氢钠溶液按体积比为12.3:87.7混合，即得到pH=6.0的磷酸盐缓冲液；上清液经后续纯化分离得到蛋白质沉淀；
(2)将步骤(I)所得剩余物按固液比g/mL=5:10加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣2次，每次浸泡30min后过滤，合并滤液，再在45°C下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到淡黄色的蒜头果油；
(3)按上样量:硅胶量=10:100的质量比称取粒度为250目的硅胶G，先按固液比g/mL=5:2加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌20min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL=3:l加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚:乙酸乙酯=50:1 (V/V)的馏分，于45°C以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸。
[0031]用薄层色谱法将神经酸标准品与该无色结晶在同一薄层板上点样，展开，进行比对，结果该无色结晶和神经酸标准品在同一薄层板的相同位置显示相同紫的斑点，并且在三种不同展开系统中均具有相同颜色斑点和相同Rf值，证明该无色结晶即为神经酸。此方法得到的神经酸含量大于95%。神经酸得率为蒜头果油的11.054%。
[0032]其中豆腐果苷按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
(1)豆腐果种子粉碎，过100目筛，再加入体积浓度为60%的乙醇在20°C下冷浸60min，再超声波提取45min，过滤，滤液在50°C下进行旋转蒸发浓缩，回收乙醇，得到母猪果乙醇提取物；
(2)在步骤(I)所得豆腐果乙醇提取物中按固液比g/mL为3:19加入纯水进行溶解，上大孔树脂DlOl型，先用纯水洗脱除去多糖、蛋白质等水溶性杂质，再用体积浓度为40%的乙醇洗脱4个保留体积，收集大孔树脂体积浓度为40%的乙醇流出液，经减压浓缩，再加入浓缩物体积2倍的浓度为95%的乙醇，在4°C下静置24h以析出结晶，再抽滤出结晶，即得到豆腐果苷纯品。所得豆腐果苷纯度大于95%，豆腐果苷的得率为母猪果种子的1.57%。
[0033]其中薏苡仁内酯按下列方法提取纯化，经过下列各步骤: 将薏苡仁粉碎，过100目筛，再将薏苡仁粉在温度35°C、压力40MPa、CO2流量为1kg/h的条件下进行超临界二氧化碳萃取2h，采用体积浓度为85%的乙醇溶解萃取物质，再经旋转蒸发去除乙醇，得到黄色的油脂，即为薏苡仁内酯。所得薏苡仁内酯萃取得率为5.9%。
[0034]上述蒜头果神经酸、豆腐果苷、薏苡仁内酯提取物按比例充分混合，再加入药学上可接受的辅料制备成任何一种常用的颗粒剂、丸剂或片剂。
[0035]实施例3
治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，由下列质量百分比的组分组成: 蒜头果神经酸10%、 ?腐果昔1%、
薏苡仁内酯1%、
辅料88%，
其中辅料为糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉、羟丙基纤维素。
[0036]其中蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化:
(1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为8:5，用4°C的浓度为20mM、pH=7.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理30min，于4°C下进行抽提过夜，然后用4层纱布过滤，再在4°C下以8000 r/min的转速进行离心分离30min，重复两次，去除上清液得剩余物；其中磷酸盐缓冲液按下列操作配制:将浓度为0.2M的磷酸氢二钠溶液与浓度为
0.2M磷酸二氢钠溶液按体积比为46:68混合，即得到pH=7.0的磷酸盐缓冲液；上清液经后续纯化分离得到蛋白质沉淀；
(2)将步骤(I)所得剩余物按固液比g/mL=l:5加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣3次，每次浸泡60min后过滤，合并滤液，再在50°C下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到淡黄色的蒜头果油；
(3)按上样量:硅胶量=1:10的质量比称取粒度为200目的硅胶G，先按固液比g/mL=l: 10加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌30min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL=l:8加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚:乙酸乙酯=30:1 (V/V)的馏分，于40°C以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸。
[0037]用薄层色谱法将神经酸标准品与该无色结晶在同一薄层板上点样，展开，进行比对，结果该无色结晶和神经酸标准品在同一薄层板的相同位置显示相同紫的斑点，并且在三种不同展开系统中均具有相同颜色斑点和相同Rf值，证明该无色结晶即为神经酸。此方法得到的神经酸含量大于95%。神经酸得率为蒜头果油的10.819%。
[0038]其中豆腐果苷按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
(1)豆腐果种子粉碎，过100目筛，再加入体积浓度为50%的乙醇在30°C下冷浸30min，再超声波提取30min，过滤，滤液在55°C下进行旋转蒸发浓缩，回收乙醇，得到母猪果乙醇提取物；
(2)在步骤(I)所得豆腐果乙醇提取物中按固液比g/mL为1:5加入纯水进行溶解，上大孔树脂DlOl型，先用纯水洗脱除去多糖、蛋白质等水溶性杂质，再用体积浓度为30%的乙醇洗脱4个保留体积，收集大孔树脂体积浓度为50%的乙醇流出液，经减压浓缩，再加入浓缩物体积2倍的浓度为90%的乙醇，在4°C下静置12h以析出结晶，再抽滤出结晶，即得到豆腐果苷纯品。所得豆腐果苷纯度大于95%，豆腐果苷的得率为母猪果种子的1.13%。
[0039]其中薏苡仁内酯按下列方法提取纯化，经过下列各步骤:
将薏苡仁粉碎，过100目筛，再将薏苡仁粉在温度38°C、压力38MPa、CO2流量为20kg/h的条件下进行超临界二氧化碳萃取1.5h，采用体积浓度为95%的乙醇溶解萃取物质，再经旋转蒸发去除乙醇，得到黄色的油脂，即为薏苡仁内酯。所得薏苡仁内酯萃取得率为5.77%。
[0040]上述蒜头果神经酸、豆腐果苷、薏苡仁内酯提取物按比例充分混合，再加入药学上可接受的辅料制备成任何一种常用的口服液。
[0041]取上述实施例所得治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，用于下列临床治疗:
一、治疗对象
神经衰弱患者的30例；老年痴呆症患者的30例；抑郁症患者的50例。
[0042]将上述各类病例随机平分为治疗组和对照组各55例。
[0043]二、用法
治疗组服用上述实施例所得治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，一次2g，一日I次，连服30日进行观察。
[0044]对照组中服用市购神衰康胶囊，一日数次，一次5粒，一日2次，连服30日进行观察。
[0045]三、结果
本发明提供的治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物临床治疗效果:显效率达100%，对神经衰弱患者症状有效率达83% ;对老年痴呆症患者症状有效率达78% ;对抑郁症患者症状有效率达90%。
[0046]而对照组对神经衰弱患者症状有效率达75% ;对老年痴呆症患者症状有效率达65% ;对抑郁症患者症状有效率达43%。
[0047]四、结论
本发明提供的治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物是由蒜头果神经酸、豆腐果苷、薏苡仁内酯提取物等组成的组合物，对抗老年痴呆、神经衰弱、抗肿瘤有显著疗效，其作用优于对照组。
[0048]该治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物完全利用植物提取纯化，原料易获得，有疗效好、应用安全、毒副作用小等优点，所制得的产品质量稳定，使用方便，更适合于临床用药，无任何副作用，疗效显著。
【权利要求】
1.一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆症的药物组合物，其特征在于由下列质量百分比的组分组成: 蒜头果神经酸I?10%、 豆腐果苷I?10%、 薏该仁内酯I?10%、 余量为辅料。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:所述辅料包括药学领域常规的糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉、羟丙基纤维素。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:所述蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化: (1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为I?10:5?50，用3?4°C的浓度为20mM、pH=6.0?7.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理30?50min，于3?4°C下进行抽提过夜，然后过滤，再在3?4°C下以5000?8000 r/min的转速进行离心分离30?40 min，重复两次，去除上清液得剩余物； (2)将步骤(I)所得剩余物按固液比g/mL=l?5:5?20加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣2?3次，每次浸泡30?60min后过滤，合并滤液，再在40?50°C下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到蒜头果油； (3)按上样量:硅胶量=1?10:10?100的质量比称取硅胶G，先按固液比g/mL=l?5:2?10加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌20?30min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL=l?5:1?10加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚-乙酸乙酯洗脱系统进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚:乙酸乙酯=50:1?30:1 (V/V)的馏分，于40?50°C以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于:所述步骤(I)的磷酸盐缓冲液按下列操作配制:将浓度为0.2M的磷酸氢二钠溶液与浓度为0.2M磷酸二氢钠溶液按体积比为12.3?61:87.7?39混合，即得到pH=6.0?7.0的磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于:所述步骤(I)的上清液经后续纯化分离得到蛋白质沉淀。
6.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于:所述步骤(3)的硅胶G的粒度为200 ?300 目。
7.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:所述豆腐果苷按下列方法提取纯化，经过下列各步骤: (1)豆腐果种子粉碎，过100目筛，再加入体积浓度为50?70%的乙醇在20?30°C下冷浸30?60min,再超声波提取30?60min,过滤,滤液在45?55°C下进行旋转蒸发浓缩，回收乙醇，得到母猪果乙醇提取物； (2)在步骤(I)所得豆腐果乙醇提取物中按固液比g/mL为I?5:5?25加入纯水进行溶解，上大孔树脂DlOl型，先用纯水洗脱除去多糖、蛋白质等水溶性杂质，再用体积浓度为30?50%的乙醇洗脱4?5个保留体积，收集大孔树脂体积浓度为30?50%的乙醇流出液，经减压浓缩，再加入浓缩物体积2?3倍的浓度为90?95%的乙醇，在3?4°C下静置12?24h以析出结晶，再抽滤出结晶，即得到豆腐果苷纯品。
8.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于:所述薏苡仁内酯按下列方法提取纯化，经过下列各步骤: 将薏苡仁粉碎，过100目筛，再将薏苡仁粉在温度35?40°C、压力37?40MPa、CO2流量为10?20kg/h的条件下进行超临界二氧化碳萃取I?2h，采用体积浓度为70?95%的乙醇溶解萃取物质，再经旋转蒸发去除乙醇，得到黄色的油脂，即为薏苡仁内酯。
【文档编号】A61K36/8994GK104258193SQ201410551879
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】王娟, 施蕊, 杨宇明, 陈中华, 吴飞林, 杨敏, 肖丰坤, 缪福俊, 原晓龙 申请人:云南省林业科学院