一种新的柠檬苦素类化合物、制备方法与医药用途
【专利摘要】本发明涉及药物领域，具体涉及一种新的柠檬苦素类化合物、制备方法及该化合物在制备治疗宫颈癌药物中的应用。该化合物是一种新颖的柠檬苦素类化合物，体外试验具有抗宫颈癌的作用，可以用来制备治疗宫颈癌的药物。
【专利说明】-种新的梓樣苦轰类化合物、制备方法与医药用途
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物领域，具体涉及一种新的巧樣苦素类化合物、制备方法及该化合 物在制备治疗宫颈癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 巧樣苦素（Limonin)是植物次生代谢生成的一个含巧喃环并且高度氧化的四环 H聰类化合物，它主要存在于芸香科和悚科的多种植物中。20世纪60年代，Arigoni和 Barton等学者用化学和X-ray的方法法对巧樣苦素的结构进行了研究，阐明了巧樣苦素分 子结构。自1989年发现巧樣苦素具有激活谷脫甘肤S-转移酶活性的功能W来，人们对其 生物活性进行了大量研究，研究发现巧樣苦素具有广泛的药理活性，尤具是其具有多途径 的抗肿瘤活性，使得它的疗效和保健功能越来越受到人们的重视。有学者研究了巧樣苦素 对人乳腺癌细胞（MCF-7)的生长抑制及细胞周期动力学的影响。结果显示巧樣苦素能明显 抑制MCF-7的生长，抑制率高于70%，并随作用时间和剂量增加其效果增强。
[0003] 巧樣苦素类化合物是和巧樣苦素一类的化合物，是由大戟焼或甘遂焼型H聰衍生 而来的一类高度氧化的四降H聰类化合物，是芸香目主要特征的化学成分，主要存在于芸 香科和悚科植物中，叶柄花科和苦木科等亦有分布。巧樣苦素类化合物W巧元和糖巧两种 形式存在。该类化合物具有明显抗癌和抗菌等生物活性，近年来的研究集中在其化学结构、 生物合成和生物活性等方面。有学者研究了巧樣苦素等五种巧樣苦素类化合物对人肿瘤细 胞株（L-60、SK0V-3、HeLa、NCI-SNU-l、H巧G2和MCF-7)抑制增殖活性作用，结果发现五种 樣苦素类化合物对人乳腺癌细胞MCF-7均具有明显的增殖抑制作用，且呈一定的剂量时间 依赖关系。
[0004] 川悚（Melia toosendan Sieb. Et Zucc.)为悚科（Meliaceae)悚属（Melia)植物， 主要分布在我国西南部，是我国传统的驱肠寄生虫中草药，含有大量的巧樣苦素类化合物。 由于悚属植物具有生长迅速、用途广泛、具有较大经济价值，其所含的巧樣苦素类化合物多 结构复杂、活性多样化的特点，引起了各国研究工作者的广泛兴趣和重视，中国、印度、日本 等国研究此属者尤多。川悚子为川悚的干燥成熟果实，冬季果实成熟时采收，除去杂质，干 燥，具有舒肝行气止痛、驱虫的作用；通常用于胸胁、脫腹胀痛，疵痛，虫积腹痛。主产于四 川、贵州、湖北、湖南、河南及甘肃南部等。
[0005] 宫颈癌（Cancer of cervix)是指发生于子宫颈的上皮性恶性肿瘤，是全球妇女中 仅次于乳腺癌的第二种最常见的恶性肿瘤，是威胁妇女健康、导致妇女死亡的主要恶性肿 瘤之一。全球每年新发50万例，死亡20万例。我国宫颈癌发病率每年新增发病数超过13 万，占世界新发病例近30%，我国每年将有20万妇女死于宫颈癌。此外，我国宫颈癌近年发 病呈现年轻化趋势。目前研究认为，宫颈癌的病因与多种因素有关。Hausen提出人乳头瘤病 毒（Human Papilloma Virus,HPV)可能与宫颈癌发生有关的假说后（Hausen ZH,Papillim aviruses in human cancer, Cancer, 1987)，国内外学者就两者的关系进行了大量的研究， 随着分子生物学技术的发展HPV检测方法的不断改进，现已证实HPV是宫颈癌的主要致病 因子。目前已报道的HPV有120多种，其中约35种亚型可W感染生殖道，约20种与肿瘤有 关。约有99. 8%的宫颈癌合并HPV感染，故HPV致癌分子机制及高危型HPV和病原微生物 之间的协同作用愈来愈引起人们的关注。研究发现，HPV表达的E6和E7致癌蛋白分别能 使肿瘤抑制蛋白p53和P化失活，使得肿瘤细胞疯狂生长和繁殖。
[0006] 发明人在对川悚子化学成分研究的过程中，分离得到了一种新的巧樣苦素类化合 物。该化合物为首次报道。发明人对该化合物进行了抗肿瘤活性研究，发现该化合物能抑 制多种宫颈癌细胞生长和繁殖（包括HPV阳性和阴性宫颈癌细胞），可W用来制备治疗宫颈 癌的药物。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种从川悚子中分离得到的一种新的巧樣苦素类化合物A。
[0008] 本发明的另一目的是提供一种从川悚子中分离纯化化合物A的制备方法。
[0009] 本发明的再一目的在于提供化合物A在制备治疗宫颈癌等HPV相关肿瘤的药物中 的应用。
[0010] 根据本发明的一方面，提供具有下列化学结构式的化合物A :
[0011]
【权利要求】
1. 一种化学结构式如下的柠檬苦素类化合物化合物A，
2. 权利要求1所述的化合物A的制备方法，其其制备步骤包括： A. 将川楝子干燥药材粉碎，用醇或醇溶液提取一次或多次，过滤，收集滤液，减压浓缩 得醇浸膏； B. 醇浸膏加适量水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，萃取液浓缩得 石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏。 C. 正丁醇浸膏用柱色谱分离纯化得到纯的化合物A。
3. 权利要求2所述的制备方法，步骤C的详细步骤包括：（1)正丁醇浸膏用水混 悬，过滤，滤液上DlOl大孔吸附树脂，乙醇-水系统梯度洗脱，收集60 % -70%乙醇 洗脱部分；（2)60 % -70 %乙醇洗脱部分上硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱 (20:1，15:1，10:1，5:1，2:1，V/V)，收集二氯甲烷-甲醇（5:1)洗脱部分，减压回收溶剂；（3) 取二氯甲烷-甲醇（5:1)洗脱部分进一步用正己烷-丙酮进行梯度洗脱（10: 1，5: 1，2:1，V/ V)，收集正己烷-丙酮（2:1)洗脱部分，减压回收溶剂；（4)正己烷-丙酮（2:1)洗脱部分 进行反相硅胶柱层析，用甲醇-水（85:15)等度洗脱，收集5-6柱体积洗脱部位，浓缩；（5) 取步骤（4)浓缩物用半制备型高效液相色谱分离制备，乙腈-水（75:25)等度洗脱，得到纯 的化合物A。
4. 权利要求1所述的化合物A在制备治疗宫颈癌药物中的应用。
【文档编号】A61P35/00GK104447650SQ201410811139
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年12月22日 优先权日:2014年12月22日
【发明者】胡文杰 申请人:胡文杰