一种龙胆内酯化合物及其制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种龙胆内酯化合物及其制备方法与应用。所述的龙胆内酯化合物是以龙胆苦苷为原料制备得到，为龙胆内酯a和龙胆内酯b，其分子式分别为C19H20O7和C19H18O6，分别具有下述结构式Ⅰ和结构式Ⅱ：
（Ⅰ）（Ⅱ）。制备方法是以龙胆苦苷为原料，在酸性条件下进行热转化反应，后通过柱层析对反应液进行分离纯化得到龙胆内酯a和龙胆内酯b。本发明通过对龙胆苦苷酯化反应的产物进行分离得到一种新的龙胆内酯化合物，并通过药理实验研究表明本发明所述的龙胆内酯化合物具有显著的抗乙肝病毒作用。本发明所述的龙胆内酯化合物的制备方法具有原料易得，工艺简便的特点，可操作性强。
【专利说明】一种龙胆内酯化合物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学【技术领域】，具体涉及一种龙胆内酯化合物及其制备方法与应 用。
【背景技术】
[0002] 龙胆苦苷（Gentiopicroside)是龙胆科（Gentianaceae)龙胆属（Gentiana L)植 物龙胆的有效成分之一，在秦艽中的含量可高达18%，属于裂环环烯醚萜苷的糖苷配基。但 由于化合物中的烯醚键不稳定，容易在多种条件下发生分解转化，因此含有此类物质的药 材容易在放置及其炮制的过程中发生颜色变化及含量的变化。龙胆苦苷自身是前体药物， 它在生物机体内不易被吸收利用，药效不明显，容易产生耐药性，且具有一定的毒副作用， 所以改善龙胆苦苷的构型、提高其在肠道中的吸收率是提高其生物利用度的重要途径，因 此，其热转化产物的研究具有重要意义。
[0003] 近年来，环烯醚萜成分的化学和药理研究取得长足进展，特别是环烯醚萜成分在 加热等条件下发生转化，生成结构多样，且在抗乙肝病毒活性和保肝作用方面受到高度重 视。但该类化合物为手性碳多、高氧化、高稠和的复杂结构天然产物，很难进行合成，而其在 植物体含量非常低微，不具备产业化生产和商业化应用价值。因此，通过对龙胆苦苷热转化 产物的研究，有助于富含龙胆苦苷中药(药材、中成药、饮片）的生产及质量控制、临床应用 指导；同时，对揭示裂环烯醚萜类成分转化产物化学结构的多样性和新颖性、寻找和发现抗 肝炎新药及其前体物质(先导化合物)，全面认识裂环环烯醚萜类化合物性质、作用途径及 药物开发研究具有重要意义。
【发明内容】
[0004] 本发明的第一目的在于提供一种龙胆内酯化合物；第二目的在于提供所述的龙胆 内酯化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的龙胆内酯化合物的应用。
[0005] 本发明的第一目的是这样实现的，所述的龙胆内酯化合物是以龙胆苦苷为原料制 备得到，为龙胆内酯a和龙胆内酯b，其分子式分别为C 19H2tlO7和C 19H1806，分别具有下述结构 式I和结构式II :
【权利要求】
1. 一种龙胆内酯化合物，其特征在于所述的龙胆内酯化合物是以龙胆苦苷为原料制备 得到，为龙胆内酯a和龙胆内酯b，其分子式分别为C19H2(lO#PC19H1806，分别具有下述结构式 I和结构式II:
2. -种权利要求1所述的龙胆内酯化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤： A、 取原料龙胆苦苷，加入重量比3~10倍的水，调节pH为1~3,于90~100°C回流进行酯 化反应8~12h，将反应液冷却、过滤得到滤液和滤渣； B、 将滤液进行减压浓缩，经大孔吸附树脂吸附、先后用水和甲醇进行洗脱，通过TLC监 测分别收集糖类和内酯类部分； C、 取内酯类部分上MCI-GELCHP柱，用1:10~1:0的甲醇-水溶液进行洗脱，通过TLC 监测进行收集，合并相同部分； D、C步骤洗脱液的1:5部分进一步分离纯化即得所述的龙胆内酯a; E、C步骤洗脱液的1:3部分上硅胶柱，用50:1~1:3的石油醚-丙酮溶液进行梯度洗脱， 通过TLC监测收集洗脱液、浓缩、干燥得到龙胆内酯b。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于B步骤中水的用量为1~3BV。
4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于B步骤中甲醇的体积浓度为95~100%， 用量为3~7BV。
5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于C步骤所述的甲醇水溶液体积配比为 1:10、1:9、1:7、2:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:0。
6. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于D步骤中所述的分离纯化是经 S印hadexLH-20柱洗脱、正相硅胶柱洗脱。
7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的SephadexLH-20柱洗脱是采用 体积配比3:7~1:0的甲醇-水溶液进行梯度洗脱。
8. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的正向硅胶柱吸附洗脱是采用体 积配比4:1的石油醚-丙酮溶液进行洗脱。
9. 一种权利要求1所述的龙胆内酯化合物的应用，其特征在于所述的龙胆内酯化合物 在制备预防/治疗乙肝病毒有关的疫病药物中的应用。
【文档编号】A61P31/20GK104478894SQ201410839887
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月30日 优先权日:2014年12月30日
【发明者】周志宏, 马晓霞, 杨竹雅, 陈海丰, 淤泽浦 申请人:云南中医学院