本发明属于食用菌
技术领域：
，具体涉及一种食用菌活性物质的提取方法。
背景技术：
：食用菌中含有生物活性物质如：高分子多糖、β-葡萄糖和RNA(核糖核酸)复合体、天然有机锗、核酸降解物、cAMP(环化腺核苷一磷酸)和三萜类化合物等对维护人体健康有重要的利用价值。食用菌的药用保健价值有：抗癌作用；抗菌、抗病毒作用；降血压、降血脂、抗血栓、抗心律失常、强心等；健胃、助消化作用；止咳平喘、祛痰作用；利胆、保肝、解毒；降血糖；通便利尿；免疫调节。现有技术中主要关注于对食用菌培养基质的研发，以提高食用菌的产量，对于食用菌内的活性物质的提取方面仍然有很大的不足，多采用水提的浸提方法提取，采用的技术方法简单，提取效率低。对食用菌内的活性物质会有很大的浪费，对原材料也会造成很大的浪费。专利公开号CN104739890A的专利申请，公开了一种超声辅助提取食用菌菇中活性物质的方法，该发明包括以下步骤：原材料预处理、粉碎、乙醇提取、第一次超声波震荡、第一次离心提取、低温脂提、第二次超声波震荡、第二次离心提取、水提、干燥得到活性物质。该发明首先将溶于乙醇的活性物质提取出来，采用超声波震荡，且使得超声波震荡的功率逐渐均匀增大，有效的提高了提取的效率，而且也防止了一开始超声波震荡功率过大导致细胞结构过度破坏导致提取效率反而降低的问题。同时，采用多次超声波震荡和多次离心的方式，使得提取率大大提高。最后将脂提和乙醇提取的活性物质混合，干燥，制得活性物质，并低温存储，提取活性物质的提取率大大提高。但是该方法采用两次超声波震荡、两次离心提取、水提、醇提、脂提才能制得活性物质，步骤复杂，不利于推广使用，另外本发明对原材料进行一次处理，原材料中还含有丰富的活性物质未提取出来，造成很大的浪费。技术实现要素：本发明的目的是提供一种食用菌活性物质的提取方法，该方法操作简单，而且提取效率高，能充分提取食用菌内的活性物质。本发明提供如下的技术方案：一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量记，加入其重量份7-9倍的乙醇溶液，所述乙醇溶液的体积百分浓度为78-83％，加热温度至65-70℃，保温3-4小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份10-12倍的乙醇溶液得到滤渣液，所述乙醇溶液的体积浓度为30-40％，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为35-50℃，保温2-3小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的20-30％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎后得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质。优选的，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份10-15倍的质量百分浓度为15-18％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸20-30分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为25-30分钟(2)在干燥后的初料中加入其重量份11-18倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为400-550r/min，搅拌时间为35-50分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：(6-8)配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。优选的，所述步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为30-40目。优选的，所述步骤(2)中纤维素酶的重量份为滤渣液重量份的0.5-1.5％。优选的，所述步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为45-50KHz，超声波处理时间为30-40分钟。优选的，所述步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为52-58KHz，超声波处理时间为20-30分钟。优选的，所述步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的10-18倍，硬脂酸的体积百分浓度为60-75％。本发明的有益效果为，该方法操作简单，而且提取效率高，能充分提取食用菌内的活性物质；具体如下：(1)本发明采用沸石作为主要原料，沸石在我国的储量非常丰富，使用改性沸石作为主要原料，可以降低该方法的提取成本，将食用菌粉碎后过滤，可以增加其与乙醇溶液的接触面积，提高浸提的效果，加热乙醇可以进一步提高其活性物质析出的速度；在步骤(2)中，加入乙醇和纤维素酶，纤维素酶可以破坏食用菌细胞的细胞壁，使细胞壁内的物质溶入乙醇溶液中，对食用菌进行两次处理，充分对材料进行利用，提取效率高。(2)本发明沸石作为一种分子筛，具有很强的吸附能力，内部具有很大的空隙，但是它对活性物质的吸附能力很弱，经过本发明的改性后可以显著提高其对活性物质的吸附能力，利用改性沸石对活性物质的吸附性能，使活性物质被吸附到改性沸石内部的空隙中，而对滤液进行两次吸附，可以进一步减少滤液中的活性物质。(3)本发明对滤料进行粉碎后，加入硬脂酸，可以使沸石中吸附的活性物质释放在硬脂酸内，对震荡静止后的上清液进行浓缩即可的活性物质。其中，在步骤(3)中利用空化作用使活性物质稳稳地停留在沸石的内部空隙中，在步骤(4)中采用更高的超声波频率并且粉碎滤料使沸石内部的活性物质释放出来。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。实施例1一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量份记，加入其重量份7倍的体积百分浓度为78-83％的乙醇溶液，加热温度至65℃，保温3小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份10倍的体积浓度为30％的乙醇溶液得到滤渣液，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为35℃，保温2小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的20％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质混合物。其中，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份10倍的质量百分浓度为15％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸20分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为25分钟。(2)在干燥后的初料中加入其重量份11倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为400r/min，搅拌时间为35分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：6配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。其中，步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为30目。其中，步骤(2)中纤维素酶的重量份为滤渣液重量份的0.5％。其中，步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为45KHz，超声波处理时间为30分钟。其中，步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为52KHz，超声波处理时间为20分钟。其中，步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的10倍，硬脂酸的体积百分浓度为60％。实施例2一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量记，加入其重量份9倍的体积百分浓度为78-83％的乙醇溶液，加热温度至70℃，保温4小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份12倍的体积浓度为40％的乙醇溶液得到滤渣液，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为50℃，保温3小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的30％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎后得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质。其中，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份15倍的质量百分浓度为18％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸30分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为30分钟。(b)在干燥后的初料中加入其重量份18倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为550r/min，搅拌时间为50分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：8配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。其中，步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为40目。其中，步骤(2)中纤维素酶的重量份为滤渣液重量份的1.5％。其中，步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为50KHz，超声波处理时间为40分钟。其中，步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为58KHz，超声波处理时间为30分钟。其中，步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的18倍，硬脂酸的体积百分浓度为75％。实施例3一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量记，加入其重量份9倍的体积百分浓度为78-83％的乙醇溶液，加热温度至70℃，保温4小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份12倍的体积浓度为40％的乙醇溶液得到滤渣液，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为50℃，保温3小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的30％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎后得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质。其中，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份10倍的质量百分浓度为15％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸20分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为25分钟。(2)在干燥后的初料中加入其重量份11倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为400r/min，搅拌时间为35分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：6配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。其中，步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为30目。其中，步骤(2)中纤维素酶的重量份为液体重量份的0.5％。其中，步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为45KHz，超声波处理时间为30分钟。其中，步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为52KHz，超声波处理时间为20分钟。其中，步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的10倍，硬脂酸的体积百分浓度为60％。实施例4一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量记，加入其重量份7倍的体积百分浓度为78-83％的乙醇溶液，加热温度至65℃，保温3小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份10倍的体积浓度为30％的乙醇溶液得到滤渣液，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为35℃，保温2小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的20％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎后得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质。其中，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份15倍的质量百分浓度为18％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸30分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为30分钟。(2)在干燥后的初料中加入其重量份18倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为550r/min，搅拌时间为50分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：8配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。其中，步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为40目。其中，步骤(2)中纤维素酶的重量份为滤渣液重量份的1.5％。其中，步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为50KHz，超声波处理时间为40分钟。其中，步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为58KHz，超声波处理时间为30分钟。其中，步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的18倍，硬脂酸的体积百分浓度为75％。实施例5一种食用菌活性物质的提取方法，包括以下步骤：(1)将食用菌洗净后粉碎过滤，以重量记，加入其重量份8倍的体积百分浓度为78-83％的乙醇溶液，加热温度至66℃，保温3.5小时，过滤得第一滤液和滤渣；(2)在滤渣中加入其重量份11倍的体积浓度为35％的乙醇溶液得到滤渣液，在滤渣液中再加入纤维素酶，控制滤渣液的温度为72℃，保温2.5小时，过滤得第二滤液和滤渣；(3)将第一滤液和第二滤液合并，在其中加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤后得到第一滤料和第三滤液，将第三滤液浓缩至其体积为浓缩前的25％，再加入一定量的改性沸石，超声波震荡处理后过滤得第二滤料和第四滤液；(4)将第一滤料和第二滤料合并粉碎后得到混合料再加入硬脂酸，超声波震荡处理，静止后取上清液，上清液浓缩后可得食用菌活性物质。其中，所述步骤(3)中，改性沸石的制备方法包括以下步骤：(1)将天然斜发沸石放入微波炉中，微波加热后取出，放入其重量份12倍的质量百分浓度为16％的氯化钙溶液中，搅拌加热煮沸25分钟，干燥后得到改性沸石的初料；其中，微波加热的微波功率为543W，加热时间为27分钟。(2)在干燥后的初料中加入其重量份14倍的有机改性试剂，放到高速搅拌机中搅拌，搅拌速度为470r/min，搅拌时间为42分钟，用蒸馏水反复洗涤干燥后得到改性沸石；其中，有机改性试剂为季铵盐类表面活性剂和去离子水按质量比1：7配制而成，季铵盐类表面活性剂为十二烷基三甲基溴化铵或者十六烷基三甲基溴化铵；其中，使用蒸馏水对沸石进行洗涤至洗涤后的蒸馏水呈中性。其中，步骤(1)中食用菌粉碎后的粒径为35目。其中，步骤(2)中纤维素酶的重量份为滤渣液重量份的1％。其中，步骤(3)中超声波震荡处理的超声波为47KHz，超声波处理时间为35分钟。其中，步骤(4)中超声波震荡处理的超声波为55KHz，超声波处理时间为25分钟。其中，步骤(4)中硬脂酸的重量份为混合料的14倍，硬脂酸的体积百分浓度为67％。对比例1采用中国专利(公开号为CN104739890A)制得的活性物质。对比例2除采用天然斜发沸石以外，其原料含量及步骤与实施例一致。对比例3除无步骤(2)外，其原料含量与步骤与实施例一致。对比例4在步骤(3)中对滤液仅处理一次，其他原料含量及步骤与实施例一致。对比例5现有技术采用浸渍法制得的活性物质。采用实施例1—5的提取方法分别对灵芝、云芝、香菇、草菇、蘑菇中的活性物质进行提取；采用对比例1—5的提取方法分别对灵芝、云芝、香菇、草菇、蘑菇中的活性物质进行提取。采用液相色谱仪对实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5和对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5提取到的活性物质进行成分检测：其对比结果如下：检测项目活性物质成分活性物质得率(％)原料的利用率(％)实施例1多糖、核酸、三萜等15.676实施例2多糖、生物碱、核酸等14.975实施例3多糖、核酸、磷酸等16.180实施例4多糖、生物碱17.277实施例5多糖、核酸等19.785对比例1多糖10.953对比例2多糖11.345对比例3多糖9.543对比例4多糖6.749对比例5多糖13.241从表中可以看出，本发明中各步骤之间组分协同作用，缺少步骤或者更改原料都会造成食用菌提取成分的减少、活性物质得率的减少而导致剩余原料的增多，各组分各步骤共同实现本专利的功能，本发明所采用的的步骤、原料使食用菌的提取成分比常规的提取方法都要高，活性物质得率也有了很大的改进，特别是对于原料来说，本发明的原料利用率相对于对比例来说，有了非常显著地进步，最大增幅达到了95.1％。以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。当前第1页1 2 3