一种抑制N-羟乙酰神经氨酸合成的方法与流程

本发明涉及一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，属于抑制n-羟乙酰神经氨酸合成技术领域。

背景技术：

现有抑制n-羟乙酰神经氨酸合成技术包括：主要是包括物理法（水煮、微波、油炸）以及添加酶制剂来降低肉制品中的n-羟乙酰神经氨酸的含量，但存在的问题有:（1）通过物理法降低neu5gc含量存在许多不足之处，如水煮、微波、油炸等仅能使游离态的neu5gc水解出来，大部分的结合态neu5gc仍滞留在肉制品中；（2）通过酶制剂法降低neu5gc，仅能从宰后进行处理，且由于肉样基质复杂，酶解效果并不理想。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是：提供一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，以解决上述现有技术中存在的问题。

本发明采取的技术方案为：一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，该方法为：对待宰肉制品活体动物灌木犀草素，通过经口给药途径灌胃方式，将木犀草素采用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制成1ml溶液，每次灌胃量为1ml/d，灌胃29-31d。。

木犀草素量为145-155mg/(kg.d)。

neu5gc的合成起关键作用的是cmp-neu5ac羟化酶。

本发明的有益效果：与现有技术相比，本发明采用天然的黄酮类物质木犀草素抑制cmp-neu5ac羟化酶的底物，进而影响cmp-neu5ac羟化酶的活性，达到减少neu5gc的合成，从宰前活体中进行n-羟乙酰神经氨酸生化合成的干预，成本低，效果更加明显。

附图说明

图1是饲喂30天对大鼠体内neu5gc的影响图。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明进行进一步介绍。

实施例1：一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，该方法为：对待宰肉制品活体动物灌药，通过经口给药途径灌胃方式，给药为木犀草素，木犀草素量为150mg/(kg.d)，将其采用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制成1ml溶液，每次灌胃量为1ml/d，灌胃30d，单位mg/(kg.d)表示每千克体重的活体动物每天要灌胃的量是多少毫克。

实施例2：一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，该方法为：对待宰肉制品活体动物灌药，通过经口给药途径灌胃方式，给药为木犀草素，木犀草素量为145mg/(kg.d)，将其采用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制成1ml溶液，每次灌胃量为1ml/d，灌胃29d。

实施例3：一种抑制n-羟乙酰神经氨酸合成的方法，该方法为：对待宰肉制品活体动物灌药，通过经口给药途径灌胃方式，给药为木犀草素，木犀草素量为155mg/(kg.d)，将其采用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制成1ml溶液，每次灌胃量为1ml/d，灌胃31d。

为了进一步说明本发明的效果，进行如下试验：

选用清洁级雄性sd大鼠40只，适应性饲养观察1周，根据大鼠的初始体重随机四组，每组10只。以经口给药途径灌胃方式进行实验，实验组用木犀草素150mg/(kg.d)(用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制)；空白对照组用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行灌胃。每次灌胃量为1ml/d。采用木犀草素灌胃30d后，大鼠禁食12h，进行乙醚迷晕脊椎断裂致死，对处死后的大鼠进行解剖取大腿侧部肌肉组织、肝脏以及肾脏。之后称取不同处理组1g肉样及内脏，加入10ml30%的饱和硫酸铵，匀浆机处理成肉浆，真空冷冻干燥后，加入5ml2mol/l醋酸，80℃水浴3h，12000r/15min离心去除固形物，过滤冷冻干燥除去醋酸，所得干燥样品再溶于1ml超纯水中，加入0.2ml0.1mol/lnaoh在37℃条件下进行脱乙酰处理30min，过滤，加入dmb衍生剂50℃水浴150min，冷却至室温进行hplc检测。

neu5gc的合成起关键作用的是cmp-neu5ac羟化酶，所以本发明采用天然的黄酮类物质木犀草素抑制cmp-neu5ac羟化酶的底物，进而影响cmp-neu5ac羟化酶的活性，达到减少neu5gc的合成，从宰前活体中进行n-羟乙酰神经氨酸生化合成的干预，成本低，效果更加明显。

如图1所示，字母不同者代表存在差异显著（p<0.05)，字母相同代表差异不显著，下同。

neu5gc降解率计算：neu5gc降解率/%=（c0-c1）/c0

式中：c0表示空白对照中neu5gc的峰面积，c1表示实验组样品中neu5gc的峰面积。

肉样降解率：木犀草素=10.49%

肝样降解率：木犀草素=2.586%

肾样降解率：木犀草素=10.47%。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内，因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种抑制N‑羟乙酰神经氨酸合成的方法，该方法为：对待宰肉制品活体动物灌药，通过经口给药途径灌胃方式，给药为木犀草素，将其采用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液进行配制成1mL溶液，每次灌胃量为1mL/d，灌胃29‑31d。本发明采用天然的黄酮类物质木犀草素抑制CMP‑Neu5Ac羟化酶的底物，进而影响CMP‑Neu5Ac羟化酶的活性，达到减少Neu5Gc的合成，从宰前活体中进行N‑羟乙酰神经氨酸生化合成的干预，成本低，效果更加明显。

技术研发人员：朱秋劲;周樱子;晏印雪;常瑞;徐阿奇;李洪英;梁美莲;曾雪峰
受保护的技术使用者：贵州大学
技术研发日：2018.09.28
技术公布日：2019.02.15