3-乙酰氨基香豆素在制备治疗或预防肾脏纤维化及慢性肾病的药物中的应用的制作方法

本发明属于药物领域，特别涉及3-乙酰氨基香豆素在制备治疗或预防肾脏纤维化及慢性肾病的药物中的应用。

背景技术：

肾脏间质纤维化(rif)是多种慢性肾脏疾病(ckd)发展至终末期肾病(esrd)的共同途径和主要病理学基础，是各种慢性进展性肾病的最终病理性结局，其严重危害人类生命健康。主要表现为肾小球硬化和肾小管间质纤维化，以炎症细胞浸润、肾脏固有细胞激活和增殖、细胞外基质(ecm)大量堆积、肾脏固有细胞(如足细胞)丢失以及微血管减少为主要特征。肾脏纤维化程度与肾功能下降密切相关，提示患者预后不良。因此，延缓和阻止肾脏纤维化形成是防治ckd的关键策略。

近年来，随着研究的不断深入，我们对肾脏纤维化发病机制及潜在治疗靶点的认识虽已取得重要进展，但临床上仍然主要通过控制加剧肾功能恶化的危险因素来防治肾脏纤维化，患者预后改善并不十分显著。因此，如何有效防治肾脏纤维化仍是ckd研究领域的重要难题。已有研究表明，肾脏纤维化是肾脏受损后异常修复的结果，其机制至今仍未完全明确，目前认为肾脏纤维化形成的分子机制主要与以下几个方面有关：肾脏损伤启动炎症反应，各类炎症细胞大量浸润；纤维化相关因子的大量释放，如细胞因子、生长因子及趋化因子等，导致损伤过程放大；ecm的合成与降解失衡，肾间质中ecm过度堆积；肾脏固有细胞(系膜细胞、足细胞、小管细胞、内皮细胞、成纤维细胞、周细胞等)表型发生间充质转变，固有细胞数量减少；肾脏微血管病变导致组织缺血缺氧。针对这几个方面进行干预对肾脏纤维化防治具有重要的意义。然而，目前有关肾脏纤维化无创性诊断方法尚未建立，特异性治疗手段更是几乎空缺。

单侧输尿管梗阻(uuo)模型是目前应用最为广泛的研究rif的实验动物模型。通过结扎单侧输尿管引起肾脏引流系统的阻塞，导致急性肾脏功能的改变和慢性肾脏结构的损害。该模式动物出现明显的间质胶原等纤维化分子沉积，出现典型的肾脏纤维化组织病理学和变化及肾功能改变。是理想的研究肾脏纤维化和ckd的病理模型。目前，大鼠、小鼠以及家兔的uuo模型均已建立，并用于研究rif的发生发展机制和对可能改善rif的治疗药物进行效果评价。

香豆素是一类具有苯并α吡喃酮母核的天然产物，广泛存在于植物界，特别是在芸香科、伞形科、菊科、豆科、瑞香科、茄科等高等植物以及动物及微生物代谢产物中。迄今，已从自然界生物中分离鉴定的香豆素化合物超过1300种。研究表明，香豆素天然产物具有抗hiv、抗肿瘤、抗凝血、降压、抗心率失常、抗骨髓疏松、镇痛、抗菌等广泛的药理活性。因此，如何成功地研发出新型防治慢性肾病(肾脏纤维化)药物，具有重要的科学意义和临床意义。

技术实现要素：

本发明的目的是提供3-乙酰氨基香豆素的药物新用途。

第一方面，本发明提供了3-乙酰氨基香豆素在制备治疗或预防肾脏纤维化的药物中的应用。

第二方面，本发明提供了3-乙酰氨基香豆素在制备治疗或预防慢性肾病(ckd)的药物中的应用。

第三方面，本发明提供了包含3-乙酰氨基香豆素及药学上可接受的载体的药物组合物。

所述3-乙酰氨基香豆素分子式为c11h9no3，分子量203.19400，结构式如式ⅰ所示：

优选地，所述药物组合物通过注射、口服、喷射、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。

优选地，所述机体包括肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织中任一处。

优选地，所述载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂中的一种或多种。

优选地，所述组合物制成注射液、悬浮剂、粉剂、片剂、颗粒剂中的任一种制剂。

优选地，所述药物组合物口服时，3-乙酰氨基香豆素的用量为5-100mg/kg/天。

有益效果：本发明通过单侧输尿管结扎(uuo模型)建立小鼠肾脏间质纤维化模型，研究3-乙酰氨基香豆素对肾功能和组织病理学损伤及肾脏纤维化的保护作用。实验结果表明，模型组肾功能受损、肾脏间质纤维化；口服给予3-乙酰氨基香豆素50mg/kg/d能明显改善肾脏功能，抑制肾脏纤维化的发生和发展。

附图说明

图1为肾脏切片图。

图2为蛋白电泳图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1

采用3-乙酰氨基香豆素制备的药物对uuo及其导致的肾损伤的保护作用进行实验，其中动物分组：雄性c57bl/6j小鼠24只，18-22g，每组6只，分为对照组sham、空白给药组sham-3a、模型组uuo、给药组3a。

给药方式为灌胃给药，每日给药1次，连续给药两周，给药一周后开始造模，3-乙酰氨基香豆素给药剂量为50mg/kg/d。造模方式为麻醉后单侧输尿管闭塞手术，模型组、给药组小鼠进行左侧输尿管结扎，对照组和空白给药组仅暴露左侧输尿管但不予结扎。最后一次给药后，摘眼球取血，37℃孵育1h，3000rpm离心10min分离血清，取结扎侧小鼠肾脏组织做病理切片以及检测蛋白表达。

见图1-2中，可以明显得出：模型组小鼠有明显的纤维沉积，给药后有效缓解，模型组小鼠纤维化蛋白表达上调，给药后可以有效抑制，可以得出3-乙酰氨基香豆素抗纤维化保护肾脏作用明显。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

技术特征：

技术总结
本发明提供了3‑乙酰氨基香豆素在制备治疗或预防肾脏纤维化的药物中的应用；本发明还提供了包含3‑乙酰氨基香豆素及药学上可接受的载体的药物组合物。本发明通过单侧输尿管结扎(UUO模型)建立小鼠肾脏间质纤维化模型，研究3‑乙酰氨基香豆素对肾功能和组织病理学损伤及肾脏纤维化的保护作用。实验结果表明，模型组肾功能受损、肾脏间质纤维化；口服给予3‑乙酰氨基香豆素50mg/kg/d能明显改善肾脏功能，抑制肾脏纤维化的发生和发展。

技术研发人员：谢正伟;杨宝学;王一鸣;王亮;李海涛
受保护的技术使用者：北京大学
技术研发日：2019.01.17
技术公布日：2019.03.15