本发明是关于植物萃取物的用途，尤其是一种莳萝籽萃取物用于制备降低脑神经细胞损伤及减缓脑神经细胞凋亡的组合物的用途。
背景技术：
：：自由基(freeradicals)为带有不成对电子的含氧分子，具不稳定与高活跃特性，亦常称为含氧自由基(oxygenfreeradicals)，其自身以及经历氧化还原后的代谢物皆属于活性氧物质(reactiveoxygenspecies，ros)。适量的自由基是维持正常生理机能所必需，如参与氧化还原等生化反应、铲除外来病菌、与讯息传递等；然而过量的自由基对人体却是具有危害性，例如会影响生理恒定、破坏生物分子结构、毒杀正常细胞与促使基因突变等，因此，自由基可具有保护与伤害的双重效应，当自由基过度产生时会造成与体内的抗氧化防御机转(antioxidantdefensemechanisms)之间的不平衡，会进而导致细胞氧化压力(oxidativestress)的发生，且目前氧化压力已知是参与许多神经性的慢性病的重要角色，例如中风(stroke)、老年痴呆症(alzheimer’sdisease)、帕金森氏症(parkinson’sdisease)、亨丁顿氏症(huntington′sdisease)、及侧索硬化性肌肉萎缩症(amyotrophiclateralsclerosis)等。由于神经细胞(neurons)凋亡后便难以再生，故一旦脑神经细胞遭受自由基的攻击，便会造成不可逆性的伤害，使神经功能有所缺陷而无法正常运作。综合上面所述，为了减缓、改善神经细胞因氧化压力所导致的不可逆的凋亡，且基于现代人生活水平提高且对于保健概念提高，开发一种能有效提高神经细胞抗氧化能力的组合物，着实有其必要性。技术实现要素：缘此，本发明的一目的在提供一种莳萝籽萃取物用于制备预防神经细胞损伤及/或脑神经细胞凋亡的组合物的用途，其中该莳萝籽萃取物是以一溶剂萃取一莳萝籽所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物。本发明的又一目的在提供一种莳萝籽萃取物用于制备提升超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，sod)基因、及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase，gpx)基因的组合物的用途，其中该莳萝籽萃取物是以一溶剂萃取一莳萝籽所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物。本发明的另一目的在提供一种莳萝籽萃取物用于制备提高脑神经抗氧化能力的组合物的用途，其中该莳萝籽萃取物是以一溶剂萃取一莳萝籽所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物。在本发明的一实施例中，其中该溶剂与该莳萝籽的液固比为5-20∶1-5，且该萃取是在50℃-100℃进行0.5-3小时。在本发明的又一实施例中，该sod基因包含选自于超氧化物歧化酶1(superoxidedismutase1，sod1)基因、超氧化物歧化酶2(superoxidedismutase2，sod2)基因及其任意组合所组成的群组；且该gpx基因为谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathioneperoxidase1，gpx1)基因；其中该莳萝籽萃取物是提升脑神经细胞分解活性氧类物质(reactiveoxygenspecies，ros)的活性。在本发明的又一实施例中，其中该脑神经细胞损伤及脑神经细胞凋亡是由氧化压力所致。在本发明的又一实施例中，该莳萝籽萃取物的浓度至少为1mg/ml。本发明的莳萝籽萃取物能有效预防及降低脑神经细胞的氧化压力、有效预防及修复脑神经细胞的细胞损伤及凋亡、以及有效提升具有降低细胞氧化压力及提升神经保护能力的sod1基因、sod2基因、及gpx1基因的表现量，以达到脑神经抗氧化及减缓脑神经退化的功效。因此，本发明的莳萝籽萃取物可用于制备降低脑神经细胞损伤及减缓脑神经细胞凋亡的用途，该组合物该组合物是一医药品、一食品或一保养品，可藉由口服、皮肤涂抹等方式给予一个体。以下将配合图式进一步说明本发明的实施方式，下述所列举的实施例是用以阐明本发明，并非用以限定本发明的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本发明的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本发明的保护范围当视后附的申请专利范围所界定者为准。附图说明图1是本发明的一实施例的莳萝籽萃取物于增加脑神经抗氧化能力的柱形图；***p＜0.001；图2是本发明的一实施例的莳萝籽萃取物于修复损伤的脑神经细胞的免疫荧光染色图；图3是本发明的一实施例的莳萝籽萃取物于提升脑神经抗氧化基因表现量的柱形图；*p值＜0.05；**p值＜0.01；***p值＜0.001。具体实施方式本文中所使用数值为近似值，所有实验数据皆表示在20％的范围内，较佳为在10％的范围内，最佳为在5％的范围内。使用excel软件进行统计分析。数据以平均值±标准偏差(sd)表示，个此之间的差异以学生t检验(student′st-test)分析。莳萝(anethumgraveolens)为伞形科(apiaceae)莳萝属(anethum)的一年生草本植物，且为伞形科莳萝属中唯一的一种植物，又称刁草、土茴香，原生于西亚，后西传至地中海沿岸及欧洲各地，现今地中海和东欧为主要的生产地，外形类似茴香，高度约为一至四英尺高，黄色小花呈伞状分布，叶为针状分针。此外，莳萝已知可用来治疗头痛、健胃整肠、消除口臭、为糖尿病及高血压等疾病患者的减盐料理增添风味、让夜啼的幼儿趋于平静等效用。如本文中所使用的，用语「莳萝籽萃取物」意为莳萝籽与溶剂以1-5∶5-20(w/w)比例经一特定时间与温度萃取而得。依据本发明，医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于非经肠地道(parenterally)或局部地(topically)投药的剂型，这包括，但不限于：注射品(injection)[例如，无菌的水性溶液(sterileaqueoussolution)或分散液(dispersion)]、无菌的粉末(sterilepowder)、外部制剂(externalpreparation)以及类似物。依据本发明，医药品可进一步包含有一被广泛地使用于药物制造技术的医药上可接受的载剂(pharmaceuticallyacceptablecarrier)。例如，该医药上可接受的载剂可包含一或多种选自于下列的试剂：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspendingagent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegratingagent)、分散剂(dispersingagent)、黏结剂(bindingagent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizingagent)、螯合剂(chelatingagent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gellingagent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wettingagent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorptiondelayingagent)、脂质体(liposome)以及类似物。有关这些试剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。依据本发明，该医药上可接受的载剂包含有一选自于由下列所构成的群组中的溶剂：水、生理盐水(normalsaline)、磷酸盐缓冲生理盐水(phosphatebufferedsaline，pbs)、含有醇的水性溶液(aqueoussolutioncontainingalcohol)以及它们的组合。依据本发明，该医药品可以一选自于由下列所构成的群组中的非经肠道途径(parenteralroutes)来投药：皮下注射(subcutaneousinjection)、表皮内注射(intraepidermalinjection)、皮内注射(intradermalinjection)以及病灶内注射(intralesionalinjection)。依据本发明，医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于局部地施用于皮肤上的外部制剂(externalpreparation)，这包括，但不限于：乳剂(emulsion)、凝胶(gel)、软膏(ointment)、乳霜(cream)、贴片(patch)、擦剂(liniment)、粉末(powder)、气溶胶(aerosol)、喷雾(spray)、乳液(lotion)、乳浆(serum)、糊剂(paste)、泡沫(foam)、滴剂(drop)、悬浮液(suspension)、油膏(salve)以及绷带(bandage)。依据本发明，该外部制剂是藉由将本发明的医药品与一为熟习此项技艺者所详知的基底(base)相混合而被制备。依据本发明，该基底可包含有一或多种选自于下列的添加剂(additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氢化合物(hydrocarbons)[诸如石油胶(petroleum，jelly)以及白凡士林(whitepetrolatum，)]、蜡(wax)[诸如石蜡(paraffin)以及黄蜡(yellowwax)]、保存剂(preservingagents)、抗氧化剂(antioxidants)、界面活性剂(surfactants)、吸收增强剂(absorptionenhancers)、安定剂(stabilizingagents)、胶凝剂(gellingagents)[诸如微结晶纤维素(microcrystallinecellulose)以及羧基甲基纤维素(carboxymethylcellulose)]、活性剂(activeagents)、保湿剂(humectants)、气味吸收剂(odorabsorbers)、香料(fragrances)、ph调整剂(phadjustingagents)、螯合剂(chelatingagents)、乳化剂(emulsifiers)、闭塞剂(occlusiveagents)、软化剂(emollients)、增稠剂(thickeners)、助溶剂(solubilizingagents)、渗透增强剂(penetrationenhancers)、抗刺激剂(anti-irritants)、着色剂(colorants)以及推进剂(propellants)等。有关这些添加剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。依据本发明，保养品可进一步包含有一被广泛地使用于保养品制造技术的可接受的佐剂(acceptableadjuvant)。例如，该可接受的佐剂可包含有一或多种选自于下列的试剂：溶剂、胶凝剂、活性剂、防腐剂、抗氧化剂、遮蔽剂(screeningagent)、螯合剂、界面活性剂、染色试剂(coloringagent)、增稠剂(thickeningagent)、填料(filler)、香料以及气味吸收剂。有关这些试剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。依据本发明，保养品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于护肤(skincare)或化妆(makeup)的形式，这包括，但不限于：水性溶液(aqueoussolution)、水-醇溶液(aqueous-alcoholsolution)或油性溶液(oilysolution)、呈水包油型(oil-in-watertype)、油包水型(water-in-oiltype)或复合型的乳剂、凝胶、软膏、乳霜、面膜(mask)、贴片、贴布(pack)、擦剂、粉末、气溶胶、喷雾、乳液、乳浆、糊剂、泡沫、分散液、滴剂、慕斯(mousse)、防晒油(sunblock)、化妆水(tonicwater)、粉底(foundation)、卸妆产品(makeupremoverproducts)、肥皂(soap)以及其他身体清洁产品(bodycleansingproducts)等。依据本发明，保养品亦可与一或多种选自于下列的已知活性的外用剂(externaluseagents)一起合并使用：美白剂(whiteningagents)[诸如维生素a酸(tretinoin)、儿茶素(catechin)、曲酸、熊果苷以及维生素c]、保湿剂、抗发炎剂(anti-inflammatoryagents)、杀菌剂(bactericides)、紫外线吸收剂(ultravioletabsorbers)、植物萃取物(plantextracts)[诸如芦荟萃取物(aloeextract)]、皮肤营养剂(skinnutrients)、麻醉剂(anesthetics)、抗痘剂(anti-acneagents)、止痒剂(antipruritics)、止痛剂(analgesics)、抗皮肤炎剂(antidermatitisagents)、抗过角化剂(antihyperkeratolyticagents)、抗干皮肤剂(anti-dryskinagents)、抗汗剂(antipsoriaticagents)、抗老化剂(antiagingagents)、抗皱剂(antiwrinkleagents)、抗皮脂溢出剂(antiseborrheicagents)、伤口治疗剂(wound-healingagents)、皮质类固醇(corticosteroids)以及激素(hormones)。有关这些外用剂的选用与数量是落在熟习此项技术的人士的专业素养与例行技术范畴内。依据本发明，食品产品可被当作食品添加物(foodadditive)，藉由习知方法于原料制备时添加，或是于食品的制作过程中添加，而与任一种可食性材料配制成供人类与非人类动物摄食的食品产品。依据本发明，食品产品的种类包括但不限于：饮料(beverages)、发酵食品(fermentedfoods)、烘培产品(bakeryproducts)、健康食品(healthfoods)以及膳食补充品(dietarysupplements)。本发明提供一种莳萝籽萃取物用于降低脑神经细胞损伤及减缓脑神经细胞凋亡的用途，本发明的莳萝籽萃取物是以一溶剂萃取一莳萝籽果实所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物，其可用于提升sod基因及gpx基因的表现量、修复与减缓脑神经细胞损伤与凋亡、以及提高脑神经抗氧化能力。同时，本发明用于制降低脑神经细胞损伤及减缓脑神经细胞凋亡的组合物，亦可包含一有效量的莳萝籽萃取物及一医药上可接受的载体，该组合物是一医药品、一食品或一保养品。以下将详细说明本发明莳萝籽萃取物的详细萃取方法，与该莳萝籽萃取物于增加脑神经抗氧化能力的功效的测试、于修复及减缓脑神经细胞损伤及凋亡的功效的测试、以及于提升sod基因及gpx基因表现量的功效的测试，以证实该莳萝籽萃取物对于提升sod基因及gpx基因的表现量、修复与减缓脑神经细胞损伤与凋亡、以及提高脑神经抗氧化能力的功效。实施例1本发明的莳萝籽萃取物的制备方法在本发明一实施例中，将莳萝籽与一萃取溶剂以1-5∶5-20的固液比混合，其中该萃取溶剂是水、醇、或醇水混合物，本发明一较佳实施例，该萃取溶剂为水，并加入0.1-1％的柠檬酸，均质后在溶剂中以50-100℃进行萃取0.5-3小时。萃取后冷却至室温，将该粗萃取物经由400mesh及5μm的滤网过滤以获得滤液。最后，将该滤液于45-70℃进行减压浓缩，得到本发明的莳萝籽萃取物。实施例2本发明莳萝籽萃取物于增加脑神经抗氧化能力的功效本实施例以神经母细胞进行本发明的莳萝籽萃取物于脑神经抗氧化的功效测试。该神经母细胞是neuro-2a细胞(购自美国典型培养物保藏中心，编号ccl-131tm)。该细胞是培养于含有10％的胎牛血清(fetalbovineserum)、1％青霉素-链霉素(购自gibco，美国)、以及90％的dmem(dulbecco′smodifiedeaglemedium，购自gibco，美国，12100-046)的细胞培养液中。将1.5×105个neuro-2a细胞培养于含有2ml上述细胞培养液的六孔培养盘中，于37℃培养24小时后，在不干扰贴附的细胞的情况下移除培养液，接着将细胞分成以下四组：(1)仅加入细胞培养液处理3小时的空白控制组、(2)加入500μm的h2o2(购自sigma，美国)处理1小时的比较组，(3)以2mg/ml本发明的莳萝籽萃取物预处理1小时再以500μm的h2o2处理1小时的实验组、及(4)以1mg/ml本发明的莳萝籽萃取物预处理1小时再以500μm的h2o2处理1小时的实验组；其中，本实施例的莳萝籽萃取物是以渗透水(rowater)进行萃取。接着，于各组分别加入5μg/ml的dcfh-da于37℃处理15分钟，再以500μm的h2o2于37℃处理细胞1小时后，以1ml的1倍磷酸盐缓冲溶液(1xphosphatebufferedsaline，1xpbs)清洗细胞两次，并加入200μl胰蛋白酶(trypsin)在黑暗中反应5分钟，使细胞由培养盘上脱落，加入适当的培养液终止反应，并将细胞连同培养液收集至1.5ml离心管，以400g离心5分钟后移除上清液，再以1ml的1xpbs冲洗细胞一次后，再以400g离心10分钟后并除上清液，以1ml的1xpbs重新悬浮细胞，并加入dcfh-da(购自sigma，美国，编号si-d6883-50mg，5mg/ml保存于dmso中)标记细胞，并使用流式细胞仪检测细胞于激发波长450-490nm、放射波长510-550nm的荧光数值。再利用excel软件进行studentt-test以决定两个样本群体之间是否在统计上具有显著差异。2′，7′-dichlorodihydrofluoresceindiacetate(dcfh-da)是一种稳定的非极性化合物，可自由通透细胞膜，当dcfh-da进入细胞后，会被细胞内的脂质酶水解，形成具有极性的2’，7’-dichlorodihydrofluorescin(dcfh)，停留在细胞内无法出来，而细胞内的活性氧类物质(reactiveoxygenspecies，ros)与dcfh产生氧化还原反应形成2’，7’-dichlorofluorescin(dcf)，以450-490nm波长激发后，会产生的绿色荧光可以被于510-550nm波长被侦测出，因此侦测经dcfh-da处理的细胞的荧光强度，能反映细胞内活性氧物质的含量。本发明的莳萝籽萃取物于增加脑神经抗氧化压力能力的实验结果如图1所示。已知脑神经退化的发生与脑细胞承受氧化压力所造成的细胞凋亡有密切关系，从实验结果可知仅经h2o2处理过的比较组可测得20万au以上的荧光强度，显示h2o2确实可诱导脑神经细胞的氧化压力，而以本发明的莳萝籽萃取物进行预处理的神经脑细胞，不论使用量为2mg/ml或是1mg/ml，皆仅可测得5千以下au的荧光强度，且与未经h2o2处理过的空白控制组相当，此结果显示本发明的莳萝籽萃取物确实能有效降低脑神经细胞中ros的量，可有效预防脑神经细胞凋亡，所以能有效减缓脑细胞的退化。实施例3本发明莳萝籽萃取物于修复及减缓脑神经细胞损伤及凋亡的功效本实施例以神经母细胞进行本发明的莳萝籽萃取物于脑神经细胞损伤修复的功效测试。该神经母细胞是neuro-2a细胞(购自美国典型培养物保藏中心，编号ccl-131tm)。该细胞是培养于含有10％的胎牛血清(fetalbovineserum)、1％青霉素-链霉素(购自gibco，美国)、以及90％的dmem(dulbecco′smodifiedeaglemedium，购自gibco，美国，12100-046)的培养液进行细胞培养。将2×104个neuro-2a细胞培养于24孔培养盘中，于37℃培养一夜后，并在以h2o2处理细胞前，将细胞分成以下两组分别处理24小时：(1)加入2mg/ml本发明的莳萝籽萃取物的实验组、以及(2)仅加入上述培养液的比较组，接着将两组细胞以1mm的h2o2处理细胞1小时；其中，本实施例的莳萝籽萃取物是以渗透水(rowater)进行萃取。另外，以未经h2o2且未经本发明的莳萝籽萃取物处理过的细胞为空白控制组，以碘化丙锭染色溶液(propidiumiodidestainingsolution，简称pi，购自bdpharmingen，cat.51-66211e)、以及膜联蛋白v染剂(annexinv，alexafluor488，购自invitrogen，cat.a13201)将细胞染色15-30分钟，其中该二染剂分别与膜联蛋白v结合缓冲液(annexinvbindingbuffer，购自ebioscience，cat.00-0055-43)以体积百分比1∶250混合配置。接着加入200μl的20000倍稀释后的赫斯特(hoechst33342，购自thermo，美国，编号62249)将细胞于室温下使细胞核染色3分钟，并以pbs清洗两次，接着在共轭焦雷射扫描显微镜(zeisslsm700)下进行观察。当细胞受损时会诱导细胞凋亡的产生，细胞凋亡可以透过细胞型态的变化或生物化学的变化来检测，目前常用的指标有caspase活性分析、dna片段分析、以及磷脂酰丝胺酸外翻到细胞膜表面形成凋亡小体等。本实施例中使用的碘化丙锭是一种可对dna染色的细胞核染色试剂，常用于标定细胞凋亡末期的dna片段；膜联蛋白v是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，可与磷脂酰丝胺酸特异的结合，用以标定细胞凋亡早期的磷脂酰丝胺酸外翻的现象。本发明的莳萝籽萃取物于修复损伤的脑神经细胞功效的实验结果如图2所示，其中红色光信号为碘化丙锭标定dna片段，绿色光信号为膜联蛋白v标定外翻的磷脂酰丝胺酸，蓝色光信号为赫斯特标定细胞核。从实验结果可看出未经h2o2处理过的空白控制组仅有蓝色光的信号，而仅经h2o2处理过的比较组中具有绿色光及红色光信号的细胞数有明显增加的情况，显示经h2o2处理后确实会导致细胞产生损伤并走向凋亡。而以本发明的莳萝籽萃取物预处理过的脑神经细胞中，具有绿色光及红色光信号的细胞数目明显少于比较组，此结果显示本发明的莳萝籽萃取物能有效预防脑神经细胞损伤及凋亡，因此能有效减缓脑细胞的退化。实施例4本发明莳萝籽萃取物于提升sod基因及gpx基因表现量的功效本实施例以神经母细胞进行本发明的莳萝籽萃取物于提升sod基因及gpx基因表现量的功效测试。将1.5×105个neuro-2a细胞培养于含有2ml前述细胞培养液的六孔培养盘中，并将细胞分成以下三组：(1)空白控制组、(2)仅加入100μm的h2o2处理6小时的比较组，(3)以1mg/ml本发明的莳萝籽萃取物预处理6小时再以100μm的h2o2处理6小时的实验组；其中，本实施例的莳萝籽萃取物是以渗透水(rowater)进行萃取。接着将角质细胞以细胞裂解液(rbbuffer，购自geanaid公司，中国台湾，catno.rbd300)回收细胞后，使用rna萃取试剂套组(购自geneaid公司，中国台湾，catno.rbd300)分别收集两组细胞内的rna，接着利用iii反转录酶(购自invitrogene公司，美国，编号18080-051)以2000ng的萃取rna为模板并以引子产生mrna反转录的相应cdna产物，接着利用abisteponeplustmreal-timepcrsystem(thermofisherscientific公司，美国)，以及kapasybrfast(购自sigma公司，美国，编号38220000000)将两组反转录后产物分别以表一的组合引子进行定量实时反转录聚合酶连锁反应(quantitativereal-timereversetranscriptionpolymerasechainreaction)试验，条件为95℃反应1秒，60℃反应20秒，总共40个循环。用以定量sod1基因、sod2基因、及gpx1基因的mrna表现量，并以方程式2-δδct推导目标基因的mrna相对量，其中定量数值是取由阈值循环数(ct)，δct＝ct实验组的目标基因/控制组的目标基因-ctgapdh(甘油醛-3-磷酸脱氢酶，glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase)，δδct＝δct实验组的目标基因-δct控制组的目标基因。表现改变的倍数利用excel软件的stdev公式计算标准偏差，并在excel软件中以单尾studentt-test分析是否具有统计上显著差异(*p值＜0.05；**p值＜0.01；***p值＜0.001)。表一、定量实时反转录聚合酶连锁反应的组合引子细胞内的活性氧类物质(reactiveoxygenspecies，简称ros)包括超氧自由基(superoxide，o2-)、羟自由基(oh-)和过氧化氢(h2o2)等化学性质活泼的含氧物质。其中超氧自由基在细胞中有两个主要来源，一是在粒线体中电子传递链在传送电子过程中不慎与氧接触而产生；另一则是细胞膜上的nadph氧化酶，它会将nadph上的电子传给氧而形成。为了防止过多的ros产生，细胞发展出sod、gpx及过氧化氢酵素(catalase)来分解这些过氧化物。本发明的莳萝籽萃取物提升sod1基因、sod2基因、及gpx1基因表现量的结果如图3所示。该脑神经细胞经本发明的莳萝籽萃取物处理后的实验组，sod1基因表现量较空白控制组高约1.4倍、sod2基因则较高约30倍、及gpx1基因则较高约10倍，其中三组基因中实验组与比较组间皆具有显著差异性。此结果显示本发明的莳萝籽萃取物能有效提升sod1基因、sod2基因、及gpx1基因的表现量，能提升细胞的抗氧化能力及增加分解ros的能力。综上所述，本发明的莳萝籽萃取物能有效预防及降低脑神经细胞的氧化压力、有效预防及修复脑神经细胞因氧化压力导致细胞损伤及凋亡、以及有效提升具有降低细胞氧化压力及提升神经保护能力的sod1基因、sod2基因、及gpx1基因的表现量，以达到脑神经抗氧化及减缓脑神经退化的功效。因此，本发明的莳萝籽萃取物可用于制备提降低脑神经细胞损伤及减缓脑神经细胞凋亡的用途，该组合物该组合物是一医药品、一食品或一保养品，可藉由口服、皮肤涂抹等方式给予一个体。当前第1页12当前第1页12