抗人MAC-1的单克隆抗体及其用途的制作方法

背景技术：

1、巨噬细胞-1抗原(mac-1，整合素αmβ2)主要表达于先天免疫细胞(包括单核细胞、嗜中性粒细胞、nk细胞等)的表面。mac-1是一种异二聚体糖蛋白，包含非共价连接的整合素αm(cd11b、cr3a、itgam)和整合素β2(cd18、itgb2)。cd11b是一种跨膜蛋白，具有一个大的胞外结构域和一个短的胞质尾。其胞外结构域包含i结构域、β螺旋桨(β-propeller)结构域、腿(thigh)结构域、calf-1结构域和calf-2结构域。cd11b的i结构域有大约179个氨基酸插入β螺旋桨结构域。该i结构域负责结合混杂配体(例如ic3b、纤维蛋白原、icam-1、cd40l等)，并参与细胞粘附、迁移、趋化和吞噬作用，并调节先天免疫细胞的炎症反应。

2、与其它整合素一样，mac-1以具有不同配体结合亲和力的不同构象存在。如图1所示，cd11b和cd18弯曲成v形，i结构域靠近膜，形成无活性的mac-1(低亲和力)。由内向外的信号传导将mac-1改变为开放的构象，将i结构域从膜上伸展开，以获得最佳的配体结合。位于cd18的i-egf2上的一个表位在弯曲构象中隐藏(失活或闭合状态)；在伸展或开放状态下，该表位暴露出来并且可被单克隆抗体(kim127)识别(j.immunol.2001；166:5629-5637)。这种构象变化也导致i结构域位点的重排，从而成为配体结合的高亲和力位点，并形成单克隆抗体m24结合的表位(proc.natl.acad.sci.usa.2004；101:2333-2338)。伴随配体结合亲和力变化的此类构象变化与mac-1功能相关。

技术实现思路

1、本发明的实施方案涉及可特异性结合mac-1并调节免疫细胞功能的抗体。这些抗体可用于治疗多种与mac-1相关的疾病或障碍，例如感染性疾病或癌症。

2、本发明的一个方面涉及抗人mac-1抗体。根据本发明的一个实施方案，抗人mac-1抗体包含选自表1所示的seq id no：1至seq id no：158的轻链可变区序列和重链可变区序列。

3、本发明的一个方面涉及用于治疗与mac-1相关的病症的方法。根据本发明一个实施方案的方法包括向有此需要的对象给药有效量的本发明抗体。该病症是急性或慢性炎症。该病症可以是感染或癌症。

4、根据以下说明和相关附图，本发明的其它方面将变得显而易见。

技术特征：

1.一种抗人mac-1抗体，其中所述抗体与特定状态的人mac-1结合，并通过tlr活化的免疫细胞调节th1细胞因子和/或th2细胞因子分泌。

2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述th1细胞因子分泌的增强程度大于所述th2细胞因子分泌的增强程度。

3.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含具有cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3序列的重链可变区序列；以及具有cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3序列的轻链可变区序列，其中

4.根据权利要求1所述的抗人mac-1抗体，其中所述cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3、cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3具有序列seq id no：159-164、或seq id no：165-170、或seq id no：171-176、或seq id no：177-182、或seq id no：183-188、或seq id no：189-194、或seq id no：195-200、或seq id no：201-206、或seq id no：207-212、或seq id no：213-218、或seq idno：219-224、或seq id no：225-230、或seq id no：231-236、或seq id no：237-242、或seqid no：243-248、或seq id no：249-254、或seq id no：255-260、或seq id no：261-266、或seq id no：267-272、或seq id no：273-278、或seq id no：279-284、或seq id no：285-290、或seq id no：291-296、或seq id no：297-302、或seq id no：303-308、或seq id no：309-314、或seq id no：315-320、或seq id no：321-326、或seq id no：327-332、或seq idno：333-338、或seq id no：339-344、或seq id no：345-350、或seq id no：351-356、或seqid no：357-362、或seq id no：363-368、或seq id no：369-374、或seq id no：375-380、或seq id no：381-386、或seq id no：387-392、或seq id no：393-398、或seq id no：399-404、或seq id no：405-410、或seq id no：411-416、或seq id no：417-422、或seq id no：423-428、或seq id no：429-434、或seq id no：435-440、或seq id no：441-446、或seq idno：447-452、或seq id no：453-458、或seq id no：459-464、或seq id no：465-470、或seqid no：471-476、或seq id no：477-482、或seq id no：483-488、或seq id no：489-494、或seq id no：495-500、或seq id no：501-506、或seq id no：507-512、或seq id no：513-518、或seq id no：519-524、或seq id no：525-530、或seq id no：531-536、或seq id no：537-542、或seq id no：543-548、或seq id no：549-554。

5.根据权利要求1所述的抗人mac-1抗体，其中所述cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3、cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3具有序列seq id no：543-548、或seq id no：549-554、或seq id no：483-488、或seq id no：369-374、或seq id no：189-194。

6.根据权利要求1所述的抗人mac-1抗体，其中所述重链可变区序列为seq id no：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、或157；并且所述轻链可变区序列为seq id no：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、或158。

7.根据权利要求1所述的抗人mac-1抗体，其中所述重链可变区序列和所述轻链可变区序列具有以下序列对：seq id no：1和2、或seq id no：3和4、或seq id no：5和6、或seq idno：7和8、或seq id no：9和10、或seq id no：11和12、或seq id no：13和14、或seq id no：15和16、或seq id no：17和18、或seq id no：19和20、或seq id no：21和22、或seq id no：23和24、或seq id no：25和26、或seq id no：27和28、或seq id no：29和30、或seq id no：31和32、或seq id no：33和34、或seq id no：35和36、或seq id no：37和38、或seq id no：39和40、或seq id no：41和42、或seq id no：43和44、或seq id no：45和46、或seq id no：47和48、或seq id no：49和50、或seq id no：51和52、或seq id no：53和54、或seq id no：55和56、或seq id no：57和58、或seq id no：59和60、或seq id no：61和62、或seq id no：63和64、或seq id no：65和66、或seq id no：67和68、或seq id no：69和70、或seq id no：71和72、或seq id no：73和74、或seq id no：75和76、或seq id no：77和78、或seq id no：79和80、或seq id no：81和82、或seq id no：83和842、或seq id no：85和86、或seq id no：87和88、或seq id no：89和90、或seq id no：91和92、或seq id no：93和94、或seq id no：95和96、或seq id no：97和98、或seq id no：99和100、或seq id no：101和102、或seq idno：103和104、或seq id no：105和106、或seq id no：107和108、或seq id no：109和110、或seq id no：111和112、或seq id no：113和114、或seq id no：115和116、或seq id no：117和118、或seq id no：119和120、或seq id no：121和122、或seq id no：123和124、或seq idno：125和126、或seq id no：127和128、或seq id no：129和130、或seq id no：131和132、或seq id no：133和134、或seq id no：135和136、或seq id no：137和138、或seq id no：139和140、或seq id no：141和142、或seq id no：143和144、或seq id no：145和146、或seq idno：147和148、或seq id no：149和150、或seq id no：151和152、或seq id no：153和154、或seq id no：155和156、或seq id no：157和158。

8.根据权利要求1所述的抗人mac-1抗体，其中所述所述重链可变区序列和所述轻链可变区序列具有以下序列对：seq id no:129和130、或seq id no：131和132、或seq id no：133和134、或seq id no：71和72、或seq id no：11和12。

9.一种用于治疗与急性和慢性炎症或癌症相关的疾病或障碍的药物组合物，其中所述药物组合物包含根据权利要求1至8中任一项所述的抗体以及药学上可接受的载体或赋形剂。

10.一种用于治疗与急性和慢性炎症或癌症相关的疾病或障碍的方法，包括：向有此需要的对象给药有效量的根据权利要求1至8中任一项所述的抗体。

技术总结
本发明提供了抗人Mac‑1的单克隆抗体。这些抗体可以与不同状态的Mac‑1结合，从而改变Mac‑1的生物功能。这些抗体可以通过TLR活化的免疫细胞调节Th1/Th2细胞因子分泌，并且可用于治疗与急性和慢性炎症性病症相关的疾病，例如感染性疾病和癌症。

技术研发人员：李文机,吕衍达,张家鸣,黄品谚,蔡宜芳
受保护的技术使用者：先知生物科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15