泛-FGFR抑制剂在调控炎症反应中的应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种泛-fgfr抑制剂在调控炎症反应中的应用。

背景技术：

1、炎症是一种基本的免疫反应，使生物在遭受病原微生物感染或组织损伤期间能够存活。各种外在和内在的炎症刺激物包括但不限于各种感染性微生物(如病毒和细菌)、癌细胞或死亡细胞。尽管炎症是宿主健康免疫反应的重要组成部分，但严重的炎症会导致各种疾病，如败血症、类风湿性关节炎、急性肺损伤、慢性呼吸道疾病、炎症性肠病(ibd)、癌症、衰老，甚至死亡。其中，病毒和致病性细菌感染是引起炎症和死亡的主要原因。重症监护病房(icu)中约50％的患者因细菌感染而发生严重败血症，感染患者的死亡率为29％。死亡原因主要归因于脂多糖(lps)内毒素的细胞毒性作用。现有研究表明，在lps刺激的巨噬细胞中会产生多种炎症因子，如肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、白细胞介素-1β(il-1β) 和白细胞介素-6(il-6)以及高水平的细胞内活性氧(ros)等。

2、免疫蛋白酶体是巨噬细胞等免疫细胞中炎症的重要介质，由炎症信号触发其表达。现有研究表明，免疫蛋白酶体不仅可以将蛋白质水解成多肽，作为抗原载入mhc-i复合物，还与巨噬细胞极化、炎性细胞因子产生、各种炎性和自身免疫性疾病以及结肠炎和结肠炎相关癌症等有关。因此，免疫蛋白酶体抑制剂已成为各种疾病的候选药物，主要用于降解过量的免疫蛋白酶体。然而，目前尚不清楚免疫蛋白酶体是否以及如何降解。

3、巨自噬/自噬是一种分解代谢途径，通过双层膜囊泡(自噬体)进行大量运输，最终降解溶酶体中的细胞内成分。自噬途径是一个动态过程，其功能是通过选择性降解胞质物质(如有毒蛋白质聚集体、不必要或受损的细胞器和细胞内病原体) 来维持细胞内稳态。自噬功能障碍与几种促炎性疾病有关，如类风湿性关节炎、狼疮和炎症性肠病(ibd)。自噬基因atg16l1、nod2、irgm、atg5和atg7 的种系变异与包括克罗恩病在内的慢性炎症性疾病有关。然而，自噬限制炎症的机制目前尚不清楚。

4、综上所述，阐明自噬是否以及如何以免疫蛋白酶体为降解靶点，以及免疫蛋白酶体的降解在限制炎症中的作用非常重要。为了解决这个问题，本发明提供了一种泛-fgfr抑制剂在调控炎症反应中的应用，以期缓解现有难题中的至少一种。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供泛-fgfr抑制剂在调控炎症反应中的应用，具体技术方案如下。

2、泛-fgfr抑制剂在制备抗炎药中的应用，所述泛-fgfr抑制剂可以抑制细胞炎症，所述泛-fgfr抑制剂为(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4- 基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇。

3、进一步，所述抗炎药可用于急性肺损伤炎症反应、败血症炎症反应和炎症性肠胃病。

4、进一步，所述泛-fgfr抑制剂通过激活细胞选择性自噬反应来促进免疫蛋白酶体降解以抑制炎症。

5、进一步，所述泛-fgfr抑制剂抑制fgfr活性和下游pi3k/akt/mtor 信号通路，导致所述选择性自噬的激活。

6、一种抗炎药，包含泛-fgfr抑制剂和免疫蛋白酶体抑制剂，所述泛-fgfr 抑制剂为(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇；所述免疫蛋白酶体抑制剂为onx-0914。

7、进一步，所述抗炎药还包含药学上允许添加的辅料和/或助剂。

8、进一步，所述抗炎药可用于急性肺损伤炎症反应、败血症炎症反应和炎症性肠胃病。

9、泛-fgfr抑制剂在制备细胞炎症检测试剂盒中的应用，所述试剂盒至少还包含一种脂多糖，所述泛-fgfr抑制剂可以是(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1- (3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇。

10、脂多糖可引起细胞炎症反应，可用作检测时的对照。

11、进一步，所述试剂盒可用于检测细胞的炎症水平，所述细胞包括单核巨噬细胞、腹腔巨噬细胞和/或骨髓源性巨噬细胞。

12、进一步，所述试剂盒可以通过检测细胞中的no、ros和/或促炎细胞因子的含量水平来判断细胞炎症的程度。

13、进一步，所述试剂盒可以通过检测细胞的形态来判断细胞是否有炎症。

14、有益技术效果

15、在本发明中，通过激活自噬的实验验证，确定泛-fgfr(pan-fgfr)抑制剂ly2874455为一种有效的抗炎治疗应用。利用lps诱导的巨噬细胞炎症反应作为功能筛选，进一步确定泛-fgfr抑制剂ly2874455是一种有效的细胞炎症抑制剂。本发明揭示了ly2874455对自噬的刺激促进了lps诱导的巨噬细胞中免疫蛋白酶体的自噬降解。具体来说，ly2874455抑制akt-mtor轴激活了自噬，进一步引发由受体sqstm1/p62介导的免疫蛋白酶体的降解。此外， ly2874455激活的自噬能显著抑制炎性细胞因子的产生，在本发明中，ly2874455 诱导的免疫蛋白酶体自噬降解通过lps诱导的急性肺损伤和右旋糖酐硫酸钠(dss)诱导的炎症性肠病的活体小鼠模型得到验证。这些实验表明，免疫蛋白酶体的选择性自噬降解是先天性炎症信号的关键调节因子，而ly2874455通过激活细胞选择性自噬反应来促进免疫蛋白酶体降解，进而抑制炎症。

16、为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。

17、图1为ly2874455减轻lps刺激的巨噬细胞的炎症反应；

18、图2为ly2874455抑制lps刺激的巨噬细胞的炎症；

19、图3为ly2874455降低lps刺激的巨噬细胞中免疫蛋白酶体特异性亚单位的蛋白质水平；

20、图4为免疫蛋白酶体在lps诱导的nf-κb因子上游炎症中发挥作用；

21、图5为ly2874455激活自噬过程；

22、图6为ly2874455诱导巨噬细胞自噬；

23、图7为ly2874455通过自噬和选择性受体p62促进免疫蛋白酶体的降解；

24、图8为ly287445通过自噬诱导免疫蛋白酶体亚单位降解；

25、图9为ly2874455通过自噬途径抑制炎症；

26、图10为ly287445通过自噬抑制炎症；

27、图11为ly2874455抑制小鼠模型的肺部和肠道炎症；

28、图12为ly2874455通过诱导免疫蛋白酶体自噬降解抑制炎症反应的示意图概述。

技术特征：

1.泛-fgfr抑制剂在制备抗炎药中的应用，其特征在于，所述泛-fgfr抑制剂可以抑制细胞炎症，所述泛-fgfr抑制剂为(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗炎药可用于急性肺损伤炎症反应、败血症炎症反应和炎症性肠胃病。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述泛-fgfr抑制剂通过激活细胞选择性自噬反应来促进免疫蛋白酶体降解以抑制炎症。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述泛-fgfr抑制剂抑制fgfr活性和下游pi3k/akt/mtor信号通路，导致所述选择性自噬的激活。

5.一种抗炎药，其特征在于，包含泛-fgfr抑制剂和免疫蛋白酶体抑制剂，所述泛-fgfr抑制剂为(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇；所述免疫蛋白酶体抑制剂为onx-0914。

6.如权利要求5所述的抗炎药，其特征在于，所述抗炎药还包含药学上允许添加的辅料和/或助剂。

7.如权利要求5所述的抗炎药，其特征在于，所述抗炎药可用于急性肺损伤炎症反应、败血症炎症反应和炎症性肠胃病。

8.泛-fgfr抑制剂在制备细胞炎症检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒至少还包含一种脂多糖，所述泛-fgfr抑制剂可以是(r)-(e)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙氧基)-1h-吲唑-3基)乙烯基)-1h-吡唑-1-基)乙醇。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述试剂盒可用于检测细胞的炎症水平，所述细胞包括单核巨噬细胞、腹腔巨噬细胞和/或骨髓源性巨噬细胞。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述试剂盒可以通过检测细胞中的no、ros和/或促炎细胞因子的含量水平来判断细胞炎症的程度。

11.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述试剂盒可以通过检测细胞的形态来判断细胞是否有炎症。

技术总结
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种泛‑FGFR抑制剂在调控炎症反应中的应用。本发明提供的泛‑FGFR抑制剂LY2874455能有效激活自噬，并抑制脂多糖(LPS)刺激的巨噬细胞的固有炎症。此外，本发明还揭示了免疫蛋白酶体通过选择性自噬进行降解，提供的免疫蛋白酶体抑制剂可以逆转自噬缺陷巨噬细胞的过度炎症，从而证实免疫蛋白酶体降解在自噬介导的炎症抑制中的关键作用。以上结果表明，本发明提供的泛‑FGFR抑制剂方案能有效调节免疫蛋白酶体的选择性自噬。

技术研发人员：卢克锋,周姣
受保护的技术使用者：四川大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16