CB7在增敏甲氨蝶呤对治疗肝癌药物中的应用的制作方法

cb7在增敏甲氨蝶呤对治疗肝癌药物中的应用
技术领域
1.本发明属于生物医药领域，涉及到cb7的一种新用途，尤其是指cb7在增敏甲氨蝶呤对治疗肝癌药物中的应用。
技术背景
2.肝癌是全球常见的恶性肿瘤之一，也是肿瘤导致死亡的第二大原因。世界范围内，每年肝癌新发病例约为70万，其发病率和死亡率高居恶性肿瘤前三位，仅次于肺癌和胃癌。早期或部位局限的肝癌患者通常采用手术切除术，中晚期及复发肝癌患者通常采用化疗手段。然而，耐药性和肿瘤异质性限制了药物的疗效，导致患者对化疗的短暂反应甚至无反应。
3.叶酸是嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷酸从头合成途径中重要的辅助因子，在dna合成和复制中发挥重要。叶酸通过一系列酶促反应生成四氢叶酸，四氢叶酸是叶酸在胞内的活化形式，传递一碳单位，参与一碳代谢，对于嘌呤和胸腺嘧啶的合成、同型半胱氨酸的甲基化等生物学过程起着重要作用。肿瘤的增殖需要大量营养和能量的供给。研究发现，为了满足肿瘤增殖所需的dna合成，叶酸代谢关键酶的表达上调。二氢叶酸还原酶dhfr是叶酸代谢的关键限速酶。dhfr在多种肿瘤中表达异常，促进叶酸代谢和dna合成。靶向dhfr的药物如甲氨蝶呤(mtx)已经广泛应用于多种肿瘤的临床治疗，主要通过抑制dhfr的活性，进而阻碍肿瘤细胞的生长与繁殖。但其副作用明显，不仅会导致病人造血功能和胃肠上皮损伤，也会由于病人自身dhfr高表达对药物产生耐药性。因此，增加甲氨蝶呤治疗的敏感性，对肝癌患者的治疗具有重要意义。
4.乙醛脱氢酶（aldhs）是nadp+依赖酶的一个超家族，负责将内源性和外源性醛代谢为相应的羧酸。aldh3a1是乙醛脱氢酶家族中的成员之一，参与甲醛氧化为甲酸的过程。cb7是乙醛脱氢酶3a1的抑制剂。


技术实现要素：

5.本发明目的在于：提供一种包括cb7的具有抗肿瘤效果的组合物。
6.本发明再一目的在于：提供上述组合物在抗肿瘤药物中的应用。
7.本发明目的通过下述方案实现：一种抗肿瘤药物甲氨蝶呤的组合物，还包括了cb7。
8.较优的，所述组合物中，cb7作为单独组分，与甲氨蝶呤的质量比为：1：2。
9.本发明提供了一种上述组合物的抗癌药物中的应用。cb7对化疗药物甲氨蝶呤有增强药物敏感性。
10.一种cb7在治疗肝癌药物中的应用。作为肝癌药物的增敏剂。
11.本发明以小鼠肝癌细胞hep1-6接种的荷瘤小鼠为模型动物，通过腹腔注射给予甲氨蝶呤和cb7联合用药，测定小鼠肿瘤体积的变化评价cb7对甲氨蝶呤的增敏作用。研究发现，甲氨蝶呤单用组呈现一定的抑瘤作用，cb7与甲氨蝶呤联用显著增强了甲氨蝶呤的抗肿
瘤药效。
12.本发明的机理是：化疗药物甲氨蝶呤通过抑制二氢叶酸还原酶dhfr的活性，抑制肝癌细胞的生长。cb7是乙醛脱氢酶3a1的抑制剂，cb7与甲氨蝶呤联合用药可以增加肝癌细胞对甲氨蝶呤治疗的敏感性。
13.本发明提供了一种cb7在抗肝癌药物中的应用，即cb7可以与甲氨蝶呤合用，以提高甲氨蝶呤化疗效果，提高药物疗效，为临床治疗肝癌提供了一个高效的增敏剂。
附图说明
14.图1 肝癌荷瘤小鼠肿瘤重量对比图；图2 肝癌荷瘤小鼠肿瘤体积变化对比图。
具体实施方式
15.本发明通过下面的实施例进行详细解释，但不仅限于此。
16.实施例1：cb7在肝癌荷瘤小鼠对甲氨蝶呤增敏作用实验：细胞来源与培养：小鼠肝癌细胞hep1-6购于上海中科院细胞库。细胞采用含10%胎牛血清、100u/ml青霉素和100μg/ml链霉素的dmem培养基培养于37℃、5%co2培养箱中。
17.动物来源与饲养：采用balb/c-nude小鼠进行实验。在标准饲养环境下（自由饮食与饮水，昼夜交替，各12小时），适应性饲养一周。
18.肝癌荷瘤小鼠模型的建立：培养小鼠肝癌细胞hep1-6至对数生长期，消化细胞，无菌pbs重悬并计数细胞，以1
×
106/点注射到裸鼠的双侧腹股沟处，一周后开始计量肿瘤生长体积。当肿瘤体积达到50mm3左右时，将小鼠随机分为4组，按照需要给药处理。分为对照组、甲氨蝶呤组、甲氨蝶呤＋cb7联合用药组（质量比为2：1）。
19.肝癌荷瘤小鼠设计如下：对照组腹腔注射dmso，甲氨蝶呤单用组采取10mg/kg.day腹腔注射，甲氨蝶呤+cb7为药物联用组，甲氨蝶呤采取10mg/kg.day+cb7采取5mg/kg.day，均为腹腔注射。每隔3天注射一次。每隔3天测量小鼠的肿瘤的体积大小，记录并绘制曲线。15天后处死小鼠，取出肿瘤，比较肿瘤的体积和重量。
20.结果如图1所示，肝癌荷瘤小鼠接受治疗后，甲氨蝶呤＋cb7联合用药组别的小鼠肿瘤重量明显轻于其他组别。
21.如图2所示，肝癌荷瘤小鼠接受治疗后，甲氨蝶呤＋cb7联合用药组别的小鼠肿瘤生长速度明显慢于其他组别。对照组生长最快。
22.从实验结果进一步验证本发明的有益效果。小鼠接受甲氨蝶呤与cb7联合用药，肿瘤体积、重量显著小于其他组别，肿瘤的生长速度显著慢于其他组别，说明甲氨蝶呤与cb7联合用药显著抑制肿瘤的生长，即cb7可增强甲氨蝶呤的抗肿瘤药效。


技术特征：
1.一种抗肿瘤药物甲氨蝶呤的组合物，其特征在于，还包括cb7。2.根据权利要求1所述抗肿瘤药物甲氨蝶呤的组合物，其特征在于，述cb7与甲氨蝶呤的质量比为1:2。3.一种cb7在治疗肝癌药物中的应用。

技术总结
本发明公开了一种CB7在增敏甲氨蝶呤对治疗肝癌药物中的应用，提出了一种包括CB7和甲氨蝶呤的组合物，也提供了合用CB7在增敏甲氨蝶呤在治疗肝癌药物中的应用。化疗药物甲氨蝶呤通过抑制二氢叶酸还原酶DHFR的活性，抑制肝癌细胞的生长。CB7作为乙醛脱氢酶3A1的抑制剂，CB7与甲氨蝶呤联合，可以增加肝癌细胞对甲氨蝶呤的敏感性。为临床治疗肝癌提供了一个高效的增敏剂。效的增敏剂。


技术研发人员：崔大祥 崔明青
受保护的技术使用者：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
技术研发日：2022.07.20
技术公布日：2022/11/29