冠心病相关长链非编码RNATPRG1-AS1及其结合蛋白MYH9的应用

本发明是关于一种冠心病相关长链非编码rna tprg1-as1及其结合蛋白myh9的应用，具体而言，是关于tprg1-as1在制备用于抑制hasmc迁移、抑制新内膜形成和/或抑制动脉粥样硬化病变的试剂中的应用。

背景技术：

1、动脉粥样硬化性心血管疾病(ascvds)的最显着特征是动脉粥样硬化斑块的形成。动脉粥样硬化斑块中的大多数细胞来源于中膜中迁移的血管平滑肌细胞(vsmc)，血管平滑肌细胞从中膜迁移到内膜发生异常增殖引起的血管内膜增厚导致血管重塑。

2、在哺乳动物中广泛表达的长链非编码rna(lncrna)是一类长度超过200个核苷酸(nt)且几乎不编码蛋白质的rna分子。lncrna通过调控转录中的基因表达，转录后和表观遗传水平等在各种生物活动中发挥广泛作用，包括染色质重塑，选择性剪接，基因组印记，细胞周期调控等。已有文献报道，lncrna可以通过与蛋白质相互作用在调节vsmc表型转换中起关键作用。例如，lncrna ak098656通过促进myh11/fn1蛋白降解诱导vsmc表型转换。ink4基因座中的反义非编码rna(anril)充当wdr5和hdac3复合物的支架并促进人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,hasmcs)表型转换。心脏中胚层增强子相关的非编码rna(carmn)通过直接结合myocd促进人冠状动脉平滑肌细胞(hcasmc)的收缩表型。

3、然而，绝大多数lncrna在人主动脉平滑肌细胞表型转换和血管重塑中的调节作用和机制还没有被完全阐明。

技术实现思路

1、本发明的一个目的在于提供一种长链非编码rna tprg1-as1的应用。

2、本发明的一个目的在于提供一种长链非编码rna tprg1-as1的结合蛋白myh9的应用。

3、本案发明人课题组既往研究对93例冠心病病例和48例对照的外周血单核细胞进行lncrna/mrna芯片分析，获得了冠心病全转录组水平lncrna/mrna表达谱(gse113079)；应用qrt-pcr技术在412例冠心病病例、295例对照大样本中重复验证，验证了tprg1-as1是一种新的cad诊断生物标志物；巨噬细胞tprg1-as1的缺失影响炎症相关基因及其附近基因的表达。此外，在肿瘤相关研究中发现，tprg1-as1通过诱导rbm24的表达和激活caspase3/7介导的细胞凋亡抑制肿瘤进展。本发明的研究中发现，tprg1-as1不具有蛋白质编码能力，是一个真正的长链非编码rna，tprg1-as1在主动脉平滑肌细胞表型转换和血管重塑中具有重要调节作用，进而提供了tprg1-as1在制备用于抑制hasmc迁移、新内膜形成和/或动脉粥样硬化病变制剂中的应用，进一步还提供了tprg1-as1的结合蛋白myh9的相关应用。

4、具体而言，一方面，本发明提供了长链非编码rna tprg1-as1在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用。

5、根据本发明的具体实施方案，本发明的tprg1-as1的全长序列为1279nt，具体序列如seq id no:1所示。

6、另一方面，本发明还提供了长链非编码rna tprg1-as1在制备抑制血管新内膜形成的制剂中的应用。

7、根据本发明的具体实施方案，tprg1-as1通过抑制平滑肌细胞新内膜形成而抑制动脉粥样硬化病变。

8、根据本发明的具体实施方案，本发明的应用中，所述平滑肌细胞为血管平滑肌细胞。在一些更具体的实施方案中，所述平滑肌细胞为动脉平滑肌细胞。

9、另一方面，本发明还提供了长链非编码rna tprg1-as1在制备与myh9蛋白相互作用的制剂中的应用。

10、根据本发明的具体实施方案，tprg1-as1与myh9蛋白相互作用以促进myh9蛋白降解和/或阻碍f-肌动蛋白应力纤维形成。

11、根据本发明的具体实施方案，tprg1-as1与myh9蛋白相互作用以调控平滑肌细胞迁移。

12、根据本发明的具体实施方案，vsmc特异性tprg1-as1过表达降低动脉粥样硬化斑块中myh9蛋白水平，减轻动脉粥样硬化病变。

13、另一方面，本发明还提供了myh9基因和/或蛋白在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用。

14、在本发明的一些具体实施方案中，本发明应用基因型-组织表达(gtex)数据库、动脉粥样硬化相关geo数据集中以及血小板源性生长因子bb(platelet derived growthfactor bb,pdgfbb)诱导的hasmcs细胞模型分析tprg1-as1的表达情况，在动脉粥样硬化斑块中显著上调表达的tprg1-as1被识别为一个真正的lncrna，并且描述了其在hasmc中转录物的全长和亚细胞定位。在功能上，tprg1-as1可以调控hasmc迁移而不是增殖。机制上，在hasmcs中，tprg1-as1通过与myh9蛋白的直接相互作用，促进myh9蛋白降解并阻碍f-肌动蛋白应力纤维形成。平滑肌细胞特异性tprg1-as1转基因能显著减少新内膜形成，并显著减轻apoe-/-小鼠的动脉粥样硬化病变程度。

15、整体而言，本发明通过具体实验证实了长链非编码rna tprg1-as1在抑制hasmc迁移、新内膜形成和/或动脉粥样硬化病变等方面的应用。

技术特征：

1.长链非编码rna tprg1-as1在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用。

2.长链非编码rna tprg1-as1在制备抑制血管新内膜形成的制剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其中，tprg1-as1通过抑制平滑肌细胞新内膜形成而抑制动脉粥样硬化病变。

4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其中，所述平滑肌细胞为血管平滑肌细胞。

5.根据权利要求4所述的应用，其中，所述平滑肌细胞为动脉平滑肌细胞。

6.长链非编码rna tprg1-as1在制备与myh9蛋白相互作用的制剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其中，tprg1-as1与myh9蛋白相互作用以促进myh9蛋白降解和/或阻碍f-肌动蛋白应力纤维形成。

8.根据权利要求6所述的应用，其中，tprg1-as1与myh9蛋白相互作用以调控平滑肌细胞迁移。

9.根据权利要求6所述的应用，其中，vsmc特异性tprg1-as1过表达降低动脉粥样硬化斑块中myh9蛋白水平，减轻动脉粥样硬化病变。

10.myh9基因和/或蛋白在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用。

技术总结
本发明提供了一种冠心病相关长链非编码RNA TPRG1‑AS1及其结合蛋白MYH9的应用。具体而言，本发明提供了长链非编码RNA TPRG1‑AS1在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用，还提供了长链非编码RNA TPRG1‑AS1在制备抑制血管新内膜形成的制剂中的应用。本发明还提供了长链非编码RNA TPRG1‑AS1在制备与MYH9蛋白相互作用的制剂中的应用，还提供了MYH9基因和/或蛋白在制备调控平滑肌细胞迁移的试剂中的应用。

技术研发人员：王来元,顾东风,陈恕凤,杨彬,任晓晓
受保护的技术使用者：中国医学科学院阜外医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13