一种积雪草1号提取物的新用途

本发明涉及中药，尤其是一种积雪草1号提取物的新用途。

背景技术：

1、积雪草为伞形科积雪草属centella l.植物积雪草centella asiatica(l.)urb.的干燥全草，又名“雷公根”、“铜钱草”、“崩大碗”等，广泛分布于长江流域以南各地(四川、云南、贵州)。积雪草始载于《神农本草经》，为《中华人民共和国药典》收载用药。其味苦、辛，性寒，归肝、脾、肾经，具有清热利湿、解毒消肿的功效，现多用于治疗湿热黄疸、痈肿疮毒、跌扑损伤等。

2、皮肤光老化属于外源性老化，是引起皮肤衰老的重要原因之一，严重损害人体健康，甚至会引起皮肤癌。外源性衰老通常是由紫外线辐射、吸烟及接触有害化学物质等环境因素引起的皮肤衰老。来自太阳的紫外线(ultraviolet，uv)包括长波紫外线uva，320～400nm)、中波紫外线(uvb，290～320nm)和短波紫外线(uvc，270～290nm)。其中，uvb对皮肤伤害最大，长期照射会导致皮肤松弛、粗糙和出现红斑。

3、皮肤光老化组织学变化主要表现多为表皮不规则增厚，过量的uvb照射会对人体表皮产生较大损害。角质层是表皮的最外层，主要由角质形成细胞组成，占表皮细胞的90％以上，易被uvb损害，而hacat细胞是一种被转化但不致癌的角质形成细胞系，也是uvb的靶细胞，在形态学和生物学特性上与正常人角质形成细胞相似，保留了所有的表皮分化能力，现代药理学研究中hacat细胞常用于评价抗光老化活性。

4、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，ldh)是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的细胞质中，一旦细胞膜受损，ldh即被释放到细胞外，因此可以通过检测细胞培养上清中ldh活性判断细胞的受损程度。这也成为研究中药提取物对uvb损伤影响程度的重要参照。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题在于提供一种积雪草1号提取物的新用途。

2、本发明采用的技术方案是：

3、一种积雪草1号提取物，为异羟基积雪草酸2α,3β,6β,23-四羟基-乌苏烷-20-烯-28-酸，具有(ⅰ)所示结构：

4、

5、上述积雪草1号提取物的制备方法，具体步骤如下：

6、(1)积雪草乙醇溶液加热回流提取，收集提取液；

7、(2)提取液减压浓缩得到粗提物浸膏，以水分散后经大孔树脂柱色谱，得到水层和乙醇层；

8、(3)将得到的95％乙醇层干法上样，经过开放硅胶柱色谱，用二氯甲烷-甲醇/二氯甲烷-甲醇-水进行梯度洗脱，得到组分fr.17；

9、(4)fr.17经mci柱色谱，以甲醇-水梯度洗脱得到组分fr.17.12；

10、(5)fr.17.12经高效液相色谱制备得到积雪草1号提取物。

11、优选的，上述积雪草1号提取物的制备方法，具体步骤如下：

12、(1)积雪草干燥全草打粉后用十倍量体积分数70％乙醇溶液加热回流提取3次，每次3h，合并提取液；

13、(2)提取液减压浓缩得到粗提物浸膏，以水分散后经d101大孔树脂柱色谱，得到水层和95％乙醇层；

14、(3)将得到的95％乙醇层干法上样，经过开放硅胶柱色谱，用二氯甲烷-甲醇/二氯甲烷-甲醇-水(100∶0→20∶1→10∶1→5∶1→10∶3∶1→7∶3∶1→6∶4∶1→0∶100)进行梯度洗脱，共得到40个组分fr.1～fr.40；

15、(4)fr.17经mci柱色谱，以甲醇-水(0∶100→100∶0)梯度洗脱得到20个组分fr.17.1～fr.17.20；

16、(5)fr.17.12经高效液相色谱(75％甲醇-水,tr＝27.5min)制备得到积雪草1号提取物。

17、上述积雪草1号提取物在制备提高hacat细胞活性的产品中的应用。

18、上述积雪草1号提取物在制备抗皮肤光老化及氧化损伤产品中的应用。

19、优选的，上述积雪草1号提取物的应用，所述产品为抗皮肤光老化及氧化损伤药物或化妆品。

20、本发明的有益效果是：

21、上述积雪草1号提取物可显著提高hacat细胞活性，并且对由uvb引起的hacat细胞氧化损伤具有保护作用，可有效对抗皮肤光老化及氧化损伤，为积雪草及其活性成分在抗皮肤衰老领域的研究提供重要依据。

技术特征：

1.一种积雪草1号提取物在制备提高hacat细胞活性的产品中的应用，所述积雪草1号提取物为2α,3β,6β,23-四羟基-乌苏烷-20-烯-28-酸，具有(ⅰ)所示结构：

2.权利要求1所述积雪草1号提取物在制备抗皮肤光老化及氧化损伤产品中的应用。

3.根据权利要求2所述积雪草1号提取物的应用，其特征在于：所述产品为抗皮肤光老化及氧化损伤药物或化妆品。

技术总结
本发明提供了一种积雪草1号提取物的新用途，所述提取物为异羟基积雪草酸2α,3β,6β,23‑四羟基‑乌苏烷‑20‑烯‑28‑酸，可显著提高HaCaT细胞活性，并且对由UVB引起的HaCaT细胞氧化损伤具有保护作用，可有效对抗皮肤光老化，用于制备抗皮肤光老化及氧化损伤的产品，为积雪草及其活性成分在抗皮肤衰老领域的研究提供重要依据。

技术研发人员：张鹏,党逸云,杨文志,杨妙婕,李雪,吴红华,田晓轩,常艳旭,柴欣,崔英,姜苗苗
受保护的技术使用者：天津中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/6/18