一种具有美白活性的白及须根提取物及其应用

(一)本发明涉及一种具有美白活性的白及须根提取物及其应用。

背景技术：

0、(二)背景技术

1、酪氨酸酶是生物体合成黑色素最重要的限速酶，广泛存在于动植物、微生物及人体中，其异常表达可导致雀斑、黄褐斑等色素沉着引起的皮肤问题。而目前已发现的酪氨酸酶抑制剂，由于安全性及稳定性问题，仅很少一部分用于皮肤美白产品。天然来源的酪氨酸酶抑制剂用于皮肤美白，具有资源丰富、应用历史悠久、美白效果温和持久等优势。不断增长的化妆品市场对开发来源于植物的天然、高效、安全的酪氨酸酶抑制剂有着迫切的需求。虽然天然来源的酪氨酸酶抑制剂备受青睐，但由于成分复杂，含量低微，从巨大的天然资源中筛选到安全有效的酪氨酸酶抑制剂仍十分困难。

2、白及来源于兰科植物白及属白及bletilla striata(thunb.)reichb.f.的干燥块茎，具有收敛止血、消肿生肌之功效，临床用于咯血，吐血，外伤出血，疮疡中毒，皮肤皲裂等病症以及肺结核咳血，溃疡病出血等。自古以来，白及被认为美白护肤的圣品，人们常将其干燥块茎研成粉末外敷达到美白的效果。现代化学及药理学研究表明，白及主要化学成分包括联苄类、菲类、黄酮类、多糖等，具有抗菌、抗病毒、抗氧化等药理活性，但对于其美白活性的研究较少。目前主要集中在白及多糖和白及粗提取物上，对于白及中丰富的小分子成分是否具有美白活性，仍缺乏深入研究。

3、根据2020中国药典第一部中对白及的描述，白及在夏秋两季采挖，除去须根，洗净。须根约占根部质量的1/3，但作为非药用部位，在采收加工过程中是被舍弃的，造成很大程度的资源浪费。目前已有研究表明，白及的须根和块茎部分具有相似的成分组成，且须根的总酚含量及酪氨酸酶抑制活性更高，提示白及须根部分极可能具有潜在的美白药用价值。而白及须根中具有美白功效的天然活性成分尚未见报道。

技术实现思路

0、(三)
技术实现要素：

1、针对实际的需求，本发明提供了一种具有美白活性的白及须根提取物及其应用。

2、本发明采用的技术方案是：

3、一种具有美白活性的白及须根提取物，由如下方法制备获得：

4、(1)取白及须根粉末，以甲醇为溶剂，连续回流提取三次；将三次提取液合并，蒸干提取液，残渣干燥得到粗提物；

5、(2)将粗提物进行硅胶柱色谱分离，采用400目柱色谱硅胶装柱，

6、按照样品：拌样硅胶质量比1：1～1.5，采用干法上样，湿法装柱，再以石油醚—乙酸乙酯系统以体积比16：5、7：3、

7、13：7、3：2、1：1、2：3、3：1七个比例进行梯度洗脱，

8、每个梯度馏分收集1000ml，共收集得到27个馏分，分别命名为fr.1～fr.27；对馏分fr.3～fr.27使用硅胶薄层板点样检测，展开剂选择质量比1：1的乙酸乙酯-石油醚；

9、(3)根据不同馏分的薄层色谱图，对具有相似位置斑点的馏分进行合并，分别将fr.3～fr.7，fr.8～fr.11，fr.12～fr.20，

10、fr.21～fr.24，fr.25～fr.26，fr.27～fr.28合并、旋干、称重，

11、得到6个馏分，将其命名为fr.1-1～fr.1-6；

12、(4)将馏分fr.1-4采用高效液相色谱系统进行半制备型液相分离，条件如下：色谱柱h&e-c18色谱柱(5mm，250mm×

13、9.4mm i.d.)，柱温30℃，检测波长为275nm，流速为3

14、ml/min，洗脱梯度如下表所示，得到2个馏分，将其命名为fr.1-4-1，fr.1-4-2；

15、

16、(5)将馏分fr.1-4-2采用高效液相色谱系统进行半制备型液相分离，条件如下：色谱柱h&e-c18色谱柱(5μm，250mm×9.4

17、mm i.d.)，柱温30℃，检测波长为275nm，流速为3ml/min，洗脱梯度如下表所示：

18、

19、收集洗脱产物，干燥，即得所述具有美白活性的白及须根提取物。

20、具体的，所述提取物主要活性成分包括：1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲-2,7-二醇，2,7-二羟基-1-(4-羟苄基)-4-甲氧基菲和1-(4-羟苄基)-4,8-二甲氧基-2,7-菲二醇。

21、本发明从白及须根中首次筛选获得并分离纯化出菲类成分3个，1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲-2,7-二醇，2,7-二羟基-1-(4-羟苄基)-4-甲氧基菲，1-(4-羟苄基)-4,8-二甲氧基-2,7-菲二醇均具有酪氨酸酶抑制活性。其中，1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲-2,7-二醇酪氨酸酶抑制活性最强，体内实验证明其美白活性优异。

22、本发明还涉及白及须根提取物在制备酪氨酸酶活性抑制剂中的应用。

23、具体的，本发明涉及1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9，10-二氢菲-2，7-二醇在制备酪氨酸酶活性抑制剂中的应用。

24、本发明还涉及所述的白及须根提取物在制备美白面霜中的应用。

25、具体的，本发明涉及1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9，10-二氢菲-2，7-二醇在制备美白面霜中的应用。

26、本发明的有益效果主要体现在：本发明从白及须根中分离出1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲-2,7-二醇，首次被证实具有优异的酪氨酸酶抑制活性及明显的美白体内活性，此外，还分离出类似物2,7-二羟基-1-(4-羟苄基)-4-甲氧基菲以及1-(4-羟苄基)-4,8-二甲氧基-2,7-菲二醇，均为首次证实具有酪氨酸酶抑制活性，为白及非药用部位的综合开发利用直接提供了物质基础。

技术特征：

1.一种具有美白活性的白及须根提取物，由如下方法制备获得：

2.如权利要求1所述的白及须根提取物，其特征在于所述提取物主要活性成分包括：1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9,10-二氢菲-2,7-二醇，2,7-二羟基-1-(4-羟苄基)-4-甲氧基菲和1-(4-羟苄基)-4,8-二甲氧基-2,7-菲二醇。

3.权利要求1或2所述的白及须根提取物在制备酪氨酸酶活性抑制剂中的应用。

4.1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9，10-二氢菲-2，7-二醇在制备酪氨酸酶活性抑制剂中的应用。

5.权利要求1或2所述的白及须根提取物在制备美白面霜中的应用。

6.1-(4-羟苄基)-4-甲氧基-9，10-二氢菲-2，7-二醇在制备美白面霜中的应用。

技术总结
本发明涉及一种具有美白活性的白及须根提取物及其应用。本发明从白及须根中首次筛选获得并分离纯化出菲类成分3个，1‑(4‑羟苄基)‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲‑2,7‑二醇，2,7‑二羟基‑1‑(4‑羟苄基)‑4‑甲氧基菲，1‑(4‑羟苄基)‑4,8‑二甲氧基‑2,7‑菲二醇均具有酪氨酸酶抑制活性。其中，1‑(4‑羟苄基)‑4‑甲氧基‑9,10‑二氢菲‑2,7‑二醇酪氨酸酶抑制活性最强，体内实验证明其美白活性优异，为白及非药用部位的综合开发利用直接提供了物质基础。

技术研发人员：楚楚,李家旭,李陈玥,吕洋彬,彭昕,王平
受保护的技术使用者：浙江工业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11