用于治疗特应性皮炎的间充质干细胞的制作方法

发明领域本发明涉及用于治疗犬和猫特应性皮炎的间充质干细胞。

背景技术：

1、狗或猫的特应性皮炎(ad)被定义为“一种具有特征性临床特征的遗传易感炎症和瘙痒性过敏性皮肤病”。它最常见地与免疫球蛋白e(ige)抗体有关，该抗体对常见的环境变应原(如房屋尘螨、草和植物花粉)具有特异性。由于狗最常作为室内宠物饲养，暴露于室内变应原的增加可能导致犬特应性皮炎(cad)的患病率增加，目前估计为10-15％。

2、在ad中，免疫反应会加剧。在急性期，辅助性t细胞2(th2)淋巴细胞占优势，释放促炎细胞因子、嗜酸性粒细胞、肥大细胞脱粒和ige。在慢性期，观察到主要的辅助性t淋巴细胞细胞1(th1)应答和th2应答。通常，患有ad的非人类动物会表现出面部、耳朵、爪子、四肢和/或腹部瘙痒。

3、目前推荐的ad治疗方法是口服全身使用免疫抑制剂，如皮质类固醇、环孢菌素和奥拉替尼(oclacitinib)，与乳液、吸液管和由保湿剂、润肤剂和保湿剂组成的乳膏相结合，以恢复皮肤屏障。例如，口服糖皮质激素，如泼尼松，通常用于治疗ad。然而，使用类固醇可能会有许多副作用，如增加的口渴、排尿、饥饿和体重增加。此外，长期高剂量使用类固醇会导致肝脏肿大和肝酶增加，会导致高血压和肾脏疾病，肌肉和韧带衰弱，皮肤和膀胱感染，皮肤变薄和脱发。由于传统的免疫调节药物疗法(如糖皮质激素)或其他新疗法(如环孢菌素或单克隆抗体)与许多限制其长期使用的副作用有关，因此需要开发更有效和安全的治疗策略。

4、间充质干细胞(msc)是可从多种组织中收集和分离的多能成体干细胞。msc可以降低几种变应性疾病的侵袭性。众所周知，msc与先天免疫系统和适应性免疫系统相互作用，从而导致对免疫细胞的增殖、分化和激活的抑制作用。

5、因此，间充质干细胞(msc)被认为是ad治疗的潜在替代品，因为它们具有免疫调节特性，可以抑制ad的炎症过程，在很短的时间内减缓其进展，甚至导致持续损伤的逆转。几项研究已经调查了它们治疗特应性皮炎的安全性和有效性，并显示出非常有趣的结果。

6、这些研究大多使用来源于脂肪组织或骨髓(bm)的自体msc。然而，在某些情况下，使用同种异体或异种msc是更有利的选择，因为它们提供了健康和高质量干细胞供体的严格选择。它们允许生产现成的产品，避免了从每个患者身上侵入性地采集和耗时地培养msc。由于犬和猫msc的培养能力相对较低，异种(例如人或马)msc可以有利地使用，特别是用于商业应用，例如用于治疗犬和猫的特应性皮炎(ad)。此外，异种msc不含可传播的物种特异性病原体。

7、同样，从骨髓中提取骨髓msc是一种侵入性和高风险的方法。脂肪组织作为msc的来源是一种更安全但仍具有侵袭性的替代方案。

8、在某些情况下，使用天然msc是一个有利的选择，因为它们允许生产即用型产品，只需最少的制造和处理，从而降低生产成本。

9、本领域仍然需要改进msc的使用，以减缓狗和猫家庭中ad的疾病进展和/或甚至逆转ad的病理状况。本发明旨在解决上述缺点中的至少一个。

技术实现思路

1、本发明及其实施方案用于提供对上述缺点中的一个或多个缺点的解决方案。为此，本发明涉及根据权利要求1所述的用于治疗犬科动物和猫科动物特应性皮炎(ad)的间充质干细胞(msc)或包含治疗有效量的msc的药物组合物。在实施方案中，所述msc来源于血液，优选外周血。在实施方案中，所述msc是静脉内施用的。在实施方案中，所述msc是天然msc。在实施方案中，所述msc是异种msc。用于本发明的msc的优选实施方案显示在权利要求2-23中的任一项中。

2、在第二方面，本发明涉及msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其在如权利要求24所述的被诊断有或患有特应性皮炎的犬科动物和猫科动物的ad炎症反应的急性和/或慢性期期间用作免疫调节剂。

3、在最后一个方面，本发明涉及包含外周血来源的msc的药物组合物，所述msc是动物来源的，并且存在于根据权利要求25所述的无菌液体中。

技术特征：

1.间充质干细胞(msc)或包含治疗有效量的msc的药物组合物，用于在犬科动物和猫科动物中治疗特应性皮炎(ad)。

2.根据权利要求1用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc是天然的。

3.根据权利要求1-2任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc是源自血液的，优选地是源自外周血的。

4.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc是同种异体或异种msc，优选地是异种msc。

5.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc是动物来源的，优选地是哺乳动物来源的，更优选地是马来源的。

6.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc是静脉内施用的。

7.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中每只犬科动物或猫科动物施用105-107个msc的剂量。

8.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中施用单剂量。

9.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中施用多个剂量，每个剂量在不同时间点施用。

10.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述组合物的一个剂量具有最大约5ml的体积，优选地所述体积为约1ml。

11.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc对于mhc ii类分子和/或cd45的测量为阴性。

12.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc对于间充质标志物cd29、cd44和cd90的测量为阳性，并且对于mhc ii类分子和cd45的测量为阴性。

13.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc当存在于炎性环境或状况中时分泌免疫调节性前列腺素e2细胞因子。

14.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中当存在于炎性环境或状况中并且与具有相同特征但未经受所述炎性环境或状况的细胞相比时，所述msc具有至少一种选自il-6、il-10、tgf-β、no或其组合的分子的分泌增加；和/或il-1的分泌减少。

15.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中当存在pbmc时，所述msc刺激pge2、il-6、il-10、no或其组合的表达和/或当存在pbmc时，所述msc抑制tnf-α、ifn-γ、il-1、tgf-β、il-13或其组合的分泌。

16.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述msc存在于无菌液体中。

17.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述组合物还包含选自由以下组成的组的组分：富血小板血浆(prp)、透明质酸、基于透明质酸的组合物、葡糖胺聚糖或基于葡糖胺聚糖的组合物或其任何组合。

18.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述治疗是治疗诊断有或患有特应性皮炎的犬科动物和猫科动物中的ad相关的临床和/或组织病理学症状。

19.根据权利要求18用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述临床症状是瘙痒并且其中使用瘙痒视觉模拟量表(pvas)评分方案评估所述瘙痒的严重程度。

20.根据权利要求19用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中在施用所述msc或所述包含msc的药物组合物之前，所述犬科动物或猫科动物的pvas评分为至少1，并且在一次或多次施用所述msc或所述包含msc的药物组合物后，在至少35％的用所述msc或所述包含msc的药物组合物治疗的犬科动物或猫科动物中，所述pvas评分在1个月的时间内相对降低至少20％。

21.根据权利要求18用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述临床症状包括ad相关皮肤损伤，并且其中通过使用皮肤损伤评分方案，例如犬科动物中的犬科动物特应性皮炎范围和严重性指数(cadesi)-04评分方案和猫科动物中的猫科动物过敏性皮炎评分(scorfad)或猫科动物范围和严重程度指数(fedesi)评分方案，计算皮肤损伤评分来评估所述皮肤损伤的严重程度。

22.根据权利要求21用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中患有ad的犬科动物或猫科动物在施用所述msc或所述包含msc的药物组合物之前具有至少10的皮肤损伤评分，并且在一次或多次施用所述msc或所述包含msc的药物组合物后，在1个月的时间内用所述msc或所述包含msc的药物组合物治疗的至少35％的犬科动物或猫科动物中，所述评分相对降低至少25％，更优选地降低至少30％。

23.根据权利要求18用于所述用途的msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其中所述组织病理学症状包括皮肤损伤中具有浸润性t细胞的淋巴细胞性血管周皮炎。

24.msc或包含治疗有效量的msc的药物组合物，其在诊断有或患有特应性皮炎的犬科动物和猫科动物的ad炎症反应的急性和/或慢性期期间用作免疫调节剂。

25.包含外周血来源的msc的药物组合物，所述msc是动物来源的，优选地是哺乳动物来源的，并且以每ml所述组合物105-107个msc之间的浓度存在于无菌液体中，其中一个剂量的所述组合物具有约1ml的体积，其中所述msc对间充质标志物cd29、cd44和cd90的测量为阳性，并且对mhc ii类分子和cd45的测量为阴性，并且其中所述msc具有在10μm和100μm之间的悬浮直径。

技术总结
本发明涉及用于治疗犬科动物和猫科动物的特应性皮炎(AD)的间充质干细胞(MSC)或包含治疗有效量的MSC的药物组合物。在第二方面，本发明涉及MSC或包含治疗有效量的MSC的药物组合物，其在诊断有或患有特应性皮炎的犬科动物和猫科动物的AD炎症反应的急性和/或慢性期期间用作免疫调节剂。在最后一个方面，本发明涉及包含外周血来源的MSC的药物组合物。

技术研发人员：J·斯帕斯,G·保韦林,S·卡利尔,S·布勒克斯
受保护的技术使用者：勃林格殷格翰比利时兽医公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24