一种核酸药物制剂、冻干粉及制备方法与流程

本申请涉及核酸药物，特别是涉及一种核酸药物制剂、冻干粉及制备方法。

背景技术：

1、核酸药物又称核苷酸类药物，是各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(rna)或寡聚脱氧核糖核苷酸(dna)，主要在基因水平上发挥作用，具有特定的靶点和作用机制，特异性针对致病基因。核酸不能直接进入人体，到达作用部位，需要有特殊的传递系统。并且由于核酸是一种不稳定的物质，在制剂方面面临巨大的挑战。同时，目前已上市的核酸药物，例如多款mrna疫苗，均需要在严格低温下保存和运输，这无疑增加了核酸药物保存、运输的难度和成本，显著限制了核酸药物的大规模推广普及。

2、将制剂制成冻干剂型，即冻干粉是提升制剂稳定性最常用的方法之一。然而，将核酸药物制成冻干粉存在诸多技术难题，例如粒径难以控制、复溶后质量重现性差；并且，对于不同传递体系的核酸药物，其冻干粉的质量和复溶效果也不同。

3、因此，如何制备粒径分布均匀、复溶后质量重现性良好的核酸药物冻干粉，仍然是核酸药物技术领域亟待解决的重要问题。

技术实现思路

1、本申请的目的是提供一种改进的核酸药物制剂、冻干粉及制备方法。

2、为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：

3、本申请的第一方面公开了一种核酸药物制剂，其由阳离子核酸传递聚合物在海藻糖溶液中自组装并封装核酸，形成核酸药物纳米颗粒，从而形成包含核酸药物纳米颗粒和海藻糖溶液的核酸药物制剂。

4、需要说明的是，本申请的核酸药物制剂，创造性的在海藻糖溶液中进行阳离子核酸传递聚合物的自组装和核酸封装，不仅能够获得包封率好、粒径分布均匀的核酸药物纳米颗粒；而且，由该制剂直接冻干处理获得的核酸药物冻干粉，同样具有均匀分布的粒径，且复溶后质量重现性良好。更为重要的是，由本申请的核酸药物制剂冻干获得的核酸药物冻干粉，能够在4℃、-20℃、-80℃下都长期稳定存放；本申请的一种实现方式中，核酸药物冻干粉在4℃下放置5个月，复溶后的粒径、zeta电位、粒径分布指数(pdi)和包封率都具有良好的稳定性。采用本申请的核酸药物制剂冻干获得核酸药物冻干粉，在常规的冷链运输下即可满足长期稳定保存需求，降低了核酸药物保存、运输的难度和成本，为核酸药物的大规模推广应用奠定了基础。

5、本申请的一种实现方式中，海藻糖溶液为海藻糖的水溶液，其浓度为1％-10％。

6、优选的，海藻糖水溶液的浓度为10％。

7、需要说明的是，本申请的关键之一在于采用海藻糖溶液进行阳离子核酸传递聚合物的自组装和核酸封装；可以理解，只要其中含有海藻糖即能不同程度的实现本申请的技术效果。但是，为了确保核酸药物冻干粉的质量，本申请优选采用浓度为1％-10％的海藻糖溶液。

8、本申请的一种实现方式中，阳离子核酸传递聚合物为聚乙烯亚胺。

9、优选的，阳离子核酸传递聚合物为线性聚乙烯亚胺。

10、优选的，线性聚乙烯亚胺的分子量为10000-70000道尔顿，优选为48050道尔顿。

11、本申请的一种实现方式中，核酸为rna。

12、优选的，rna的碱基数为30-544。

13、需要说明的是，rna只是本申请的一种实现方式中具体采用的核酸类型，相对而言，稳定性更好的dna必然也能够适用于本申请。并且，例如本申请的一种实现方式中具体采用聚乙烯亚胺作为核酸传递聚合物，聚乙烯亚胺本身也能够对dna进行核酸递送。因此，本申请的核酸不仅限于各种rna，也能够适用于各种类型的dna。

14、本申请的一种实现方式中，核酸药物纳米颗粒的粒径为95-195nm。

15、优选的，核酸药物制剂的zeta电位为34-46mv。

16、优选的，阳离子核酸传递聚合物和核酸的质量比为1-2.5:1.5-3，优选为1.5:2。

17、本申请的第二方面公开了一种核酸药物冻干粉，其由本申请的核酸药物制剂冻干而成。

18、需要说明的是，本申请的核酸药物冻干粉包封率好、粒径分布均匀，复溶后质量重现性良好，能够分别在4℃、-20℃、-80℃下都长期稳定存放。本申请的一种实现方式中，核酸药物冻干粉在4℃下放置5个月，复溶后的粒径、zeta电位、粒径分布指数(pdi)和包封率都具有良好的稳定性。本申请的核酸药物冻干粉，在常规的冷链运输下即可满足长期稳定保存需求，降低了核酸药物保存、运输的难度和成本，为核酸药物的大规模推广应用奠定了基础。

19、本申请的第三方面公开了本申请的核酸药物冻干粉的制备方法，包括将阳离子核酸传递聚合物溶于海藻糖溶液中，制成溶液a；将核酸溶于海藻糖溶液中，制成溶液b；将溶液a和溶液b混合均匀，获得核酸药物制剂；对核酸药物制剂进行冻干处理，即获得本申请的核酸药物冻干粉。

20、需要说明的是，本申请分别将阳离子核酸传递聚合物和核酸溶于海藻糖溶液，两者在海藻糖溶液中均匀分散后，再于液相中混合，这样能够确保阳离子核酸传递聚合物和核酸接触的均匀性；两者均匀混合后，利用阳离子核酸传递聚合物的正电基团，与负电性的核酸通过静电相互作用进行自组装和核酸封装。

21、本申请的一种实现方式中，溶液a的ph为3.5-4，优选为3.6。

22、本申请的一种实现方式中，将溶液a和溶液b混合均匀，具体包括，将溶液a等量分装于两个注射器中，将溶液b等量分装于另外两个注射器中，将分装溶液a的两个注射器分别连接混合器的1、3管路，将分装溶液b的两个注射器分别连接混合器的2、4管路，设置总流速，启动混合器的注射泵对溶液a和溶液b进行混合，即获得核酸药物制剂。

23、本申请的一种实现方式中，总流速为40-80ml/min，优选为80ml/min。

24、本申请的一种实现方式中，冻干处理的压力为0.001-0.200mbar，优选为0.1mbar。

25、由于采用以上技术方案，本申请的有益效果在于：

26、本申请的核酸药物制剂及其制备的核酸药物冻干粉，封率好、粒径分布均匀，核酸药物冻干粉复溶后质量重现性良好，能够在4℃下长期稳定存放，可以通过常规的冷链运输进行长时间的长途运输和保存，降低了核酸药物保存、运输的难度和成本，为核酸药物的大规模推广应用奠定了基础。

技术特征：

1.一种核酸药物制剂，其特征在于：由阳离子核酸传递聚合物在海藻糖溶液中自组装并封装核酸，形成核酸药物纳米颗粒，从而形成包含核酸药物纳米颗粒和海藻糖溶液的核酸药物制剂。

2.根据权利要求1所述的核酸药物制剂，其特征在于：所述海藻糖溶液为海藻糖的水溶液，其浓度为1％-10％；

3.根据权利要求1或2所述的核酸药物制剂，其特征在于：所述阳离子核酸传递聚合物为聚乙烯亚胺；

4.根据权利要求1或2所述的核酸药物制剂，其特征在于：所述核酸为rna；

5.根据权利要求1或2所述的核酸药物制剂，其特征在于：所述核酸药物纳米颗粒的粒径为95-195nm；

6.一种核酸药物冻干粉，其特征在于：由权利要求1-5任一项所述的核酸药物制剂冻干而成。

7.权利要求6所述的核酸药物冻干粉的制备方法，其特征在于：包括将阳离子核酸传递聚合物溶于海藻糖溶液中，制成溶液a；将核酸溶于海藻糖溶液中，制成溶液b；将溶液a和溶液b混合均匀，获得所述核酸药物制剂；对所述核酸药物制剂进行冻干处理，即获得所述核酸药物冻干粉。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述溶液a的ph为3.5-4，优选为3.6。

9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其特征在于：所述将溶液a和溶液b混合均匀，具体包括，将溶液a等量分装于两个注射器中，将溶液b等量分装于另外两个注射器中，将分装溶液a的两个注射器分别连接混合器的1、3管路，将分装溶液b的两个注射器分别连接混合器的2、4管路，设置总流速，启动混合器的注射泵对溶液a和溶液b进行混合，即获得所述核酸药物制剂。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于：所述总流速为40-80ml/min，优选为80ml/min。

技术总结
本申请公开了一种核酸药物制剂、冻干粉及制备方法。本申请的核酸药物制剂，其由阳离子核酸传递聚合物在海藻糖溶液中自组装并封装核酸，形成核酸药物纳米颗粒，从而形成包含核酸药物纳米颗粒和海藻糖溶液的核酸药物制剂。进一步的，对核酸药物制剂进行冻干处理即获得核酸药物冻干粉。本申请的核酸药物制剂及其制备的核酸药物冻干粉，封率好、粒径分布均匀，核酸药物冻干粉复溶后质量重现性良好，能够在4℃下长期稳定存放，可以通过常规的冷链运输进行长时间的长途运输和保存，降低了核酸药物保存、运输的难度和成本，为核酸药物的大规模推广应用奠定了基础。

技术研发人员：宋庆乐,田媛媛,陈少华,姜孝明
受保护的技术使用者：深圳市乐土生物医药有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12