一种乙型脑炎减毒活疫苗及其保护剂的制作方法

本发明属于疫苗制备，具体涉及一种乙型脑炎减毒活疫苗及其保护剂。

背景技术：

1、流行性乙型脑炎，简称“乙脑”，是乙型脑炎病毒引起的以中枢神经系统损害为主的急性传染病，经蚊虫传播，流行于夏季、秋季，且以亚洲分布较多。乙脑临床以高热、意识障碍、惊厥、脑膜刺激为特征，重症可留下不同程度的神经系统后遗症，影响患者生活质量，且目前尚无针对病原的特效治疗。不过，尽管人群普遍易感乙脑，但感染后发病率不高，且感染后具有持久免疫力，这就使得对乙脑的预防性疫苗注射显得尤为重要。目前，我国已有乙型脑炎减毒疫苗和冻干乙型脑炎灭活疫苗(vero细胞)上市及临床应用，大大降低了乙脑的发病率。

2、乙型脑炎减毒活疫苗是一种冻干产品，冻干时所用的保护剂是影响疫苗稳定性和效力的关键一环，保护剂可以改变生物样品冷冻干燥时的物理化学环境，减轻或防止冷冻干燥或复水对病毒的损害，尽可能保持原有的各种生理生化特性和生物活性(保护病毒滴度)。因此，为了保证乙型脑炎减毒活疫苗稳定性和效力，提供安全有效的保护剂非常重要。

3、研究人员对乙型脑炎减毒活疫苗的冻干保护剂组成进行了探索，目前已有相关的一些报道，例如，公告号为cn102921002b的中国专利公开了一种乙型脑炎减毒活疫苗的冻干保护剂，配方为：蔗糖6g、海藻糖3g、右旋糖苷9g，加入earl’s液至100ml；然而，添加该冻干保护剂制备的冻干疫苗产品在贮存过程中病毒滴度下降较快，贮存稳定性仍有待进一步加强。又如，公告号为cn103301452b的中国专利公开了一种猪乙型脑炎冻干疫苗，包括如下保护剂组成：2.5～3.5％ nz-胺、0.2～0.4％谷氨酸单钾盐、15～25％蔗糖、1.5～2.5％水解乳蛋白、4～6％明胶和水。该疫苗冻干前后病毒含量损失不超过0.2个滴度，且贮存稳定性较好，但其溶解性表现并不明确。

4、使用恰当的冻干保护剂，在确保冻干效果的同时，降低在冻干和贮存过程中病毒滴度的损耗，并且使得冻干制剂溶解度表现优异，复溶速度快，便于乙型脑炎减毒活疫苗的贮存和使用，具有重要的意义。因此，新型乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂还有待进一步研究探索。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种乙型脑炎减毒活疫苗及其保护剂。

2、本发明提供了一种乙型脑炎减毒活疫苗保护剂，包括如下各重量份数的组分：

3、蔗糖：3～5份，

4、乳糖：3～5份，

5、明胶：0.5～1份，

6、尿素：0.2～0.5份，

7、人血白蛋白：0.1～0.5份。

8、进一步地，上述的保护剂包括如下各重量份数的组分：

9、蔗糖：3.5份，

10、乳糖：3.5份，

11、明胶：0.8份，

12、尿素：0.4份，

13、人血白蛋白：0.15份。

14、更进一步地，上述组分还包括ph调节剂。

15、更进一步地，上述ph调节剂为无机碱或无机酸，优选为碳酸氢钠或盐酸。

16、更进一步地，上述组分的水溶液的ph值为6.5～7.0。

17、本发明还提供了上述的保护剂在制备乙型脑炎减毒活疫苗中的应用。

18、本发明还提供了一种乙型脑炎减毒活疫苗，它是将乙型脑炎病毒和上述的保护剂混合后，冷冻干燥制备而成。

19、本发明还提供了上述的乙型脑炎减毒活疫苗的制备方法，包括如下步骤：

20、(1)病毒原液与上述的保护剂混合，除菌过滤得半成品；

21、(2)半成品冷冻干燥，即得。

22、进一步地，上述病毒原液是sa14-14-2乙型脑炎病毒减毒株接种地鼠幼鼠中取肾培养原代细胞后培养收获的病毒液。

23、进一步地，上述冷冻干燥的程序是：

24、先于-50±5℃预冻3～5小时，然后于-20±5℃干燥14～18小时，再于-35±5℃干燥11～15小时。

25、本发明的有益效果：本发明公开的特定组成和特定比例的乙型脑炎减毒活疫苗保护剂，能够有效保护乙型脑炎减毒病毒的毒力，在冻干过程中减少滴度损耗，并且确保优异的冻干效果，制得的乙型脑炎减毒活疫苗冻干制剂能够长期存放，稳定性优异。

26、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

27、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

技术特征：

1.一种乙型脑炎减毒活疫苗保护剂，其特征在于，包括如下各重量份数的组分：

2.如权利要求1所述的保护剂，其特征在于，包括如下各重量份数的组分：

3.如权利要求1或2所述的保护剂，其特征在于，所述组分还包括ph调节剂。

4.如权利要求3所述的保护剂，其特征在于，所述ph调节剂为无机碱或无机酸，优选为碳酸氢钠或盐酸。

5.如权利要求1、2或4所述的保护剂，其特征在于，所述组分的水溶液的ph值为6.5～7.0。

6.权利要求1～5任一项所述的保护剂在制备乙型脑炎减毒活疫苗中的应用。

7.一种乙型脑炎减毒活疫苗，其特征在于，它是将乙型脑炎病毒和权利要求1～5任一项所述的保护剂混合后，冷冻干燥制备而成。

8.权利要求7所述的乙型脑炎减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述病毒原液是sa14-14-2乙型脑炎病毒减毒株接种地鼠幼鼠中取肾培养原代细胞后培养收获的病毒液。

10.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥的程序是：

技术总结
本发明提供了一种乙型脑炎减毒活疫苗保护剂，包括如下各重量份数的组分：蔗糖：3～5份，乳糖：3～5份，明胶：0.5～1份，尿素：0.2～0.5份，人血白蛋白：0.1～0.5份。本发明保护剂能够有效保护乙型脑炎减毒病毒的毒力，在冻干过程中减少滴度损耗，并且确保优异的冻干效果，制得的乙型脑炎减毒活疫苗冻干制剂能够长期存放，稳定性优异。

技术研发人员：刘少祥,张选勇,周卫
受保护的技术使用者：成都生物制品研究所有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11