一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的方法与流程

本发明属于药物，具体涉及一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的方法。

背景技术：

1、tnbc是乳腺癌的一个重要亚型，缺乏雌激素受体（er）、孕激素受体（pr）和人类表皮生长因子受体2（her2）的表达，约占乳腺癌发病的10~20%，具有复发率、转移率高，预后差等特点，治疗方法相对缺乏。化疗是治疗tnbc的主要方法，在改善患者的症状、延缓疾病进展方面有着主要作用。但化疗药物大多为细胞毒类药物，在杀伤肿瘤细胞的同时，可对患者的多个系统有着严重的损害作用。并且，随着化疗时间的延长，肿瘤细胞对化疗药物可逐渐产生耐药性，其有效性和安全性仍是制约临床疗效的一大障碍。因此，探索新型的、相对安全有效的抗肿瘤药物仍是tnbc治疗的亟待解决的问题。

2、细胞自噬是一种保守的自我降解系统，对于在压力条件下维持细胞稳态至关重要。在恶性肿瘤中，自噬通过抑制肿瘤起始但支持肿瘤进展发挥着双重作用。自噬与wnt/β-catenin信号通路之间的交互作用已经得到了研究的证实。β-catenin包含一个lc3相互作用区（w/yxxi/l基序），它可作为lc3结合选择性自噬降解的直接靶标。因此，当自噬被激活时，wnt信号依赖的基因表达会通过β-catenin的自噬降解而减少。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种提高lc3 i和lc3 ii表达的诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的方法。

2、本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

3、雷公藤内酯酮和/或精氨酸衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途，所述精氨酸衍生物由精氨酸与环氧氯丙烷、4-氨基-2-羟基喹唑啉反应而成。本发明研究中发现，雷公藤内酯酮的使用可以提高 lc3 i/ii的表达，从而提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，在雷公藤内酯酮的存在下，再加入精氨酸衍生物、维生素e琥珀酸酯中至少1种后，可以提高 lc3i/ii的表达，从而提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，聚氧乙烯脂肪酸酯与雷公藤内酯酮复配使用时，对三阴性乳腺癌细胞中lc3 i/ii的表达的影响有限，而在聚氧乙烯脂肪酸酯与雷公藤内酯酮存在时，加入精氨酸衍生物、维生素e琥珀酸酯中至少1种后，三阴性乳腺癌细胞中lc3 i/ii的表达提高，提高了三阴性乳腺癌细胞自噬的效果。

4、一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的组合物，包括：组合物包括雷公藤内酯酮。

5、优选地，组合物还包括精氨酸衍生物，所述精氨酸衍生物由精氨酸与环氧氯丙烷、4-氨基-2-羟基喹唑啉反应而成。

6、优选地，精氨酸衍生物的制备中，将精氨酸加入蒸馏水中，在20-40℃下搅拌溶解得到精氨酸溶液，调节ph至9-10，然后加入环氧氯丙烷，然后在40-80℃下搅拌处理2-6h，丙酮脱水重结晶，无水乙醇洗涤，干燥得到精氨酸衍生中间体，然后将精氨酸衍生中间体加入蒸馏水中搅拌得到精氨酸衍生中间体溶液，将其加入4-氨基-2-羟基喹唑啉溶液中，调节ph至11-13，在40-80℃下反应2-8h，反应完成后，丙酮脱水重结晶，无水乙醇洗涤，干燥，得到精氨酸衍生物。

7、更优选地，精氨酸衍生物的制备中，精氨酸溶液中精氨酸的量为蒸馏水的2-6wt%。

8、更优选地，精氨酸衍生物的制备中，环氧氯丙烷的使用量为精氨酸的1-3wt%。

9、更优选地，精氨酸衍生物的制备中，精氨酸衍生中间体溶液中精氨酸衍生中间体的量为蒸馏水的2-5wt%。

10、更优选地，精氨酸衍生物的制备中，4-氨基-2-羟基喹唑啉溶液由4-氨基-2-羟基喹唑啉加入蒸馏水中制成，4-氨基-2-羟基喹唑啉溶液中4-氨基-2-羟基喹唑啉的量为蒸馏水的2-8wt%。

11、更优选地，精氨酸衍生物的制备中，精氨酸衍生中间体溶液与4-氨基-2-羟基喹唑啉溶液混合时，以其各溶液中使用的精氨酸衍生中间体与4-氨基-2-羟基喹唑啉的量为计量，4-氨基-2-羟基喹唑啉的使用量为精氨酸衍生中间体的50-70wt%。

12、优选地，组合物还包括聚氧乙烯脂肪酸酯。

13、优选地，组合物还包括维生素e琥珀酸酯。

14、一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬模型的构建方法，包括：在三阴性乳腺癌细胞的培养基中加入上述的药物。

15、优选地，药物的使用量为20-160nm。

16、优选地，三阴性乳腺癌细胞包括mda-mb-231和mda-mb-453。

17、本发明公开了雷公藤内酯酮和维生素e琥珀酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。

18、本发明公开了雷公藤内酯酮和/或精氨酸衍生物和维生素e琥珀酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。

19、本发明由于采用了雷公藤内酯酮应用于三阴性乳腺癌细胞的培养中，可以诱导三阴性乳腺癌细胞自噬，还可以在使用了雷公藤内酯酮后，再加入精氨酸衍生物和维生素e琥珀酸酯中至少1种进行复配，可以提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，聚氧乙烯脂肪酸酯与雷公藤内酯酮的复配无法提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，而在雷公藤内酯酮和聚氧乙烯脂肪酸酯共同存在时，再加入精氨酸衍生物和维生素e琥珀酸酯中至少1种，可以提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，因而具有如下有益效果：提高lc3 i的表达量，提高lc3 ii的表达量。因此，本发明是一种提高lc3 i和lc3 ii表达的诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的方法。

技术特征：

1.雷公藤内酯酮和/或精氨酸衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途，所述精氨酸衍生物由精氨酸与环氧氯丙烷、4-氨基-2-羟基喹唑啉反应而成。

2.一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的组合物，包括：雷公藤内酯酮。

3.根据权利要求1所述的一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的组合物，其特征是：所述组合物还包括精氨酸衍生物，所述精氨酸衍生物由精氨酸与环氧氯丙烷、4-氨基-2-羟基喹唑啉反应而成。

4.根据权利要求1所述的一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的组合物，其特征是：所述组合物还包括聚氧乙烯脂肪酸酯。

5.根据权利要求1所述的一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的组合物，其特征是：所述组合物还包括维生素e琥珀酸酯。

6.一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬模型的构建方法，包括：在三阴性乳腺癌细胞的培养基中加入权利要求2-5中任一所述的药物。

7.根据权利要求6所述的一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬模型的构建方法，其特征是：所述药物的使用量为20-160nm。

8.根据权利要求6所述的一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬模型的构建方法，其特征是：所述三阴性乳腺癌细胞包括mda-mb-231和/或mda-mb-453。

9.雷公藤内酯酮和维生素e琥珀酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。

10.雷公藤内酯酮和/或精氨酸衍生物和维生素e琥珀酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。

技术总结
本发明公开了一种诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的方法，属于药物技术领域，具体涉及雷公藤内酯酮应用于三阴性乳腺癌细胞的培养中，可以诱导三阴性乳腺癌细胞自噬，还可以在使用了雷公藤内酯酮后，再加入精氨酸衍生物和维生素E琥珀酸酯中至少1种进行复配，可以提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，聚氧乙烯脂肪酸酯与雷公藤内酯酮的复配无法提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果，而在雷公藤内酯酮和聚氧乙烯脂肪酸酯共同存在时，再加入精氨酸衍生物和维生素E琥珀酸酯中至少1种，可以提高诱导三阴性乳腺癌细胞自噬的效果。

技术研发人员：郭秋生,吕仙梅,刘飞
受保护的技术使用者：金华市中心医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15