一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液及其制备方法与流程

本发明属于生物，具体地，本发明涉及一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液及其制备方法。

背景技术：

1、角膜是一种无血管的透明组织，由上皮层、基质层和内皮层组成。角膜损伤的诱因有化学、机械、激光等，其病理机制除了直接损伤作用外，免疫系统的参与也起着非常重要的作用，免疫炎性细胞和免疫分子相互作用，形成复杂的免疫炎症网络，介导角膜损伤的病理变化。近年来由于角膜外伤的增多，加之广谱抗生素、皮质类固醇在临床上的广泛应用及角膜接触镜的使用增多，导致角膜炎的发病率也呈逐年上升趋势。目前常见的治疗方法为使用抗生素类滴眼液，包括氯霉素滴眼液、红霉素滴眼液及以左氧氟沙星为代表的第4代喹诺酮类滴眼，例如cn112022801a、cn107998399a、cn106902079a和cn104147592a，但是滥用抗生素滴眼液的后果非常严重，首先使病原菌耐药性增加，临床疗效降低，造成疾病久治不愈，其次是抗生素本身及其辅助成分一定程度上会影响眼睛的正常生理环境，干扰角膜上皮的正常代谢，甚至加重原有的病情，不能长期使用。因此，需要开发一种生物安全性高、功效优异、使用方便的滴眼液变得尤为重要。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种配伍合理，使用方便，安全有效，可有效促进修复角膜损伤，清除眼部自由基，改善眼睛疲劳、红肿、炎症等症状的滴眼液，并提供其制备方法。

2、为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

3、本发明一方面提供了一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，所述滴眼液由如下原料组成：超氧化物歧化酶sod、重组人iii型胶原蛋白、透明质酸钠、渗透压调节剂、ph调节剂和注射水，所述重组人iii型胶原蛋白的质量百分数为0.001％～0.5％，所述超氧化物歧化酶sod与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.5～1:50，所述透明质酸钠与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.5～1:20。

4、作为本发明的一些优选实施方案，所述重组人iii型胶原蛋白的质量百分数为0.01％～0.2％，所述超氧化物歧化酶sod与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.2～1:2，所述透明质酸钠与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:1～1:5。

5、作为本发明的一些优选实施方案，所述滴眼液的ph值为6.5～8.0。

6、作为本发明的一些优选实施方案，所述滴眼液的渗透压为260～340m0sm/l。

7、作为本发明的一些优选实施方案，所述ph值为6.8～7.6，ph调节剂选自磷酸盐缓冲液和/或硼酸缓冲液调节；所述滴眼液的渗透压为280～300mosm/l，渗透压调节剂选自氯化钠和/或氯化钾调节。

8、作为本发明的一些优选实施方案，所述超氧化物歧化酶sod是重组人cu、zn-sod，酶比活力为20000u/mg～30000u/mg。

9、作为本发明的一些优选实施方案，所述重组人iii型胶原蛋白的分子量范围为25kda～90kda。

10、作为本发明的一些优选实施方案，所述透明质酸钠的平均分子量为70万～140万道尔顿。

11、作为本发明的一些优选实施方案，所述滴眼液为局部用产品，采用无菌日抛形式包装。

12、本发明另一方面，提供了上述用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液的制备方法，其包括如下步骤：

13、s1：先称取配方量的渗透压调节剂和ph调节剂，加入40～60％终体积的注射水中，搅拌使完全溶解，滤膜过滤除菌，收集滤液；

14、s2：称取配方量的透明质酸钠加入步骤s1所获得的滤液中，室温搅拌，直至透明质酸钠完全溶解；

15、s3：称取配方量的超氧化物歧化酶sod和重组人iii型胶原蛋白，滤膜过滤除菌，加入到s2所获得的溶液中，补足余量注射水，搅拌均匀；

16、s4：测定ph和渗透压合格后，于无菌环境下滤膜过滤除菌，灌装封口。

17、作为本发明的一些优选实施方案，所述滤膜为0.22μm的滤膜。

18、在本发明中，超氧化物歧化酶sod是生物体内存在的一种抗氧化金属酶，以其特殊的生物理化性质及作用受到广泛关注，是清除自由基十分理想的物质。sod以酶的方式作用于人体，具有反应快，作用效果明显，且副作用小等优点。sod对眼睛中的胶原结构具有保护作用，眼部胶原结构为眼睛提供张力强度和结构性密合度，并由此来维持眼睛结构的完整性。sod易于和胶原蛋白结合，在自由基给胶原蛋白造成损伤前把它清除掉，还可修复被自由基损坏掉的胶原蛋白，从根本上预防了眼部疾病的发生。本研究发现，与一定比例的重组人iii型胶原蛋白和透明质酸钠配伍，可以有效维持超氧化物歧化酶的比活力。

19、重组人iii型胶原蛋白具有较强的生物活性及生物功能，能参与细胞的迁移、分化和增殖，已被广泛用在烧伤、创伤、眼角膜疾病、美容、组织修复、创面止血等医药卫生领域。另外本发明添加透明质酸钠，是唯一不发生硫酸化的氨基聚糖，作为机体结缔组织细胞外基质成分之一，广泛存在于人体内，在眼玻璃体、房水、皮肤、关节滑液、脐带等处均有分布，但是因为其容易变性，往往需要加入保护剂或稳定剂。在研究中发现，通过调整超氧化物歧化酶和透明质酸钠的配比，与之复配可以有效提高稳定性，降低变性的发生率。

20、透明质酸钠高度亲水，可形成水膜覆盖于眼表面上，与蛋白类分子结合，通过调节细胞外基质活性促进角膜上皮细胞的连接和伸展。经试验发现，分子量为70～140万道尔顿的透明质酸钠有助于复配体系的稳定性，小分子量的透明质酸钠与重组人iii型胶原蛋白复配会出现析出，分子量太大又不易被吸收。本研究优选分子量为50～140万道尔顿透明质酸钠，能渗入真皮，在体内发挥保水、维持细胞外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的重要生理功能。另外，透明质酸钠具有轻微扩张毛细血管，增加血液循环、改善中间代谢、促进皮肤营养吸收的作用。本研究中，一定比例的透明质酸钠可以更有效的维持重组人iii型胶原蛋白和超氧化物歧化酶sod的稳定性。

21、采用上述技术方案所产生的有益效果在于：

22、本发明所提供的用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，功效成分为超氧化物歧化酶、重组人iii型胶原蛋白、透明质酸钠，配伍更加稳定，三者协同增效，通过调节细胞外基质生物功能，修复角膜细胞通信功能，有效促进细胞增殖粘附和角膜损伤创面的修复，同时清除眼部自由基、稳定泪腺缓解眼干，明显改善眼睛疲劳、红肿、炎症等症状。

23、本发明所提供的用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，重组人iii型胶原蛋白与超氧化物歧化酶和透明质酸钠配伍，经验证，重组人iii型胶原蛋白在溶液中的稳定性明显提高，三者生物相容性良好。

24、本发明提供的处方配伍稳定，采用无菌日抛形式包装，不含防腐剂等刺激成分，使用方便、安全有效。本发明克服了传统滴眼液中添加防腐剂的弊端，使用过程中有效避免了对正常人眼角膜浅表性刺激或损伤。

技术特征：

1.一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述滴眼液由如下原料组成：超氧化物歧化酶sod、重组人iii型胶原蛋白、透明质酸钠、渗透压调节剂、ph调节剂和注射水，所述重组人iii型胶原蛋白的质量百分数为0.001%~0.5%，所述超氧化物歧化酶sod与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.5~1:50，所述透明质酸钠与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.5~1:20。

2.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述重组人iii型胶原蛋白的质量百分数为0.01%~0.2%，所述超氧化物歧化酶sod与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:0.2~1:2，所述透明质酸钠与重组人iii型胶原蛋白组成比例为1:1~1:5。

3.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述滴眼液的ph值为6.5~8.0；所述滴眼液的渗透压为260~340m0sm/l。

4.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述ph值为6.8~7.6；ph调节剂选自磷酸盐缓冲液和/或硼酸缓冲液调节；所述滴眼液的渗透压为280~300mosm/l，渗透压调节剂选自氯化钠和/或氯化钾调节。

5.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述超氧化物歧化酶sod是重组人cu、zn-sod，酶比活力为20000u/mg~30000u/mg。

6.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述重组人iii型胶原蛋白的分子量范围为25kda~90kda。

7.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述透明质酸钠的平均分子量为50万~140万道尔顿。

8.根据权利要求1所述的一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液，其特征在于，所述滴眼液为局部用产品，采用无菌日抛形式包装。

9.一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述滤膜为0.22μm的滤膜。

技术总结
本发明涉及一种用于角膜损伤修复的日抛型滴眼液及其制备方法，所述滴眼液由如下原料组成：超氧化物歧化酶SOD、重组人III型胶原蛋白、透明质酸钠、渗透压调节剂、pH调节剂和注射水，所述重组人III型胶原蛋白的质量百分数为0.001%~0.5%，所述超氧化物歧化酶SOD与重组人III型胶原蛋白组成比例为1:0.5~1:50，所述透明质酸钠与重组人III型胶原蛋白组成比例为1:0.5~1:20。其具有促细胞粘附增殖、修复角膜损伤的功效，同时清除眼部自由基、稳定泪腺缓解眼干，明显改善眼睛疲劳、红肿、炎症等症状，制备工艺简单、不含防腐剂等刺激成分，采用无菌日抛形式包装，使用方便、安全有效。

技术研发人员：徐兰举,刘鑫,齐磊,李华,于月欣,杨利霞
受保护的技术使用者：河北纳科生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15