用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物及其制备方法与流程

本申请属于医用材料，具体涉及一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物及其制备方法。

背景技术：

1、关节软骨，缺乏血管、神经及淋巴管组织，一旦受到损伤很难实现自我修复，严重的会导致骨关节炎。随着社会全民健身锻炼的普及，关节软骨损伤的病人越来越多，年龄趋向于年轻化。

2、相关技术中，关节软骨损伤主要采用手术治疗，包括关节清创术、微骨折术、自体骨膜移植、自体骨软骨移植和自体软骨细胞移植等。手术治疗为患者带来了诸多不便，亟需一种新的手段或用品对损失的软骨进行修复。

技术实现思路

1、鉴于此，本申请提供一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物及其制备方法，旨在提供一种组合物，可以有效调控关节腔微环境并促进关节软骨修复。

2、第一方面，本申请实施例提供了一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物，包括：

3、微孔支架，包括脱细胞软骨外基质和交联的有机聚合物；

4、凋亡小体，所述凋亡小体存在于所述微孔支架；

5、其中，基于体积3.14mm3的所述微孔支架，包含0.01-0.02ug的凋亡小体。

6、根据本申请的一方面的实施例，基于所述微孔支架的总重，包含95-99％的脱细胞软骨外基质和1-5％的交联的有机聚合物。

7、根据本申请的一方面的实施例，交联的有机聚合物的原料包括碳二亚胺和n-羟基磺酰亚胺。

8、根据本申请的一方面的实施例，脱细胞软骨外基质构成多孔的支撑件，所述交联的有机聚合物分布于支撑件表面和至少部分孔隙中。

9、根据本申请的一方面的实施例，基于体积3.14mm3的所述微孔支架，包含104-107个的凋亡小体。

10、根据本申请的一方面的实施例，组合物满足下列条件中至少一项：

11、所述凋亡小体来源于人脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或其组合；

12、所述凋亡小体的粒径为200-4800nm；

13、所述脱细胞软骨外基质来源于猪、牛、马或其组合。

14、第二方面，本申请实施例提供了一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物的制备方法，包括：

15、分别提供脱细胞软骨外基质溶液和凋亡小体溶液；

16、将所述脱细胞软骨外基质溶液进行冷冻干燥，得到微孔固相基体；

17、将所述微孔固相基体与有机聚合物溶液混合，在加热的条件下进行交联，得到包含经交联的有机聚合物的微孔支架；

18、将所述凋亡小体溶液分散于所述微孔支架的至少部分微孔，得到第一方面的组合物。

19、根据本申请的一方面的实施例，

20、凋亡小体溶液的浓度为0.8-1.2μg/ml，可选为1μg/ml。

21、根据本申请的一方面的实施例，

22、得到包含经交联的有机聚合物的微孔支架之后，还包括：用缓冲液冲洗经交联的所述微孔支架并进行灭菌。

23、根据本申请的一方面的实施例，

24、凋亡小体溶液包括缓冲液，所述缓冲液选自包含第二溶质，所述第二溶质选自磷酸盐、氯化钠或其组合。

25、与现有技术相比，本申请至少具有以下有益效果：

26、本申请提供的用于修复软骨损伤的组合物，利用脱细胞软骨外基质和缓冲液制备出具有微孔的支架结构，交联后的微孔支架强度更适宜使用，凋亡小体与微孔支架相互配合，一方面可以提高凋亡小体活性，延长凋亡小体的作用时间，达到缓释的效果，另一方面，两者相互搭配可以调控关节腔微环境，有效促进关节软骨修复，提高了损失软骨的修复效果，避免了传统外源性细胞移植所带来的安全隐患。本申请的制备方法工艺简单，可操作性强，适宜批量生产。

技术特征：

1.一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物，包括：

2.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，基于所述微孔支架的总重，包含95-99％的脱细胞软骨外基质和1-5％的交联的有机聚合物。

3.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述交联的有机聚合物的原料包括碳二亚胺和n-羟基磺酰亚胺。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的组合物，其特征在于，所述脱细胞软骨外基质构成多孔的支撑件，所述交联的有机聚合物分布于支撑件表面和至少部分孔隙中。

5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，

6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物满足下列条件中至少一项：

7.一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物的制备方法，包括：

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述凋亡小体溶液的浓度为0.8-1.2μg/ml，可选为1μg/ml。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述得到包含经交联的有机聚合物的微孔支架之后，还包括：用缓冲液冲洗经交联的所述微孔支架并进行灭菌。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述凋亡小体溶液包括缓冲液，所述缓冲液选自包含第二溶质，所述第二溶质选自磷酸盐、氯化钠或其组合。

技术总结
本申请公开了一种用于修复软骨的脱细胞软骨基质支架和凋亡小体组合物及其制备方法，组合物包括：微孔支架，支撑件包括脱细胞软骨外基质和交联的有机聚合物；凋亡小体，凋亡小体存在于微孔支架；其中，基于体积3.14mm<supgt;3</supgt;的微孔支架，包含0.01‑0.02ug的凋亡小体。本申请的合支架可以提高凋亡小体活性，延长凋亡小体的作用时间，达到缓释的效果，还可以调控关节腔微环境，有效促进关节软骨修复，提高了损失软骨的修复效果，避免了传统外源性细胞移植所带来的安全隐患。

技术研发人员：郭全义,田广招,郭维民,刘舒云,眭翔,丁振罡,严子能,殷瀚,吴江
受保护的技术使用者：中国人民解放军总医院第一医学中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13