一种体外灭活肝肠孢虫的组合物及其应用和方法与流程

本发明属于养殖，尤其涉及一种体外灭活肝肠孢虫的组合物及其应用和方法。

背景技术：

1、南美白对虾(litopenaeusvannamei)是我国目前养殖规模最大的对虾种类之一，其肉质鲜美、营养丰富、经济价值高，深受人们的喜爱。南美白对虾的生长速度快，繁殖数量高，且后代存活率高，已成为我国市场重要的水产品之一，其市场具有广阔的发展前景。但是，对虾的养殖业一直饱受对虾缓慢生长综合征的困扰，患有对虾缓慢生长综合征的养殖池中的对虾生长速度明显低于正常对虾，ehp是目前造成对虾生长缓慢的主要病原之一。

2、虾肝肠胞虫(enterocytozoonhepatopenaei,ehp)是一种专性细胞内寄生的微孢子虫，具有几丁质的孢子壁，抗逆性较强，其感染并寄生宿主后，通过掠夺或与宿主竞争营养物质来进行生长发育，导致宿主营养不良，进而导致其生长迟缓甚至停滞，严重影响了养殖对虾的成虾产量，损害了养殖户的经济效益。每年都有因为ehp感染而失败的养殖案例，需要进行清塘。ehp传播方式主要分为垂直传播和水平传播。若不进行清塘，再次养殖时还会有感染的风险。传统的消杀方式主要用cao2，该方式费时费力，成本也较高。截止目前未见有明确药物可控制ehp感染的相关报道。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种体外灭活肝肠孢虫的组合物及其应用和方法，能够使肝肠孢虫失去侵染致病能力。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明提供了一种体外灭活肝肠孢虫的组合物，包括以下浓度的溶液：50-100mg/l的二氧化氯溶液和ph值为4.0-5.0的水溶液。

4、优选的，通过柠檬酸调节所述水溶液的ph值。

5、本发明还提供了上述组合物在体外灭活肝肠孢虫中的应用。

6、本发明还提供了利用上述组合物在体外灭活肝肠孢虫的方法，包括：用所述水溶液处理肝肠孢虫悬液后，再用二氧化氯溶液处理。

7、优选的，所述肝肠孢虫悬液的制备方法包括：将患有肝肠孢虫南美白对虾的肝胰腺制备成匀浆后，用体积百分含量为25％-35％、55％-65％和85-95％的percoll进行密度梯度离心，将最下层沉淀用水重悬，得到所述肝肠孢虫悬液。

8、优选的，所述重悬所用水的体积为90-110μl。

9、优选的，所述水溶液、二氧化氯溶液与肝肠孢虫悬液的体积比为(1-3):(1-3):(1-3)。

10、优选的，所述水溶液处理的时间为5-15min。

11、优选的，所述二氧化氯溶液的处理时间为10-20h。

12、相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：

13、本发明提供了一种体外灭活肝肠孢虫的组合物及其应用和方法，包括：用ph值为4.0-5.0的水溶液刺激肝肠孢虫后，再用二氧化氯溶液处理。其中ph值为4.0-5.0的水溶液刺激肝肠孢虫，能使其萌发；二氧化氯溶液处理，能使肝肠孢虫灭活，失去侵染致病能力。采用本发明体外灭活肝肠孢虫的方法对环境无污染，除此之外在安全性、有效性、成本效益、便捷性等方面都具有一定的优势，针对性强、效果显著。。

技术特征：

1.一种体外灭活肝肠孢虫的组合物，其特征在于，包括以下浓度的溶液：50-100mg/l的二氧化氯溶液和ph值为4.0-5.0的水溶液。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，通过柠檬酸调节所述水溶液的ph值。

3.权利要求1或2所述组合物在体外灭活肝肠孢虫中的应用。

4.一种利用权利要求1或2所述组合物在体外灭活肝肠孢虫的方法，其特征在于，包括：用所述水溶液处理肝肠孢虫悬液后，再用二氧化氯溶液处理。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述肝肠孢虫悬液的制备方法包括：将患有肝肠孢虫南美白对虾的肝胰腺制备成匀浆后，用体积百分含量为25％-35％、55％-65％和85-95％的percoll进行密度梯度离心，将最下层沉淀用水重悬，得到所述肝肠孢虫悬液。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述重悬所用水的体积为90-110μl。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述水溶液、二氧化氯溶液与肝肠孢虫悬液的体积比为(1-3):(1-3):(1-3)。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述水溶液处理的时间为5-15min。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述二氧化氯溶液的处理时间为10-20h。

技术总结
本发明提供了一种体外灭活肝肠孢虫的组合物及其应用和方法，涉及养殖技术领域。本发明所述体外灭活肝肠孢虫的方法，包括：用pH值为4.0‑5.0的水溶液刺激肝肠孢虫后，再用二氧化氯溶液处理。其中pH值为4.0‑5.0的水溶液刺激肝肠孢虫，能使其萌发；二氧化氯溶液处理，能使肝肠孢虫灭活，失去侵染致病能力。采用本发明体外灭活肝肠孢虫的方法对环境无污染，除此之外在安全性、有效性、成本效益、便捷性等方面都具有一定的优势，针对性强、效果显著。

技术研发人员：沈辉,曹晓慧,乔毅,蒋葛,成婕,万夕和,黎慧,王李宝,史文军,窦雅斌,刘学实,张晟,张雷霆,秦亚丽,沈静
受保护的技术使用者：江苏省海洋水产研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14