一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用

本发明属于生物，具体涉及一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用。

背景技术：

1、艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽孢杆菌，主要通过毒素tcda和tcdb破坏肠上皮细胞及细胞骨架，引发腹泻，伪膜性肠炎和中毒性巨结肠等疾病，是抗生素相关性腹泻的主要病原体，常通过粪-口传播。由于艰难梭菌孢子对不良环境的耐受性强且存活时间长，在医院内感染较为常见，给社会带来了很大的经济负担。尽管抗生素是艰难梭菌感染(clostridium difficile infection,cdi)的主要疗法，但由于抗生素的滥用，艰难梭菌对克林霉素，氨基糖苷类抗生素和林可霉素等多种抗生素产生强耐受性。寻求安全有效的非抗生素疗法迫在眉睫。

2、肠道微生物群紊乱是艰难梭菌感染的重要诱因。目前新型的一些非抗生素疗法都致力于恢复正常的肠道微生物群。粪便微生物移植(fecal microbiota transplantation，fmt)是新兴的非抗生素疗法之一，通过将健康志愿者的肠道微生物群移植给患者，从而促进艰难梭菌感染患者肠道微生物群的恢复。且fmt对复发性艰难梭菌感染疗效较好。哺乳动物肠道具有多种微生物，包括细菌，真菌，病毒和寄生虫等。正常情况下，这些肠道微生物能够帮助宿主消化，增强宿主免疫，防御病原微生物的入侵。由于fmt存在供体微生物不稳定，具有携带病原体风险等问题，人们开始分离肠道特定的活体微生物治疗艰难梭菌感染并探究fmt的作用机制。由于细菌在肠道微生物中占据大部分，因此关于fmt的作用机制的研究大多集中在细菌上，而其他共生微生物成分的作用没有受到足够的重视。

3、相比于具有易耐药，副作用强的抗生素，肠道分离的乳酸杆菌和双歧杆菌等原核生物在多种肠道疾病中都发挥了重要作用，这些微生物不仅能直接影响病原菌的定植，还能影响肠道微生物群。已有研究发现真核生物隐孢子虫能够抵抗肠道感染，因此，分离肠道特定真核生物防治艰难梭菌感染具有良好发展前景。

技术实现思路

1、针对现有技术中的不足之处，本发明提供一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用，该原虫能够有效缓解艰难梭菌感染动物的临床症状，减轻肠道损伤，减少中性粒细胞的募集及其促炎因子的分泌，从而减轻感染性结肠炎。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用，其特征在于，用于制备预防或治疗由于艰难梭菌感染导致的肠道炎症的微生物制剂。

4、进一步地，所述鼠共生原虫提取自hvem-/-小鼠盲肠。

5、进一步地，所述鼠共生原虫为tritrichomonas musculis(t.mu)。

6、本发明还提供一种鼠共生原虫的提取方法，包括如下步骤：

7、s1、处死一只hvem-/-小鼠，打开腹腔，去除盲肠，将盲肠内容物收集在无菌磷酸盐缓冲液中，1500rpm，4℃，离心5min，重复洗涤虫体沉淀3次；

8、s2、用等量40％和80％的percoll分离液重悬虫体，在1000g，4℃，离心15min差速离心纯化虫体；

9、s3、用pbs重悬虫体，取10μl充池在牛鲍计数板上进行计数。

10、有益效果：本发明提供了一种具有防治艰难梭菌感染能力的鼠共生原虫及其在用于预防或治疗由于艰难梭菌感染而导致的肠道疾病的微生物制剂中的应用。该原虫对艰难梭菌感染的临床症状有明显的缓解作用，同时对中性粒细胞主导的肠道炎症有明显的抑制效果。由此可见，该原虫在临床预防或治疗艰难梭菌感染相关疾病或其他肠道疾病中具有广阔应用前景。

技术特征：

1.一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用，其特征在于，用于制备预防或治疗由于艰难梭菌感染导致的肠道炎症的微生物制剂。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述鼠共生原虫提取自hvem-/-小鼠盲肠。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述鼠共生原虫为tritrichomonasmusculis。

4.权利要求1-3任意一项所述的应用，其特征在于，所述鼠共生原虫的提取方法包括如下步骤：

技术总结
本发明属于生物技术领域，公开了一种鼠共生原虫在防治艰难梭菌感染中的应用，该原虫提取自HVEM<supgt;‑/‑</supgt;小鼠盲肠，为Tritrichomonas musculis原虫，在艰难梭菌感染模型中，该原虫有效缓解了小鼠临床症状，减轻了肠道损伤，并减少了中性粒细胞在肠道炎症部位的募集，从而降低促炎因子IL‑1β的分泌，减轻艰难梭菌感染性结肠炎，该原虫在制备用于防治艰难梭菌感染的微生物制剂中具有广阔的应用前景。

技术研发人员：杨欢,吴小小,藏婉晴,杨盼,韦艳霞
受保护的技术使用者：徐州医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14