一种高温高湿环境联合化学药物构建高尿酸血症大鼠模型的方法与流程

本发明属于动物模型构建，具体涉及一种高温高湿环境联合化学药物构建高尿酸血症大鼠模型的方法。

背景技术：

1、高尿酸血症是一种严重影响人类健康的常见病，具有影响广泛、致残率高的特点，在世界范围内已成为继“高血糖、高血压、高血脂”之后的第四高。研究发现所处环境温度与高尿酸血症患病率密切相关，环境温度、湿度的升高将显著增加特殊职业人群以及普通人群的血清尿酸水平，导致高尿酸血症风险增加。但迄今为止，国内外相关动物实验和分子机制研究较匮乏，导致环境温度、湿度与血尿酸水平上升之间的发病机制尚未完全阐明。在高尿酸血症的基础研究方面，建立合理而稳定的动物模型是研究的重点所在。迄今为止，高尿酸血症动物模型运用较为广泛的造模方法是药物干预法，主要干预方式包括增加尿酸来源(如次黄嘌呤、果糖和酵母等)，抑制啮齿类动物尿酸酶活性以模拟人体尿酸代谢(如氧嗪酸钾、乙胺丁醇等)，但单药所造模型血尿酸稳定性差，而联合用药则容易造成多种组织器官损伤。

2、在高尿酸血症造模动物的选择上，禽类高尿酸血症模型以鸡、鹌鹑为主，其嘌呤代谢途径与人类有相似之处，即缺失尿酸酶，所以血清尿酸水平较高，但禽类生理生化特性等与人类相差比较大，其模型的应用受到一定的限制。而部分哺乳动物，如大鼠、小鼠等仍含有尿酸酶，可将尿酸分解为尿囊素后排出体外，故此类动物血清尿酸水平较低。目前啮齿类的大、小鼠是国内外最常用的造模动物，具有饲养和操作较简单的优势，且同属哺乳动物与人类的许多生理生化特性接近，但弊端在于体内存在尿酸酶，正常状态下难以达到人类的血清尿酸浓度。在疾病防治基础研究中至关重要的就是疾病动物模型的制备。

3、因此需要一种稳定性好、肾功能损伤小的鼠类高尿酸血症动物模型。

技术实现思路

1、本发明的目的在于一种稳定性好、肾功能损伤小的高尿酸血症鼠类模型的构建方法及其应用。

2、本发明所采取的技术方案是：

3、本发明的第一方面，提供一种高尿酸血症动物模型的构建方法，包括以下步骤：在建模阶段每天上午将氧嗪酸钾给药动物，每天下午将动物置于高温高湿环境，获得高尿酸血症动物模型。

4、优选地，所述高温高湿环境条件为：温度37±2℃，湿度80±5％，时间为0.8～1.2h/d。

5、优选地，所述氧嗪酸钾的剂量为240～260mg/kg。

6、优选地，所述氧嗪酸钾的给药方式为灌胃给药。

7、优选地，所述氧嗪酸钾为混悬液。

8、优选地，所述混悬液采用0.4～0.6％羧甲基纤维素钠溶液作为溶剂配制。

9、优选地，所述建模时间为2周～12周。

10、优选地，所述上午固定时间(08:00～10.00)对造模动物进行灌胃处理，以免造成血尿酸水平的大幅度波动；所述下午固定时间(14:00～16.00)对高温高湿+氧嗪酸钾组动物放于培养箱进行高温高湿处理。

11、优选地，所述大鼠在开始造模前将大鼠进行适应性饲养5～9天，所述饲养条件为所述饲养条件为温度22～26℃、湿度40％～60％、昼夜交替照明时间为11～13h。

12、优选地，所述动物包括大鼠。

13、优选地，所述大鼠包括sd大鼠、wistar大鼠、lewis大鼠。

14、优选地，所述大鼠为成年大鼠；所述成年大鼠的月龄≥8周。

15、本发明的第二方面，提供本发明第一方面所述的构建方法构建得到的动物模型在研究高尿酸血症发生发展的分子机制，或制备和/或筛选预防和/或治疗高尿酸血症的药物，或优化治疗方案中的应用。

16、本发明的有益效果是：

17、本发明提供了一种通过高温高湿环境联合化学药物所致高尿酸血症大鼠模型的构建方法，具体为通过模拟高温高湿环境处理、联合化学药物氧嗪酸钾灌胃以建立高尿酸血症大鼠模型。本发明所述的方法在造模2周时即成功建立血尿酸水平显著高于空白对照组大鼠的高尿酸血症大鼠模型，且持续造模发现相比传统化学药物氧嗪酸钾造模法，该高温高湿模型大鼠的血尿酸水平相对更高、稳定性更好。

18、根据本发明所述的造模方法建立的高尿酸血症大鼠模型可进一步应用于高温高湿环境引起高尿酸血症的病理生理机制、分子生物学及药物治疗等方面的研究。

19、本发明的改进点在于创新性的提出既往研究中未引起重视的环境特征建立特有的高尿酸血症大鼠模型，高度模拟高温高湿环境对大鼠进行处理，并采用维持剂量的传统化学药物氧嗪酸钾，以发挥其抑制尿酸酶的作用。不同于以往单纯靠化学药物诱导的模型，本发明的造模方法建立的高尿酸血症大鼠模型具有更稳定的血尿酸水平，且高温高湿环境处理过程中一直保持良好的精神状态，未出现昏迷、休克、呼吸衰竭等中暑症状，造模12周后存活率为100％。本发明通过高温高湿环境联合尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾构建较为稳定且无严重肾损伤的高尿酸血症大鼠模型，该模型可为后续开展特殊高温高湿环境下高尿酸血症发病机制研究和制定预防诊疗措施提供一定科学依据；该方法造模方便，饲养成本低，市场需求大，具有很好的应用前景。

技术特征：

1.一种高尿酸血症动物模型的构建方法，包括以下步骤：在建模阶段每天上午将氧嗪酸钾给药动物，每天下午将动物置于高温高湿环境中，获得高尿酸血症动物模型。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高温高湿环境条件为：温度37±2℃，湿度80±4％，时间为0.8～1.2h/d。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述建模阶段的饲养条件为温度22～26℃、湿度40％～60％。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述氧嗪酸钾的剂量为240～260mg/kg；优选地，所述氧嗪酸钾的给药方式为灌胃给药。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述氧嗪酸钾为混悬液；优选地，所述混悬液采用0.4～0.6％羧甲基纤维素钠溶液作为溶剂配制。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述建模时间为2～12周。

7.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述动物在开始造模前将大鼠进行适应性饲养5～9天，所述饲养条件为温度22～26℃、湿度40％～60％、昼夜交替照明时间为11～13h。

8.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述动物包括大鼠；优选地，所述大鼠包括sd大鼠、wistar大鼠、lewis大鼠。

9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述大鼠为成年大鼠。

10.权利要求1～9任一项所述的构建方法构建得到的动物模型在研究高尿酸血症发生发展的分子机制，或制备和/或筛选预防和/或治疗高尿酸血症的药物，或优化治疗方案中的应用。

技术总结
本发明公开了一种高温高湿环境联合化学药物构建高尿酸血症大鼠模型的方法；通过模拟高温高湿环境处理、联合化学药物氧嗪酸钾灌胃以建立高尿酸血症大鼠模型。本发明所述的方法在造模2周时即成功建立血尿酸水平显著高于空白对照组大鼠的高尿酸血症大鼠模型，且持续造模发现相比传统化学药物氧嗪酸钾造模法，该高温高湿模型大鼠的血尿酸水平相对更高、稳定性更好，且高温高湿处理过程中一直保持良好的精神状态，未出现昏迷、休克、呼吸衰竭等中暑症状，造模12周后存活率为100％。该模型可为后续开展特殊高温高湿环境下高尿酸血症发病机制研究和制定预防诊疗措施提供一定科学依据；该方法造模方便，市场需求大，具有很好的应用前景。

技术研发人员：李佳,程雅欣,刘明玉,谭文彬
受保护的技术使用者：中国人民解放军南部战区总医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15