一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法与流程

本发明涉及细胞培养，具体涉及一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法。

背景技术：

1、采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称为灭菌，灭菌主要方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌。化学试剂灭菌主要指环氧乙烷灭菌，射线灭菌主要指辐照灭菌，干热灭菌主要指用烘箱加热灭菌，湿热灭菌主要之用灭菌锅灭菌，过滤灭菌主要指用微孔滤膜过滤灭菌。通过物理或化学方法改善物质表面性能的方法称为表面改性。

2、常用的表面改性的主要方法包括物理改性和化学改性两类方法。物理改性包括表面涂覆改性、表面真空镀、溅射、表面机械改性和喷射等。化学改性包括放电、射线辐照、离子镀、电镀、火焰改性、溶液处理等。对于动物体和人体内的大部分细胞，比如成纤维细胞，骨骼组织，心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞等，当细胞置于体外进行培养时，大多数均以贴壁方式生长，因此，必须要求体外细胞培养装置与细胞接触的表面具有一定的亲水性，才能满足贴壁型细胞体外培养要求。

3、当前，一次性塑料培养板在生物、医药、化工等许多领域都得到广泛应用。塑料制品因价格低廉，成为生物、医药等行业进行实验分析的首选高分子材料。然而，现有技术中的细胞培养板，如聚苯乙烯(ps)、聚乙烯(pe)、聚碳酸酯(pc)等，其表面都不亲水，用于细胞的贴壁培养非常困难。

4、现有技术中，一般采用放电气体产生的等离子体对细胞培养板进行表面清洗，提高细胞培养板表面的润湿性能。同时等离子体使细胞培养板表面的原有的化学键产生断裂，大大地激活其表面活性。再通过反应气体在等离子表面处理设备中电离出活性基团，在活化的材料表面发生化学反应，引入新的官能团，有效提高细胞培养板的表面亲水能力；而产品灭菌的步骤则一般是在包装完成之后单独进行辐照灭菌。但该方法需要将表面改性和灭菌作为两个步骤独立处理，操作繁琐，处理效率低，成本较高。还有采用uvo(紫外-臭氧)的方式对一些聚酯类高分子材料进行表面改性，其主要利用短波紫外光的照射，臭氧会生成和分解的原理，使原子氧和分子氧积累，原子氧与空气中的羟基自由基形成羟基，在高分子链上留下烯烃单元；分子氧与碳自由基反应，形成一个过氧基团，然后从相邻的碳链中提取一个氢原子，形成过氧化氢单元，羟基与过氧化氢进一步被氧化得到酮或酯基，从而高分子表面生成众多的产物，完成改性。但该方法往往用于处理薄膜，对培养板处理效果不明显，且同样表面改性和灭菌作为两个步骤独立处理，操作繁琐，处理效率低。

5、因此，需要提供一种更简单高效的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法。

技术实现思路

1、发明目的：

2、为了解决现有技术中存在的表面改性和灭菌作为两个步骤独立处理，操作繁琐，处理效率低，成本较高的问题，本发明提供一种更简单高效的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法。

3、技术方案：

4、为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

5、本发明提供一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，包括如下步骤：

6、s1：将未经处理的细胞培养板放置在臭氧消毒设备中，进行臭氧灭菌90～110min；

7、s2：步骤s1结束后，对细胞培养板进行表面亲水改性处理，仍然将细胞培养板放置在臭氧消毒设备内，22～26h后再将细胞培养板取出，即得已灭菌且已表面亲水改性处理的细胞培养板。

8、优选的，步骤s1中臭氧产量为20g/h,臭氧浓度为大于20ppm，温度不超过30℃，湿度不超过80％。

9、优选的，步骤s1中臭氧灭菌为99min或者105min。

10、优选的，步骤s2中，臭氧消毒设备内臭氧含量保持在大于20ppm。

11、优选的，步骤s2中，细胞培养板放置在臭氧消毒柜内的时间为24h或者25h。

12、优选的，所述细胞培养板的材质为聚苯乙烯、聚丙烯、聚酯、聚碳酸酯、聚乙烯或者高密度聚乙烯材质。

13、优选的，所述细胞培养板需是经过包装的且包装材料至少有一个面是强盖板。

14、有益效果：

15、本发明的有益效果是：本发明的一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，由于步骤s1中采用臭氧消毒柜产生臭氧，臭氧是强氧化剂，可以对细胞培养板进行有效的灭菌处理。其次，步骤s2中，步骤s1结束后，不打开柜门，仍然将细胞培养板放置在臭氧消毒柜内22～26h，长时间放置在臭氧环境后，细胞培养板表面在臭氧的作用下会产生游离的活性基团，增加细胞培养板的亲水能力，从而对细胞培养板进行表面亲水改性处理。相对于现有技术而言，本发明对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法将灭菌和表面改性两个步骤合并到一台设备处理，操作简单，处理效率高，成本较低，能够在大大提高细胞培养板的亲水能力，提高细胞贴壁率的同时实现产品灭菌，从而实现大规模生产。

技术特征：

1.一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，步骤s1中臭氧灭菌时臭氧产量为20g/h,臭氧浓度为大于20ppm，温度不超过30℃，湿度不超过80％。

3.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，步骤s1中臭氧灭菌时间为99min或者105min。

4.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，步骤s2中，臭氧消毒设备内臭氧含量保持在大于20ppm。

5.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，步骤s2中，细胞培养板放置在臭氧消毒柜内的时间为24h或者25h。

6.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，所述细胞培养板的材质为聚苯乙烯、聚丙烯、聚酯、聚碳酸酯、聚乙烯或者高密度聚乙烯材质。

7.根据权利要求1所述的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，其特征在于，所述细胞培养板需是经过包装的且包装材料至少有一个面是强盖板。

技术总结
本发明涉及一种对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法，包括如下步骤：S1：将待处理的细胞培养板放置在臭氧消毒设备中，进行臭氧灭菌90～110min；S2：步骤S1结束后，对细胞培养板进行表面亲水改性处理，仍然将细胞培养板放置在臭氧消毒设备内，22～26h后再将细胞培养板取出，即得已灭菌且已表面亲水改性处理的细胞培养板。有益效果是，本发明的对细胞培养板灭菌并表面亲水改性处理的方法将灭菌和表面改性两个步骤合并到一台设备处理，操作简单，处理效率高，成本较低，能够在大大提高细胞培养板的亲水能力，提高细胞贴壁率的同时实现产品灭菌，从而实现大规模生产。

技术研发人员：张胜有,谭伟红
受保护的技术使用者：苏州赛普生物科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15