一种补骨脂生物酶法加工方法与流程

本发明为中药加工领域，具体涉及一种补骨脂生物酶法加工方法。

背景技术：

1、补骨脂为豆科植物补骨脂(psoralea corylifolia l)的干燥成熟果实，性温，味辛、苦，主归脾、肾两经，具有温肾壮阳、固精缩尿、温脾止泻之功效。广泛用于肾阳不足、腰膝冷痛、阳痿遗精、遗尿尿频、五更泄泻、肾虚作喘、白癜风、出血热等病症。补骨脂已有千余年药用历史，自南北朝至清末的医疗文献中，至少有88部记载有它的炮制方法。现代研究表明，补骨脂具有扩张血管，增加心肌收缩力，抑菌、抗病毒，雌性激素样作用等生理活性。

2、中国药典规定补骨脂中(异)补骨脂素的含量不得低于0.7％。但在补骨脂药材的现代栽培中，每年新产补骨脂药材的补骨脂素和异补骨脂素总含量常常达不到《中国药典》规定的最低要求0.70％。经常出现不合格的情况，使得补骨脂中药资源造成极大浪费，打击药农的栽培信心。如何提高补骨脂药材中补骨脂素和异补骨脂素的含量值我们去探索。经过本发明人反复实验研究，发现在补骨脂药材加工炮制过程中，使用生物酶发酵法能促进补骨脂中有效成分转化，能够大幅提高补骨脂药材中补骨脂素和异补骨脂素的含量，为此完成本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提高补骨脂中有效成分转化，进而提供一种补骨脂生物酶法加工方法。该方法不但能大幅提高补骨脂药材中补骨脂素和异补骨脂素的含量，而且方法可靠、稳定。

2、为实现本发明的目的提供如下实施技术方案。

3、在一技术方案中，本发明的一种补骨脂生物酶法加工方法，包括以下步骤：

4、1)酶液提取和培养

5、将补骨脂药材打碎成粉，加水制成补骨脂浆,再加入磷酸盐缓冲液提取1.5-2.5小时，过滤分离，取提取液加入到改良马丁培养基中，在23～28℃培养4-6天；

6、2)酶液分离

7、收集上步培养好的菌液，离心分离，取上清液，调节ph值至6-7，即得酶液；

8、3)生物酶反应培养

9、将上步分离得到的酶液按酶液与水1：(40-60)的体积比加水稀释，调整稀释酶液的ph为6-7，均匀喷洒在补骨脂药材上，加水使药材水分达到85-95％，在温度34-36℃、湿度85-95％环境下放置4-6天，中间间断翻搅，完成酶促反应干燥，即得加工后的补骨脂药材。

10、优选的，上述本发明的加工方法，步骤1)中，所述磷酸盐缓冲液为0.3％磷酸盐缓冲液，其与所述补骨脂药材的体积质量为(1.8-2.2)：1ml/g，更优选为2：1，提取时间为2小时。

11、优选的，上述本发明的加工方法，步骤1)中，所述改良马丁培养基，由以下方法制得：取胨5.0g、磷酸氢二钾1.0g、酵母浸出粉2.0g和硫酸镁0.5g混合，加入水1000ml溶解，调节ph值为6.4-6.7，优选为6.5，煮沸，加入葡萄糖20.0g溶解后，摇匀，纱布滤清，调节ph值，使灭菌后的ph值为6.5±0.2，灭菌即得。

12、优选的，上述本发明的加工方法，步骤1)中所述培养，培养基的温度为25℃培养时间为5天。

13、优选的，上述本发明的加工方法，步骤2)所述的离心分离，具体为：将收集到的菌液加入离心管内，5000r/min冷冻离心20min，收集上清液，弃去沉淀，调ph值到6.5，即得。

14、优选的，上述本发明的加工方法，步骤3)中，酶液与水的体积比为1：50，稀释酶液的ph为6.5。

15、优选的，上述本发明的加工方法，步骤3)中，所述药材水分为90％，所述温度为35℃、所述湿度为90％，放置时间为5天。

16、优选的，上述本发明的加工方法，步骤3)中，所述干燥为烘干处理法，具体为将药材沥干后放置至表面微干，置于烘箱中，在60℃下烘干处理，待药材水分达到10％左右即可。

17、上述步骤2)中所说的培养好的菌液，实质是步骤1)的补骨脂药材的磷酸缓冲液提取物经改良马丁培养基培养发酵得到的发酵液，其中含有生物酶。

18、在一具体实施技术方案中，本发明的本发明的一种补骨脂生物酶法加工方法，包括以下步骤：

19、1)酶液提取和培养：

20、将补骨脂药材打碎成粉，加水制成补骨脂浆，再加入0.3％磷酸盐缓冲液提取2小时，过滤分离，取提取液加入到改良马丁培养基中，在23～28℃培养5天，其中，补骨脂与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1：2g/ml；

21、2)酶液分离：

22、收集上步培养好的菌液，离心分离，5000r/min冷冻离心20min，取上清液，调ph值到6.5，即得酶液；

23、3)生物酶反应培养

24、将上步分离得到的酶液按酶液与水1：50的体积比加水稀释，调整稀释酶液的ph为6.5，均匀喷洒在补骨脂药材上，加水使药材水分达到90％，在温度35℃、湿度90％环境下放置5天，中间间断翻搅，完成发酵后，将药材沥干，放置至表面微干，置于烘箱中，在60℃下烘干处理，待药材水分达到10％左右，即得加工后的补骨脂药材。

25、在上述具体实施技术方案中，步骤1)中，所述改良马丁培养基，由以下方法制得：取胨5.0g、磷酸氢二钾1.0g、酵母浸出粉2.0g和硫酸镁0.5g混合，加入水1000ml，微热溶解，调节ph值为6.5，煮沸，加入葡萄糖20.0g溶解后，摇匀，纱布滤清，调节ph值，使灭菌后的ph值为6.5±0.2，分装，灭菌，即得改良马丁培养基。

26、技术效果：本发明的补骨脂药材生物酶法加工方法，通过自制生物酶培养、发酵补骨脂药材，有效促进了补骨脂素和异补骨脂素的转化，大大提高了补骨脂有效成分的转化率，显著提升了补骨脂素和异补骨脂素的含量，显著超过中国药典规定的0.70％的低限；使补骨脂药材中的补骨脂素和异补骨脂素的总量提高94.09％～134.02％，而且该加工方法可靠、稳定。

技术特征：

1.一种补骨脂生物酶法加工方法，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的加工方法，步骤1)中，所述磷酸盐缓冲液为0.3％磷酸盐缓冲液，其与所述补骨脂药材的体积质量比为(1.8-2.2)：1ml/g，提取时间为2小时。

3.如权利要求1所述的加工方法，步骤1)中，所述改良马丁培养基，由以下方法制得：取胨5.0g、磷酸氢二钾1.0g、酵母浸出粉2.0g和硫酸镁0.5g混合，加入水1000ml溶解，调节ph值为6.4-6.7，煮沸，加入葡萄糖20.0g溶解后，摇匀，滤清，调节ph值，使灭菌后的ph值为6.5±0.2，灭菌即得。

4.如权利要求1所述的加工方法，步骤1)中所述培养，培养液的温度为25℃，培养时间为5天。

5.如权利要求1所述的加工方法，步骤2)所述的离心分离，具体为：将收集到的菌液加入离心管内，5000r/min冷冻离心20min，收集上清液，弃去沉淀，调ph值到6.5，即得。

6.如权利要求1所述的加工方法，步骤3)中，酶液与水的体积比为1：50，稀释酶液的ph为6.5。

7.如权利要求1所述的加工方法，步骤3)中，所述药材水分为90％，所述温度为35℃，所述湿度为90％，放置时间为5天。

8.如权利要求1所述的加工方法，步骤3)中，所述干燥为烘干处理法，具体为将药材沥干后放置至表面微干，置于烘箱中，在60℃下烘干处理，待药材水分达到10％左右即可。

9.如权利要求2所述的加工方法，步骤1)中，0.3％磷酸盐缓冲液与所述补骨脂药材的体积质量比为2：1ml/g。

技术总结
本发明公开了一种补骨脂生物酶法加工方法，包括将补骨脂粉加水制成补骨脂浆，加入磷酸盐缓冲液提取，提取液加入到改良马丁培养基中培养，离心分离制得酶液，按1：50体积比加入水稀释，调节pH为6.5，喷洒在补骨脂药材上，加水使药材水分达到90％，在温度35℃、湿度90％的环境下放置5天，中间间断翻搅，完成培养后干燥，即得加工后的补骨脂药材。该方法有效提高补骨脂有效成分的转化率，使补骨脂药材中的补骨脂素和异补骨脂素的总量显著提高，提高治疗效果，且该方法可靠，稳定。

技术研发人员：吕紫璇,陈亚,唐瑜,陈建
受保护的技术使用者：重庆市涪陵食品药品检验所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15