一种载细胞多孔微球及其制备方法和应用

本发明涉及一种plga多孔微球，具体涉及一种载细胞多孔微球及其制备方法和应用。

背景技术：

1、微球药物是指药物溶解或分散在成球材料中，形成的骨架型微小球形或类球形微粒，其粒径范围一般在1-250μm，可以供口服、注射、滴鼻或皮下埋植使用。

2、常用的合成材料，主要为已被美国fda批准的可安全药用的聚酯类材料，包括聚乳酸(polylacticacid,pla)、聚乙醇酸(polyglycolic acid,pga)、聚乳酸羟基乙酸共聚物(poly lactic-co-gly-colic acid,plga)和聚己内酯(polycaprolactone,pcl)等。其中，pla和plga以其良好的生物相容性和生物可降解性被广泛应用在缓控释注射给药系统。

3、plga具有良好的生物相容性和生物降解性，其材料降解产物与机体代谢产物相同，不会对机体产生不良反应，因此被广泛应用于医学工程材料和药物递送领域在所有已上市的微球产品中，plga是最常用的载体材料，lurpon depot、zoladex、sandotatin lar、risperdal consta等均是以plga为载体制备的微球。此外，以plga微球为载体的研究，如：cn201410005888.8(一种载硫酸庆大霉素多孔羟基磷灰石/plga微球的制备方法)、cn201610881156.4(一种可控制备载紫杉醇plga多孔微球的方法)、胰高血糖素样肽-1缓释微球技术进展(刘波,阮思达,蔡挺.中国新药杂志,2021,30(13):1184-1191.)、photothermal hydrogel platform for prevention of post-surgical tumorrecurrence and improving breast reconstruction(yang x,gao l,wei y,etal.journal of nanobiotechnology,2021,19(1):307.)等。

4、然而现有技术中公开的各种方案中均是针对于特定疾病所研制，而非调控炎症微环境，无法克服炎症微环境中干细胞活性不足、功能性下降、组织再生效果差的情况。

技术实现思路

1、本发明的目的就是为了解决上述问题至少其一而提供一种载细胞多孔微球及其制备方法和应用，以解决炎症微环境中干细胞活性不足、功能性下降、组织再生效果差，而现有技术中多孔微球无法调控微环境的问题，本发明通过缓释多肽实现了形成有利于移植骨髓间充质干细胞(bmscs)存活的微环境。

2、本发明的目的通过以下技术方案实现：

3、本发明第一方面公开了一种载细胞多孔微球，

4、所述的载细胞多孔微球为plga/pda/cgrp多孔微球，

5、所述的plga/pda/cgrp多孔微球为负载有cgrp的plga/pda多孔微球，

6、所述的plga/pda多孔微球为通过pda表面修饰的plga多孔微球。

7、优选地，所述的plga多孔微球的粒径为20-180μm。

8、优选地，所述的plga多孔微球的大孔孔径为5-40μm。

9、本发明第二方面公开了一种制备如上任一所述的载细胞多孔微球的方法，包括如下步骤：

10、s1：将plga多孔微球加入pda溶液中，搅拌下反应，得到plga/pda多孔微球；

11、s2：将步骤s1得到的plga/pda多孔微球冷冻干燥；

12、s3：将步骤s2冻干的plga/pda多孔微球浸泡于cgrp溶液中，再次冷冻干燥后得到plga/pda/cgrp多孔微球。

13、优选地，步骤s1中，所述的plga多孔微球通过乳化法制得，包括如下步骤：

14、s1a：将plga溶解于二氯甲烷，得到plga溶液；

15、s1b：将造孔剂加入至步骤s1a得到的plga溶液中，均质使液体充分乳化；

16、s1c：将步骤s1b得到的乳化液加入pva溶液中，搅拌得到plga多孔微球。

17、优选地，包括如下一项或几项：

18、i)步骤s1a中，plga与二氯甲烷的用量比为0.25g：10ml；

19、ii)步骤s1b中，造孔剂为碳酸氢铵溶液，碳酸氢铵溶液的浓度为5-25wt％；

20、iii)步骤s1b中，造孔剂与plga溶液中plga的用量比为5ml：0.25g；

21、iv)步骤s1b中，均质：采用高速均质机以10000rpm的转速均质2min；

22、v)步骤s1c中，pva溶液的浓度为0.1wt％；

23、vi)步骤s1c中，pva溶液与乳化液中plga的用量比为100ml：0.25g；

24、vii)步骤s1c中，搅拌：采用磁力搅拌器以600rpm的转速搅拌6h。

25、优选地，步骤s1中，反应的时间为6h。

26、优选地，步骤s1中，所述的pda溶液由多巴胺、ph＝8.0的tri-hcl和去离子水以0.02g：100μl：10ml的用量比制备得到。

27、优选地，步骤s2中，冷冻干燥的时间为24h。

28、优选地，步骤s3中，plga/pda多孔微球与cgrp溶液的用量比为20mg：200μl，所述的cgrp溶液的浓度为10μm；冷冻干燥的时间为24h。

29、本发明第三方面公开了一种如上任一所述的载细胞多孔微球在制备炎症状态下用于促进骨形成的药物中的应用。

30、本发明的工作原理为：

31、该载细胞多孔微球为通过聚多巴胺(pda)表面修饰构建的具有降钙素基因相关肽(cgrp)缓释功能的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)多孔微球；通过缓释多肽形成有利于移植骨髓间充质干细胞(bmscs)存活的微环境。

32、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

33、该载细胞多孔微球通过调控牙周炎微环境、保护干细胞的活性与功能，促进牙周炎性环境下骨组织再生。

34、不同浓度cgrp对bmscs成骨相关基因表达影响不同，其中10-100nm下的多孔微球促成骨效果最强。

35、不同浓度cgrp与lps(牙龈卟啉单胞菌来源的脂多糖pg-lps)刺激对bmscs细胞活性的影响，10nm cgrp下的多孔微球可在一定程度上恢复细胞活性。

技术特征：

1.一种载细胞多孔微球，其特征在于，

2.根据权利要求1所述的一种载细胞多孔微球，其特征在于，所述的plga多孔微球的粒径为20-180μm。

3.根据权利要求1所述的一种载细胞多孔微球，其特征在于，所述的plga多孔微球的大孔孔径为5-40μm。

4.一种制备如权利要求1-3任一所述的载细胞多孔微球的方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的一种载细胞多孔微球的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述的plga多孔微球通过乳化法制得，包括如下步骤：

6.根据权利要求5所述的一种载细胞多孔微球的制备方法，其特征在于，包括如下一项或几项：

7.根据权利要求4所述的一种载细胞多孔微球的制备方法，其特征在于，步骤s1中，反应的时间为6h。

8.根据权利要求4所述的一种载细胞多孔微球的制备方法，其特征在于，步骤s2中，冷冻干燥的时间为24h。

9.根据权利要求4所述的一种载细胞多孔微球的制备方法，其特征在于，步骤s3中，plga/pda多孔微球与cgrp溶液的用量比为20mg：200μl，所述的cgrp溶液的浓度为10μm。

10.一种如权利要求1-3任一所述的载细胞多孔微球在制备炎症状态下用于促进骨形成的药物中的应用。

技术总结
本发明涉及一种PLGA多孔微球，具体涉及一种载细胞多孔微球及其制备方法和应用所述的载细胞多孔微球为PLGA/PDA/CGRP多孔微球，所述的PLGA/PDA/CGRP多孔微球为负载有CGRP的PLGA/PDA多孔微球，所述的PLGA/PDA多孔微球为通过PDA表面修饰的PLGA多孔微球。与现有技术相比，本发明解决炎症微环境中干细胞活性不足、功能性下降、组织再生效果差，而现有技术中多孔微球无法调控微环境的问题，本发明通过缓释多肽实现了形成有利于移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)存活的微环境。

技术研发人员：蒋欣泉,周名亮,罗嘉欣,吕佳璇,林思涵
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院附属第九人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16