AIBP作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用

本发明涉及生物医学，尤其涉及aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用。

背景技术：

1、急性肝损伤是由各种因素造成的肝脏急性炎症性疾病，是一种由多种因素共同参与所引起的致命临床综合征，其特点是死亡率高，肝功能迅速恶化，无潜在的慢性肝病。其损伤的病因包括药物性、胆汁淤积性、病毒性等，其损伤机制可能与钙超载、大量氧自由基生成、细胞因子激活、kupffer细胞激活及中性粒细胞聚集等相关。急性肝损伤或者急性肝衰竭作为一种临床急症，其治疗方案有限，目前有效的治疗方案仅有肝脏移植，但是因为肝脏供源紧缺，因此，随着急性肝损伤的快速进展，探索其他有效的治疗方法来提高急性肝损伤或者肝衰竭的总生存率已成为临床医生面临的挑战。

2、在急性肝损伤的病因中，由药物诱导的肝损伤在临床中占据最大比例。在我国，各种处方药和中药以及含有药用成分的膳食等均是引起急性肝损伤的病因。在药理上，多数的急性肝损伤由个体敏感性引起，个体差异大。据统计，由对乙酰氨基酚(apap)过量引起的急性肝损伤是西方国家急性肝衰竭的主要病因。apap诱导的急性肝损伤在动物模型中已经得以复现且具有剂量依赖性，使得对于急性肝损伤机制的研究有迹可循。

3、对于急性肝损伤的发病机制至今仍没有完全阐明，目前研究发现在肝损伤中发挥作用的主要细胞器为内质网和线粒体。肝毒性药物在经肝代谢后生成的肝毒性活性物质，是造成肝脏损伤的主要元凶。肝毒性物质具有氧化性，会耗竭还原性谷胱甘肽诱发线粒体应激，干扰氧化呼吸并造成细胞氧化损伤。同时肝毒性物质结合蛋白质后会造成蛋白变性，使其失去正常的生物学功能。在损伤下，内质网应激产生蛋白质的错误折叠，加剧了细胞稳态的失衡。

4、目前临床上唯一经过批准可以使用的治疗apap导致的急性肝损伤的药物是n乙酰半胱氨酸(nac)，然而，nac治疗仅在过量后20小时内有效，对晚期肝损伤患者敏感性较差。针对jnk磷酸化的抑制剂在动物模型中被证实可以抑制急性肝损伤的进展，然而因为其抑制肝脏再生和增殖的副作用，目前仍然停留在实验阶段。其他可能的治疗药物正在被陆续报道，然而这些药物对于肝损伤的作用有限，没有明确的作用靶点。表明，我们对于急性肝损伤的发病机制认识还不足，依然有关键的治疗靶点等待去发现和开发。

5、急性肝损伤的治疗药物较少，并且有很大的局限性，而且在目前的治疗方法下，依然有较大一部分病人反应不佳或无反应。表明我们对于急性肝损伤的发病机制有待深入研究，寻找急性肝损伤中的未知重要基因，进而开发新的治疗方法，能从根本上进一步提高急性肝损伤的治疗效果，或实现根除急性肝损伤的目的。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术中急性肝损伤的治疗药物较少，并且有很大的局限性，而且在目前的治疗方法下，依然有较大一部分病人反应不佳或无反应。表明我们对于急性肝损伤的发病机制有待深入研究，寻找急性肝损伤中的未知重要基因，进而开发新的治疗方法，能从根本上进一步提高急性肝损伤的治疗效果，或实现根除急性肝损伤的目的。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用。

4、优选的，所述药物包括抑制aibp表达下降或抑制aibp蛋白降解的小分子。

5、优选的，所述药物包括过表达aibp或重组aibp蛋白的小分子。

6、优选的，所述药物通过抑制aibp下降或过表达及重组蛋白，而实现抑制急性肝损伤的进展或治疗急性肝损伤。

7、优选的，所述抑制aibp下降包括抑制aibp的蛋白降解。

8、本申请还提供了一种aibp过表达细胞系的建立方法，包含以下步骤：用于转染的细胞先种植于六孔板中，当细胞生长至70％密度时，将培养基更换为无血清基础培养基dmem，用脂质体2000转染试剂转染细胞。转染六小时后，将dmem跟换为仅含10％fbs的dmem完全培养基，48小时后加入嘌呤霉素筛选细胞。

9、优选的，所述用于转染的细胞为使用dmem高血糖培养基(含10％胎牛血清和1％抗生素)在37℃和5％co2条件下培养。

10、本申请还提供了一种aibp敲除小鼠模型的建立方法，包含以下步骤：

11、s1：设计了特异性识别第二外显子两端的两个sgrna；

12、s2：将aibp+/-小鼠杂交产生aibp-/-小鼠，并在c57bl/6遗传背景上回交10代以上。

13、本申请中提供aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，和目前的治疗药物主要抑制氧化应激不同，aibp基因过表达后，主要抑制mapk信号通路的激活，从而抑制损伤信号的传递，本申请提供了急性肝损伤中的重要基因，从而方便开发新的治疗方法，从而从根本上进一步提高急性肝损伤的治疗效果，或者实现根除急性肝损伤的目的。

技术特征：

1.aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，其特征在于：所述药物包括抑制aibp表达下降或抑制aibp蛋白降解的小分子。

3.根据权利要求2所述的aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，其特征在于：所述药物包括过表达aibp或重组aibp蛋白的小分子。

4.根据权利要求1所述的aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，其特征在于：所述药物通过抑制aibp下降或过表达及重组蛋白，而实现抑制急性肝损伤的进展或治疗急性肝损伤。

5.根据权利要求4所述的aibp作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，其特征在于：所述抑制aibp下降包括抑制aibp的蛋白降解。

6.一种aibp过表达细胞系的建立方法，其特征在于：包含以下步骤：用于转染的细胞先种植于六孔板中，当细胞生长至70％密度时，将培养基更换为无血清基础培养基dmem，用脂质体2000转染试剂转染细胞。转染六小时后，将dmem跟换为仅含10％fbs的dmem完全培养基，48小时后加入嘌呤霉素筛选细胞。

7.根据权利要求6所述的aibp过表达细胞系的建立方法，其特征在于：所述用于转染的细胞为使用dmem高血糖培养基(含10％胎牛血清和1％抗生素)在37℃和5％co2条件下培养。

8.一种aibp敲除小鼠模型的建立方法，其特征在于：包含以下步骤：

技术总结
本发明提供AIBP作为靶点在制备治疗急性肝炎药物中的应用，涉及生物医学技术领域，本申请中提供了一种新的治疗靶点，本发明的治疗靶点是新发现的急性肝损伤相关基因。和目前的治疗药物主要抑制氧化应激不同，AIBP基因过表达后，主要抑制MAPK信号通路的激活，从而抑制损伤信号的传递，本申请提供了急性肝损伤中的重要基因，从而方便开发新的治疗方法，从而从根本上进一步提高急性肝损伤的治疗效果，或者实现根除急性肝损伤的目的。

技术研发人员：陆翠华,范义辉,毛仁芳,黄伟,马韬,朱净,葛思佳,高亚楠
受保护的技术使用者：南通大学附属医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16