一种选择性TNFR1拮抗肽SN61-4G在非酒精性脂肪性肝病中的应用

本发明涉及生物医药，具体地说，是一种选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g在非酒精性脂肪性肝病中的应用。

背景技术：

1、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，nafld)是目前常见的慢性肝脏疾病，是排除酒精和其他明确的造成肝损伤的因素后，肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征的获得性代谢应激性肝损伤，与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关，疾病谱包括非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(nash)及其相关肝硬化和肝癌。根据nafld全球发病率的分析显示，nafld发病率约为32.4％，并且随着肥胖患者数量的增加，这一数字还在继续上升(2015年以前仅为25.5％)(younossi zm,koenig ab,abdelatifd,et al.global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease—meta-analytic assessment of prevalence,incidence,and outcomes[j].m.j.h，2016，64(1):73-84.)。由于缺乏治疗和全球肥胖流行的日益严重，nafld的患病率正在增加，同时导致nafld相关的肝硬化和肝癌发病率逐年上升，目前已经成为肝硬化和肝癌发病率及其相关死亡率增长最快的病因。但迄今为止还没有治疗nafld的特效药，治疗方式仅限于生活方式干预。

2、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha，tnf-α)是一种重要的细胞因子，能够影响免疫调节、炎症、休克、细胞凋亡和自身免疫等生理病理过程。随着对nafld认识的不断深入，tnf-α被证实为在nafld中有着重要的作用，与nafld(younossi,koenig,abdelatif,fazel,henry and wymer,2016)的进展密切相关。tnf-α发挥生物效应主要是通过其下游的两个受体介导的，肿瘤坏死因子受体1(tnfr1)信号介导炎症通路，而肿瘤坏死因子受体2(tnfr2)介导保护途径(aggarwal b b.signalling pathways of the tnfsuperfamily:a double-edged sword[j].nature reviews immunology，2003，3(9):745-756.)。tnf-α拮抗剂在拮抗tnf-α因子促炎作用的同时影响了该因子其他的生物学功能，不仅抑制了tnfr1介导的炎症通路，同时切断了tnfr2介导的免疫调节和修复功能。同时，研究表明tnf-α抑制剂治疗nafld无法到达治疗终点。通过选择性地阻断tnfr1传递的信号通路来封闭tnf-α的生物学功能，中和tnf-α介导的肝损伤，同时维持tnfr2介导的再生、细胞存活和免疫反应调节的保护性途径是可能的治疗方法，因此近年来人们逐渐把治疗的靶点转向单一的tnfr1。目前，没有任何一种具有高度选择性的tnfr1拮抗剂上市，但已有tnfr1选择性中和抗体已进入临床i期。

3、中国专利文献cn115073553a中公开了sn61-4g能够治疗与tnf-α相关的炎症性肠病，同时公开了sn61-4g能与tnfr1直接相互作用，与tnfr1的结合能力约为446nm；且只与tnfr1结合，不与tnf-α、tnfr2结合，能竞争性抑制tnf-α与tnfr1之间的相互作用。基于此，本发明着重研究sn61-4g对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g在非酒精性脂肪性肝病中的应用。本发明所使用药物已于中国专利文献cn115073553a中公开了sn61-4g能够治疗与tnf-α相关的炎症性肠病，本发明是提供sn61-4g新适应症——非酒精性脂肪性肝病。

2、本发明人所在团队获得了一条十二肽sn61-4g(sdpgashltgir)，并通过体外实验初步验证了其与tnfr1的选择性结合以及体外抗炎活性，结果表明sn61-4g可能通过选择性结合tnfr1，抑制tnf-α与tnfr1相互作用表现出良好的抗炎活性。本发明是将其应用于高脂高糖饮食(hfd)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病模型，对开发非酒精性脂肪性肝病的治疗药物具有重要意义。

3、本发明的主要技术方案是：通过建立hfd诱导的非酒精性脂肪性肝病动物模型，证明sn61-4g具有tnfr1靶点选择性及治疗非酒精性脂肪性肝病的用途。

4、本发明提供一种选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g在制备治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用。

5、进一步的，所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g的氨基酸序列如seq id no：1所示。

6、进一步的，所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的药物为：以所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g为唯一的活性成分，或包含所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g的药物组合物。

7、进一步的，所述的药物组合物和药剂学上的常规药物辅料制成药物制剂。

8、进一步的，所述的药物制剂是片剂、颗粒剂、分散剂、胶囊剂、滴丸、注射剂、粉针剂或气雾剂等。

9、进一步的，所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的药物选择性拮抗tnfr1。

10、本发明采用hfd诱导的非酒精性脂肪性肝病模型，观察本发明提供的药物的治疗作用。结果显示，sn61-4g腹腔注射给药后，sn61-4g能够改善nafld小鼠的肝脏重量上升；显著降低nafld小鼠血清中甘油三酯(tg)、总胆固醇

11、(tc)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)、谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)的疾病指标；改善nafld小鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)指标；显著降低胱天蛋白酶-3(caspase-3)的活性及促炎因子白细胞介素-6(il-6)、tnf-α、白细胞介素-1β(il-1β)、转化生长因子-β1(tgf-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(mcp-1)、ⅰ型胶原α1(col1α1)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(timp-1)的mrna表达量；能够显著抑制氨基末端激酶(jnk)、细胞外调节蛋白激酶(erk)、p38、iκb的磷酸化；缓解nafld小鼠的胰岛素抵抗；通过油红o染色及h&e染色分析肝脏组织，sn61-4g能够显著减轻脂肪堆积，改善脂肪细胞周围炎症浸润、肝脏组织损伤、肝细胞空泡化、肝细胞汇管区炎性细胞浸润。另外，结果显示sn61-41相比英夫利昔单抗(ifx)获得更好的治疗效果。

12、上述研究结果表明，选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g具有良好的治疗非酒精性脂肪性肝病的作用。

技术特征：

1.一种选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g在制备治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g的氨基酸序列如seq id no：1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的药物选择性拮抗tnfr1。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的药物为：以所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g为唯一的活性成分，或包含所述的选择性tnfr1拮抗肽sn61-4g的药物组合物。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的药物组合物和药剂学上的常规药用辅料制成药物制剂。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的药物制剂是片剂、颗粒剂、分散剂、胶囊剂、滴丸、注射剂、粉针剂或气雾剂。

技术总结
本发明涉及生物医学领域，具体是提供一种选择性TNFR1拮抗肽SN61‑4G在治疗非酒精性脂肪性肝病中的应用。选择性TNFR1拮抗肽SN61‑4G具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。本发明通过体外实验初步验证了其与TNFR1的选择性结合以及体外抗炎活性，结果表明SN61‑4G可能通过选择性结合TNFR1，抑制TNF‑α与TNFR1相互作用表现出良好的抗炎活性。本发明将其应用于高脂高糖饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病模型，对开发非酒精性脂肪性肝病的治疗药物具有重要意义。

技术研发人员：陆一鸣,孙丽,李莹莹,李林雪,叶瑞威,李安
受保护的技术使用者：上海大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15