TRIM基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用

本发明涉及分子生物，具体地，涉及trim基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用。

背景技术：

1、猪塞内卡病毒(senecavirus a，sva)是一类单股正链rna病毒，属于小rna病毒科(picornaviridae)中塞内卡病毒属(senecavirus)唯一成员，其基因组全长约7.3kb，结构与其他小rna病毒有诸多相似之处，完整的sva病毒粒子为裸露的对称二十面体结构，直径为25～30nm，外观呈球形。猪塞内卡病毒作为一种新发的传染性病毒，感染猪群后能够导致猪发生特发性水疱病，严重影响猪养殖场的经济效益，给养殖业的安全带来了巨大威胁。

2、猪塞内卡病毒研究进展病毒基因组只含1个开放阅读框(orf)，在5’端非编码区存在iv型内部核糖体进入位点，介导病毒唯一的orf翻译成多聚蛋白。而目前关于猪塞内卡病毒的致病机制研究较少，尤其是对与病毒相互作用的靶向基因研究较少，导致缺乏较好的病毒防控手段，因此寻找与病毒相互作用的靶向基因对于研究病毒的致病机制具有重要意义。

3、三重基序蛋白家族(tripartite motif protein，trim)几乎存在于所有的多细胞动物体内，其能够作为免疫调节蛋白和e3泛素连接酶参与集体的固有免疫应答。随着研究的不断深入，人们发现trim蛋白家族不仅可以维持机体的正常生理功能，如细胞生长、膜修复、信号通路和细胞凋亡等，还能够参与多种疾病的调控过程；此外，trim5蛋白具有良好的抗hiv病毒能力，这也是目前最为广泛的trim5抗病毒研究。但是hiv病毒与猪塞内卡病毒属于完全不同的两类病毒，目前未见trim关于抗猪塞内卡病毒相关的研究。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供trim基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用。

2、本发明的第一目的是提供促进trim基因表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

3、本发明的第二目的是提供促进trim蛋白表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

4、本发明的第三目的是提供促进trim蛋白和/或trim基因表达的试剂在制备用于治疗和/或抗猪塞内卡病毒感染的药物中的应用。

5、本发明的第四目的是提供核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna在制备猪塞内卡病毒疫苗中的应用。

6、本发明的第五目的是提供重组有核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna的重组载体在制备猪塞内卡病毒中的应用。

7、本发明的第六目的是提供一种抗猪塞内卡病毒的药物。

8、为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

9、促进trim基因表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

10、优选地，所述trim基因为trim5基因。

11、优选地，所述抗猪塞内卡病毒的产品为抑制猪塞内卡病毒复制的药物。。

12、促进trim蛋白表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

13、优选地，所述trim蛋白为trim5蛋白。

14、本发明还请求保护促进trim蛋白和/或trim基因表达的试剂在制备用于治疗和/或抗猪塞内卡病毒感染的药物中的应用。

15、发明人利用宏基因组研究一个细胞中trim蛋白家族中的trim5基因与猪塞内卡病毒复制之间的关系，意外地发现抑制trim5基因的表达会显著促进猪塞内卡病毒的复制，而促进或上调trim5基因的表达能够显著抑制猪塞内卡病毒的复制。基于此，发明人设计了一种能够抑制trim5基因表达的sirna，所述sirna的核苷酸序列如seq id no：1所示；所述sirna会特异性结合trim5基因并形成发卡结构，进而干扰trim5基因的转录，使得trim5蛋白的表达量下降。

16、一种抑制trim5基因表达量上调的sirna，所述sirna的核苷酸序列如seq id no：1所示。

17、sirna(seq id no：1)：ggacgaggagaaagttattc。

18、一种抑制trim5基因表达的重组载体，所述重组载体重组有上述sirna。

19、本发明还请求保护核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna在制备猪塞内卡病毒疫苗中的应用。

20、本发明还请求保护重组有核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna的重组载体在制备猪塞内卡病毒中的应用。

21、其中核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna和/或重组有核苷酸序列如seq idno：1所示的sirna的重组载体能够抑制trim5基因表达，进而提升猪塞内卡病毒的复制能力，为疫苗研发过程提供稳定的病毒来源和高滴度的病毒。

22、本发明还请求保护一种抗猪塞内卡病毒的药物，所述药物通过促进trim基因和/或trim蛋白表达进而抑制猪塞内卡病毒复制。

23、优选地，所述药物还包含药学上可接受的载体。

24、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

25、本发明提供了trim基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用。本发明经研究发现促进trim基因的表达量上调之后，感染猪塞内卡病毒的细胞中的病毒复制能力被显著抑制；过表达trim基因会导致猪塞内卡病毒的基因表达和病毒效价发生显著的下降。基于此设计了一种能够抑制trim5基因表达的sirna，所述sirna的核苷酸序列如seq id no：1所示；该sirna能够抑制细胞中trim5基因的表达量上调，进而促进猪塞内卡病毒的复制，为研究猪塞内卡病毒疫苗提供高滴度的病毒来源。

技术特征：

1.促进trim基因表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述trim基因为trim5基因。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗猪塞内卡病毒的产品为抑制猪塞内卡病毒复制的药物。

4.促进trim蛋白表达的试剂在制备抗猪塞内卡病毒的产品中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述trim蛋白为trim5蛋白。

6.促进trim蛋白和/或trim基因表达的试剂在制备用于治疗和/或抗猪塞内卡病毒感染的药物中的应用。

7.核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna在制备猪塞内卡病毒疫苗中的应用。

8.重组有核苷酸序列如seq id no：1所示的sirna的重组载体在制备猪塞内卡病毒中的应用。

9.一种抗猪塞内卡病毒的药物，其特征在于，所述药物通过促进trim基因和/或trim蛋白表达进而抑制猪塞内卡病毒复制。

10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述药物还含有药学上可接受的载体。

技术总结
本发明公开了TRIM基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用。本发明经研究发现促进TRIM基因的表达量上调之后，感染猪塞内卡病毒的细胞中的病毒复制能力被显著抑制；过表达TRIM基因会导致猪塞内卡病毒的基因表达和病毒效价发生显著的下降。基于此设计了一种能够抑制TRIM5基因表达的siRNA，所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；该siRNA能够抑制细胞中TRIM5基因的表达量上调，进而促进猪塞内卡病毒的复制，为研究猪塞内卡病毒疫苗提供高滴度的病毒来源。

技术研发人员：宁章勇,李硕,谢镇鑫,李慧子,林存浩
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15