一种海藻多酚及其制备方法和应用

本发明涉及食品加工，尤其涉及一种海藻多酚及其制备方法和应用。

背景技术：

1、目前，针对食物过敏的消减措施主要有两种，一种是通过一定的食品加工技术手段降低食物过敏原的致敏性，另一种是利用天然抗过敏活性物质通过免疫调节控制食物过敏反应。然而，鉴于目前食品加工技术还无法完全消除水产品过敏原的致敏性，通过天然抗过敏活性成分抑制食物过敏反应就成为预防和控制食物过敏的有效途径，受到国内外越来越多的关注。

2、海藻是一种常见食材，海藻品种多样，资源丰富。海藻多酚是从海藻中提取出来的高亲水性多酚类化合物的总称，分子质量范围较广，大约在126～650ku，是海藻中的一种重要的活性物质，主要由间苯三酚聚合而成。研究表明，海藻富含多酚具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老及免疫调节等功能。近年来，越来越多的学者发现海藻中富含具有抗过敏活性的多酚物质，目前韩国已将部分海藻多酚作为抗过敏药物应用于临床。

3、然而，目前国内外针对抗过敏多酚制备相关的研究主要聚焦于陆生植物中的多酚物质，对于海藻中具有抗过敏功能多酚物质的相关专利还未见报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种海藻多酚及其制备方法和应用，综合采用乙醇浸提、大孔树脂动态洗脱、半制备高效液相色谱分离纯化，获得纯度高、抗过敏活性强的海藻多酚，这对提升海藻精深加工产业具有重要的指导意义。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种海藻多酚的制备方法，包括如下步骤：

4、(1)将海藻粉用乙醇提取后离心，得到残渣和上清液；

5、(2)将上清液过滤，得到海藻多酚粗提液；

6、(3)将海藻多酚粗提液用大孔树脂吸附，洗脱并收集得到海藻多酚。

7、作为优选，还包括海藻多酚提纯过程：利用分析型高效液相色谱查看洗脱后得到的海藻多酚的出峰情况与趋势，利用半制备型高效液相色谱分离出主要多酚色谱峰，得到纯化的海藻多酚。

8、作为优选，步骤(1)中所述海藻粉和乙醇的用量比为1g：8～12ml，所述乙醇的浓度为70～80％v/v。

9、作为优选，步骤(1)中所述海藻粉的粒径为60～100目，所述海藻粉的种类为羊栖菜(sargassumfusiforme)粉，步骤(1)中所述提取的方法为：将海藻粉和乙醇混合，在23～27℃、800～1200r/min条件下搅拌20～28h，步骤(1)中所述离心的转速为7500～8500r/min，所述离心的时间为8～12min。

10、作为优选，步骤(2)中所述过滤时采用孔径为30～50μm的滤纸。

11、作为优选，步骤(3)中所述大孔树脂为ab-8大孔树脂，所述大孔树脂使用前用2～3倍体积的浓度为93～97％v/v的乙醇浸泡20～28h，用去离子水漂洗，至排出的水无白色浑浊，依次用浓度为4～6％w/v的氢氧化钠溶液和4～6％w/v盐酸溶液浸泡，最后用离子水洗涤至中性。

12、作为优选，步骤(3)中所述吸附前将海藻多酚粗提液中的多酚含量调整至0.8～1.2mg/ml，所述吸附时进样的流速为1.8～2.2ml/min，所述洗脱时采用浓度为70～80％v/v的乙醇，所述洗脱时乙醇的流速为1.3～1.7ml/min，所述收集的方法为：洗脱体积为0ml～90ml时，每8～12ml收集一管，90ml～250ml时，每4～6ml收集一管，250ml～350ml时，每8～12ml收集一管。

13、作为优选，所述分析型高效液相色谱的条件为：

14、agilentxdb c18柱：18mm×250mm，5μm；

15、流动相为的a相为乙腈+0.008～0.012％甲酸，b相为超纯水+0.008～0.012％甲酸；

16、梯度洗脱程序为0～30min，a相和b相的体积比为5:95～25:75；30min～60min，a相和b相的体积比为25:75～45:55；流速为0.8～1.2ml/min，在270～290nm处检测紫外吸光度；

17、所述半制备型高效液相色谱的条件为：agilent 10prep c18，100mm×30mm，10μm。

18、本发明还提供了所述制备方法制备得到的海藻多酚。

19、本发明还提供了所述的海藻多酚在制备抗过敏产品中的应用。

20、本发明提供了一种海藻多酚及其制备方法和应用，所述制备方法包括如下步骤：(1)将海藻粉用乙醇提取后离心，得到残渣和上清液；(2)将上清液过滤，得到海藻多酚粗提液；(3)将海藻多酚粗提液用大孔树脂吸附，洗脱并收集得到海藻多酚。本发明通过使用乙醇浸提、大孔树脂动态洗脱实验、半制备高效液相色谱以获取高纯度抗过敏海藻多酚，相较于传统的多酚提取方法具有纯度更高、抗过敏活性更强的优势，减少了海藻本身含有的多糖、脂质的相互作用对终产物抗过敏多酚的影响，提升了所得纯化多酚终产物的抗过敏活性。本发明从海藻中获取天然抗过敏海藻多酚，实现了海藻的高值化精深加工利用。相较于现有的抗过敏活性物质的提取方式，本方法产量更高，制得的抗过敏多酚活性更强，安全性更高，是可在抗过敏领域发挥作用的潜在来源。

技术特征：

1.一种海藻多酚的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括海藻多酚提纯过程：利用分析型高效液相色谱查看洗脱后得到的海藻多酚的出峰情况与趋势，利用半制备型高效液相色谱分离出主要多酚色谱峰，得到纯化的海藻多酚。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述海藻粉和乙醇的用量比为1g：8～12ml，所述乙醇的浓度为70～80％v/v。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述海藻粉的粒径为60～100目，所述海藻粉的种类为羊栖菜粉，步骤(1)中所述提取的方法为：将海藻粉和乙醇混合，在23～27℃、800～1200r/min条件下搅拌20～28h，步骤(1)中所述离心的转速为7500～8500r/min，所述离心的时间为8～12min。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述过滤时采用孔径为30～50微米的滤纸。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述大孔树脂为ab-8大孔树脂，所述大孔树脂使用前用2～3倍体积的浓度为93～97％v/v的乙醇浸泡20～28h，用去离子水漂洗，至排出的水无白色浑浊，依次用浓度为4～6％w/v的氢氧化钠溶液和4～6％w/v盐酸溶液浸泡，最后用离子水洗涤至中性。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述吸附前将海藻多酚粗提液中的多酚含量调整至0.8～1.2mg/ml，所述吸附时进样的流速为1.8～2.2ml/min，所述洗脱时采用浓度为70～80％v/v的乙醇，所述洗脱时乙醇的流速为1.3～1.7ml/min，所述收集的方法为：洗脱体积为0ml～90ml时，每8～12ml收集一管，90ml～250ml时，每4～6ml收集一管，250ml～350ml时，每8～12ml收集一管。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述分析型高效液

9.权利要求1～8任意一项所述制备方法制备得到的海藻多酚。

10.权利要求9所述的海藻多酚在制备抗过敏产品中的应用。

技术总结
本发明涉及食品加工技术领域。本发明提供了一种海藻多酚及其制备方法和应用，所述制备方法包括如下步骤：(1)将海藻粉用乙醇提取后离心，得到残渣和上清液；(2)将上清液过滤，得到海藻多酚粗提液；(3)将海藻多酚粗提液用大孔树脂吸附，洗脱并收集得到海藻多酚。本发明的方法相较于传统的多酚提取方法具有纯度更高、抗过敏活性更强的优势，减少了海藻本身含有的多糖、脂质的相互作用对终产物抗过敏多酚的影响，提升了所得纯化多酚终产物的抗过敏活性。实现了海藻的高值化精深加工利用，产量更高，制得的抗过敏多酚活性更强，安全性更高，是可在抗过敏领域发挥作用的潜在来源。

技术研发人员：张自业,李振兴,赵一鸣,林洪
受保护的技术使用者：中国海洋大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15