一种铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法及应用

本发明属于医药，尤其涉及一种铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法及应用。

背景技术：

1、肿瘤是威胁人类生命的主要疾病之一，化疗是目前临床常用的肿瘤治疗方法，但化学化疗药毒副作用大等问题限制了其应用。化疗与其他治疗方法相结合的联合治疗是一种有效策略，其中化疗和光热联合治疗已成为目前研究的主要方向。光热疗法与化疗相结合可以明显/显著提高肿瘤治疗效果。然而目前的药物共递送体系仍存在载药效率低、药物容易提前泄露引起毒副作用，载体体内滞留导致长期毒性等问题。因此，如何筛选合适的制备方法和合理的药物组合，提高载药效率的同时降低化疗-光热的毒副作用，开发得到无毒或低毒的纳米药物是目前的主要挑战。

2、中药是我国的优质资源宝库，由于其来源丰富、成本低、多途径、多靶点等优点目前得到了越来越多的研究人员的关注。青蒿素（art）是一种临床使用的天然抗疟疾药物，具有低副作用、高安全性，同时也具有良好的抗肿瘤作用。进一步研究表明其结构中含有内过氧桥基团结构，可在fe2+等的介导下发生断裂，不依赖于肿瘤微环境中有限的h2o2及ph生成较稳定的碳基自由基，诱导细胞凋亡。然而由于其不溶于水且靶向性差等限制了其应用，此外，同时运输铁离子及青蒿素至肿瘤部位发挥增效作用也存在困难。如何提高铁及青蒿素共递送效率是个亟待解决的问题。

3、槲皮素（qc）是一种广泛分布于蔬菜、果皮和种子等中的天然活性成分，能有效地与多种金属离子配位形成化合物，具有良好的抗肿瘤效果。同时金属配合物在近红外区域有较强的吸收，可利用近红外照射产生热能，可用于光热治疗杀死肿瘤细胞，具有无创、副作用小的特点。同时其还能有效抑制热休克蛋白70的表达，提高细胞光热敏感性，适用于低温热疗，有效减少对正常组织的伤害。另外，在肿瘤微酸环境、活性氧等的影响下，槲皮素与金属离子之间的配位作用削弱，可用于肿瘤微环境响应降解、释放药物等。然而由于其不溶于水且肿瘤靶向性差等限制了其应用。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法及应用，利用青蒿素、槲皮素与铁离子配位自组装的相互作用，制备得到青蒿素、槲皮素载药量分别为40%，45%的高载药量的纳米中药，有效提高青蒿素、槲皮素的肿瘤靶向性，达到铁离子增效的效果，同时解决目前共载体系存在的缺陷，用于光热-化疗协同治疗具有极大应用前景。

2、为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

3、一种铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法，包括以下步骤：

4、s1.将青蒿素进行碱处理后，依次加入槲皮素溶液及铁的氯盐溶液，于室温下搅拌12h，超滤管离心收集后水洗三遍得青蒿素-铁-槲皮素纳米体系，其中青蒿素与槲皮素摩尔比为3~5：1，青蒿素与铁的摩尔比为1~4：1；

5、s2.将步骤s1制备的青蒿素-铁-槲皮素纳米体系按质量比为1：1超声分散在透明质酸水溶液中，于室温下搅拌12h，超滤管离心收集，水洗3遍，得透明质酸修饰青蒿素-铁-槲皮素纳米体系。

6、进一步的，青蒿素碱处理具体为，先将青蒿素溶于乙醇后加入等体积0.1m氢氧化钠于50℃处理30 min，再使用0.1m盐酸溶液调整ph至6.5~6.9，使反应液中青蒿素浓度为0.0025m。

7、利用铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法制备得到的青蒿素-铁-槲皮素纳米体系，青蒿素、槲皮素载药量分别为40%，45%；青蒿素具体检测方法为，将1 mg纳米颗粒分散到15 ml乙醇中，然后加入8 ml naoh（0.2%），并在45°c下混合30分钟。随后，向上述溶液中加入10 ml乙酸（0.08m），最后加入乙醇使溶液恒定为50 ml。收集上清液，使高效液相色谱测定青蒿素载药量。流动相由0.1%乙酸和乙腈（40/60，v/v）的混合物组成。流速为0.8 ml/min，紫外检测器的检测波长为360nm。槲皮素的具体检测方法为，取1mg纳米颗粒，使用紫外吸收光谱，利用槲皮素与铁配合物在433 nm处的紫外吸收测定槲皮素的载药量。

8、一种青蒿素-铁-槲皮素纳米体系在制备治疗肿瘤靶向光热化疗协同治疗药物中的应用。

9、本发明具有的优点是：

10、1.本发明提供的纳米中药的制备流程简单，成本低，具有实用性强及广阔的应用前景；

11、2.本发明提供的高效的透明质酸修饰青蒿素-铁-槲皮素抗肿瘤纳米中药，不仅提高了青蒿素与槲皮素的肿瘤靶向性，同时具有肿瘤微环境响应降解性能，实现肿瘤精准靶向治疗；

12、3.本发明提供的高效的透明质酸修饰青蒿素-铁-槲皮素抗肿瘤纳米中药具有良好的光热转化效果，同时实现铁离子增效光热-化疗协同治疗，能够更好的用于治疗肿瘤。

技术特征：

1.一种铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法，其特征在于：青蒿素碱处理具体为，先将青蒿素溶于乙醇后加入等体积0.1m氢氧化钠于50℃处理30 min，再使用0.1m盐酸溶液调整ph至6.5~6.9，使反应液中青蒿素浓度为0.0025m。

3.如权利要求2所述的铁离子增效的青蒿素-槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法制备得到的青蒿素-铁-槲皮素纳米体系，青蒿素、槲皮素载药量分别为40%，45%。

4.如权利要求3所述的青蒿素-铁-槲皮素纳米体系在制备治疗肿瘤靶向光热化疗协同治疗药物中的应用。

技术总结
本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种铁离子增效的青蒿素‑槲皮素协同治疗纳米体系的制备方法及应用，青蒿素和槲皮素由于存在不溶于水，肿瘤靶向效率低等限制了二者在抗肿瘤中的应用。为了克服二者的局限性，同时改善传统载药体系制备复杂、载药效率低的问题，本发明利用青蒿素、槲皮素与金属离子配位增效的相互作用，选用铁离子与二者进行配位自组装，通过简单的搅拌、离心方法制备了高效的青蒿素‑铁‑槲皮素纳米中药，并对其进行靶向修饰，实现肿瘤靶向治疗。本发明中的纳米体系制备方法简单，载药效率高，有效提高了难溶药物的肿瘤靶向效果，同时显示出铁离子增强的光热化疗协同治疗效果。

技术研发人员：唐含笑,张志娟,何志航,岑敏,宋颖,李晶莹,郑晓珂
受保护的技术使用者：河南中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16