一种靶向CD36抑制剂的制药应用

本发明属于生物医药，特别是涉及一种靶向分化聚类36(cluster ofdifferentiation 36,cd36)抑制剂的筛选，以及制备抑制多种恶性肿瘤中的药物应用。

背景技术：

1、分化聚类36(cluster of differentiation 36,cd36)是一种位于细胞表面的膜蛋白受体，可以结合并转运脂肪酸。cd36带有胞外环的二次跨膜蛋白cd36包括2个跨膜结构域、1个含有配体结合位点的大胞外域及n-端和c端的2个短细胞质尾。n-端跨膜区内的模体负责cd36分子的二聚化,c末端短细胞质尾可与src家族激酶(src-family proteintyrosine kinase,sfk)结合而启动大多数cd36介导的信号转导。胞外结构域的稳定性与3对二硫键桥密切相关,长胞外环形成的两个疏水口袋是cd36结合不同配体而发挥不同生物学功能的主要部位。入口1(entrance 1)的疏水口袋是配体的主要运输通道,包括氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-ldl)及晚期糖基化终产物(advancedglycation end products,ages)等。入口2(entrance 2)的疏水口袋在cd36的晶体结构研究中被认为可能为脂肪酸(fatty acid,fa)运输提供了通道。cd36与fa、血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,tsp-1)、ox-ldl及感染疟原虫的红细胞表面黏附蛋白pfemp1的主要结合位点分别是127—297位、93—120位(clesh结构域)、157—171位及97—110位氨基酸。

2、在正常人体中,cd36主要分布于脂肪、心肌、骨骼肌、乳房、结肠、十二指肠以及骨髓等组织中[8]。已有研究发现,cd36在肺癌、肝癌、乳腺癌等肿瘤组织中高表达。cd36的表达不仅具有组织特异性,也具有细胞特异性。正常人体中的cd36在多种免疫细胞和非免疫细胞表面表达,免疫细胞主要包括巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞、t细胞和b细胞亚群,非免疫细胞主要包括血小板、未成熟红细胞、足细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞、心肌细胞、内皮细胞和某些特殊上皮细胞。即使是在相同的组织中,不同的细胞类型表达cd36也有所不同。例如在肿瘤组织中,cd36在癌细胞表面的表达高于肿瘤基质组织的内皮细胞。此外,cd36还可能存在于内体、内质网和线粒体中,并可能通过囊泡转运在这些细胞器之间穿梭。

3、目前，对cd36在肿瘤中的研究甚少，市面上也没有理想效果cd36的抑制剂。我们发现cd36在肿瘤组织中的表达水平显著高于癌旁组织，其在肿瘤组织中明显升高，并且与患者生存率密切相关。因此，需要开发一种有效特异性的强的cd36小分子抑制剂成为目前亟待解决的问题。

技术实现思路

1、为解决上述现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一些具有cd36活性抑制的潜在活性小分子。

2、本发明的领域目的是提供这些化合物的应用。

3、本发明的目的可通过以下技术方案实现：

4、技术方案：本申请所述的6个具有cd36活性抑制的潜在活性小分子f449-4678，y501-4688,p132-0554,g748-0096,d294-4966,l977-0025,其结构如下所示：

5、

6、该cd36抑制剂基于cd36的晶体复合物结构从pdb数据库下载获得(pdb id:5lgd)；定义其膜外段(gly 30–asn 439)中共结晶小分子位点为分子对接活性位点；使用薛定谔软件包中glide对接算法对chemdiv商用化合物数据库进行虚拟筛选(准备后包括约250万化合物)；筛选后对排名前1000化合物分子进行基于lipinski类药规则、聚类分析等筛选，获得排序前100多样性分子进行后续实验检测。

7、本申请还公开了所述的cd36抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

8、本申请还进一步公开了所述cd36抑制剂在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用。

9、作为本发明的一种优选，所述的肿瘤选自非小细胞肺癌、胰腺癌、肝癌、乳腺癌。

10、进一步的，所述药物能抑制oxldl的摄取，同时抑制肿瘤细胞增殖，进而达到治疗肿瘤的效果。

11、有益效果：基于cd36蛋白结构通过virtual flow虚拟药物筛选平台，从药物靶点库(chemdiv)中筛选出评分在前100的小分子进行实筛，筛选抑制cd36蛋白功能的活性小分子，并且通过抑制oxldl摄取水平来表征cd36的活性小分子的有效性。在活性小分子中筛选出6个潜在活性化合物chemdiv id y501-4688,p132-0554,g748-0096,d294-4966,l977-0025,f449-4678。通过mst小分子与蛋白binding亲和力测试，dil-oxldl流式检测小分子抑制剂的ic50,cck-8检测细胞增殖；另外，通过llc-luc移植瘤小鼠上验证，小鼠给予活性小分子f449-4678能有效地抑制肿瘤的生长，进而达到抗肿瘤的作用。

技术特征：

1.如下所示的任意一种化合物在制备靶向cd36抑制剂中的应用，

2.权利要求1所述的任意一种化合物在制备抗肿瘤药物中的作用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤选自非小细胞肺癌、胰腺癌、肝癌、乳腺癌。

技术总结
本发明公开了一种靶向CD36抑制剂的制药应用。本发明基于CD36蛋白结构通过Virtual Flow虚拟药物筛选平台，从药物靶点库中筛选出评分在前100的小分子进行实筛，筛选抑制CD36蛋白功能的活性小分子，并且通过抑制oxLDL摄取水平来表征CD36的活性小分子的有效性。在活性小分子中筛选出包括F449‑4678在内的6个潜在活性化合物。通过MST小分子与蛋白binding亲和力测试，Dil‑oxLDL流式检测小分子抑制剂的IC50,CCK‑8检测细胞增殖；另外，通过LLC‑LUC移植瘤小鼠上验证，小鼠给予活性小分子能有效地抑制肿瘤的生长，进而达到抗肿瘤的作用。

技术研发人员：梁宏伟,黄海,赵柯宇
受保护的技术使用者：中国药科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/22