菌株发酵黄芪的方法及产物在抗病毒和增强免疫力产品中的应用与流程

本发明属于中药发酵，具体涉及一种菌株发酵黄芪的方法及产物在抗病毒和增强免疫力产品中的应用。

背景技术：

1、黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，是一种常用的扶正补气中药，可谓药食同源。黄芪除了能作为药用外，亦可开发成保健产品。现代医学研究证实，黄芪具有增强机体免疫力、保肝抗炎、固肾降压、抗肿瘤等药理活性和保健功效，且毒副作用小，无残留，现已被开发成免疫增强剂等产品，广泛用于人和动物疾病预防和免疫功能改善，并已取得理想效果。

2、黄芪的主要化学成分是皂苷类、黄酮类、多糖类、以及生物碱、有机酸、氨基酸和微量元素，其中皂苷和黄酮类是黄芪中最为重要的化学成分。黄芪皂苷类化合物从结构上主要为环阿屯烷型的四环三萜类皂苷，一般通过含有去乙酰酶和糖苷酶的微生物水解黄芪总皂苷中的乙酰基和糖基得到黄芪甲苷，其化学式为c41h68o14，黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。而环黄芪醇是黄芪皂苷的苷元部分，化学式为c30h50o5。

3、不同提取工艺对黄芪总皂苷提取效果的研究[j].中国兽药杂志，2016，50（12）24-28.公开了黄芪可经发酵提取总皂苷的释放量。中国专利文献cn102559828a公开了一种通过微生物转化黄芪总皂苷制备黄芪甲苷的方法，其包括步骤：将微生物菌种制成菌悬液或孢子悬浮液，接种于种子培养基中，28℃、220rpm培养24-48h即得种子液，再将种子液接种于发酵培养基中，28℃、220rpm培养24-48h，投入黄芪总皂苷，相同条件下转化48-96h，得转化液；转化液通过有机溶剂萃取和大孔树脂分离纯化得到黄芪甲苷纯品，其中微生物是伞枝犁头霉。中国专利文献cn106011213a公开了一种生物转化降解黄芪甲苷制备换黄芪醇的方法，其以黄芪甲苷为底物，通过菌种犁头霉absidia sp.cgmcc3.2843发酵得到环黄芪醇。由此可见，黄芪微生物发酵可得到的不同的产物，而选用怎样的技术手段能够实现黄芪甲苷的高效率转化，环黄芪醇的不转化或者低转化显着尤为重要。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明结合中药发酵技术，提供了一种菌株发酵黄芪的制备方法，该制备方法得到的黄芪发酵产物中黄芪甲苷含量高，且具有很好的增强免疫力和抗病毒的效果。

2、本发明采用如下技术方案实现上述目的

3、一种菌株发酵黄芪的方法，包括如下步骤：

4、（1）预处理：将黄芪粉末和水混合后超声条件下提取，随后调节ph至4.0-6.0，得到预处理液；

5、（2）酶解：向所述预处理液中加入酶制剂，在温度40-50℃下酶解20-40min，调节ph至6.5-7.0得到酶解液；

6、（3）灭酶提取：将所述酶解液在温度80-90℃下搅拌提取30-50min得到灭菌液；

7、（4）发酵：向所述灭菌液中加入发酵菌株并在温度25-30℃下发酵60min-90min得到发酵液，将所述发酵液固液分离，取上层得发酵清液；

8、（5）喷雾干燥：将所述发酵清液喷雾干燥得黄芪发酵产物；

9、其中所述酶制剂由纤维素酶和葡萄糖淀粉酶组成，所述发酵菌株由枯草芽孢杆菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种组成。

10、优选的，所述黄芪粉末同发酵菌株的重量比为（400-500）:1。

11、进一步优选的，所述黄芪粉末同发酵菌株的重量比为400:1。

12、优选的，所述枯草芽孢杆菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种的重量比为1:（1-2）。

13、进一步优选的，所述枯草芽孢杆菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种的重量比为1:1。

14、更进一步优选的，所述枯草芽孢杆菌的菌活为1000-5000亿cfu/g，所述肠膜明串珠菌乳脂亚种的菌活为20000-40000亿cfu/g。

15、更进一步优选的，所述枯草芽孢杆菌的菌活为2000亿cfu/g，所述肠膜明串珠菌乳脂亚种的菌活为3000亿cfu/g。

16、优选的，所述黄芪粉末同酶制剂的重量比（8-15）:1。

17、进一步优选的，所述黄芪粉末同酶制剂的重量比为13.3:1。

18、优选的，所述纤维素酶、葡萄糖淀粉酶的重量比为（1-3）:（0.5-2）。

19、更进一步优选的，所述纤维素酶和葡萄糖淀粉酶的重量比为2:1。

20、优选的，所述纤维素酶的酶活为1-2万u/g，所述葡萄糖淀粉酶的酶活为 5-7万u/g。

21、更进一步优选的，所述纤维素酶的酶活为2万u/g，所述葡萄糖淀粉酶的酶活为6万u/g。

22、优选的，所述黄芪粉末同水的重量比1:（100-500）。

23、进一步优选的，所述步骤（1）中超声的温度为35-50℃，时间为30-60min。

24、更进一步优选的，所述步骤（1）中超声的温度为40℃，时间为50min。

25、优选的，所述黄芪粉末为黄芪经粉碎后过20目筛得到。

26、进一步优选的，步骤（5）中喷雾干燥的进风口温度为100-130℃，出风口温度为30-50℃。

27、本发明提供的上述菌株发酵黄芪的方法得到的黄芪发酵产物在制备增强免疫力或抗病毒食品、保健品、化妆品、医用品等产品中的应用。

28、本发明技术方案，具有如下优点：

29、1. 本发明提供了一种菌种发酵黄芪的方法，黄芪粉末依次经过超声预处理，酶解，灭酶提取和发酵步骤，其中酶制剂选用纤维素酶和葡萄糖淀粉酶，发酵菌株选用枯草芽孢杆菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种，经上述方法能提高黄芪甲苷的转化率，得到的黄芪发酵产物中黄芪甲苷含量高，且能控制环黄芪醇的含量低于2.2%。

30、2 本发明提供的菌株发酵黄芪的方法，该方法通过微生物转化制备黄芪甲苷，方法简单，适合工业化生产。

31、3 本发明提供的菌株发酵黄芪的方法得到的黄芪发酵产物具有很好的增强免疫力和抗病毒的效果，可用于增强免疫力和抗病毒产品的开发。

技术特征：

1.一种菌株发酵黄芪的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述黄芪粉末同发酵菌株的重量比为（400-500）:1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种的重量比为1:（1-2）。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的菌活为1000-5000亿cfu/g，所述肠膜明串珠菌乳脂亚种的菌活为20000-40000亿cfu/g。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述黄芪粉末同酶制剂的重量比（8-15）:1，其中纤维素酶、葡萄糖淀粉酶的重量比为（1-3）:（0.5-2）。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述纤维素酶的酶活为1-2万u/g，所述葡萄糖淀粉酶的酶活为 5-7万u/g。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述黄芪粉末同水的重量比1:（100-500）。

8.根据权利要求1所述的方法，所述步骤（1）中超声的温度为35-50℃，时间为30-60min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述黄芪粉末为黄芪经粉碎后过20目筛得到；步骤（5）中喷雾干燥的进风口温度为100-130℃，出风口温度为30-50℃。

10.一种根据权利要求1-9任一所述的方法得到的发酵产物在抗病毒和增强免疫力产品中的应用。

技术总结
本发明属于中药发酵技术领域，具体涉及一种菌株发酵黄芪的方法及产物在抗病毒和增强免疫力产品中的应用。其制备方法包括如下步骤（1）将黄芪粉末和水再超声条件下提取后，调节pH至4.0‑6.0，得到预处理液；（2）向所述预处理液中加入酶制剂在温度40‑50℃下酶解20‑40min，随后调节pH至6.5‑7.0得到酶解液；（3）将所述酶解液在温度80‑90℃下搅拌提取30‑50min得到灭菌液；（4）向所述灭菌液中加入发酵菌株并在温度25‑30℃下发酵60min‑90min得到发酵液，将所述发酵液固液分离，取上层得发酵清液；（5）将所述发酵清液喷雾干燥得黄芪发酵产物，得到的黄芪发酵产物中黄芪甲苷含量高。

技术研发人员：宋帅,蔡金文,王海轩,潘迎春
受保护的技术使用者：江苏菌钥生命科技发展有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/9