漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病药物中的应用

本发明属于水产养殖动物细菌性疾病防控，涉及漆黄素的新适应症，具体涉及漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病药物中的应用。

背景技术：

1、“弧菌病”，即弧菌属细菌引起的疾病，目前该病在全世界范围内的海水养殖场广泛流行。弧菌病大多具有发病快、感染力强、发病率和死亡率高的特点，给海水养殖业带来了巨大经济损失。其中哈维氏弧菌(vibrio harveyi)是弧菌病的主要病原，哈维氏弧菌可以感染凡纳对虾、大菱鲆、石斑鱼等养殖动物，感染鱼类主要症状有体色变黑、眼球突出、体表溃疡、肝脾组织充血和肠炎等症状。目前海水养殖动物弧菌病的防治仍以免疫和抗生素为主，血清学多样性和遗传变异限制了弧菌疫苗的开发和降低其应用效果，而抗生素和化学类药物的长期使用和滥用，使得弧菌对该类产生耐药性，耐药谱不断扩大，用药效果不断下降，导致养殖户不得不加大用药剂量，造成药物残留、环境污染、养殖环境微生态失衡和耐药因子传播至人畜病原等负面影响，严重威胁公共卫生安全和公众健康。天然化合物是生物体内的次生代谢物或内源性活性物质，具有绿色安全、低残留、低毒、多功能和低耐药等优势。

2、病原微生物致病主要依赖于其毒力因子，包括粘附、定植、侵染、传播、扩散、免疫逃避和耐药等相关毒力因子。生物膜是哈维氏弧菌的主要毒力因子之一。哈维氏弧菌在水体中主要以菌体聚集粘结在一起分泌黏性物质形成生物膜的形式生存。其生物膜主要成分为多糖、核酸、脂类和蛋白等。哈维氏弧菌生物膜的功能主要包括：增强哈维氏弧菌对抗生素、外界环境压力及宿主免疫的抵抗力；降低哈维氏弧菌的营养消耗，延长其生存时间；增强哈维氏弧菌对ph、渗透压、营养和气体交换等外界环境条件的应答能力；提高哈维氏弧菌菌体抗药、抗机体免疫等。有研究表明生物膜上菌体耐药率相比浮游菌高达1000倍。因此，抑制哈维氏弧菌生物膜的形成或降解已形成的哈维氏弧菌生物膜是降低其致病力和耐药性的重要策略。

技术实现思路

1、本发明解决的技术问题是提供一种防治海水养殖动物哈维氏弧菌病的天然药物，即漆黄素。

2、本发明研究发现，漆黄素可应用于制备防治海水养殖动物弧菌病药物中。

3、在本发明的一个实施方式中，所述的海水养殖动物弧菌病的致病菌为哈维氏弧菌。

4、在本发明的一个实施方式中，所述海水养殖动物为石斑鱼。在一个具体实施例中，所述海水养殖动物为珍珠龙胆石斑鱼。

5、在本发明的一个实施方式中，将漆黄素制备成浸泡药液或将漆黄素与药学上可接受的载体和赋形剂一起制备的不同剂型药物。

6、在本发明的一个实施方式中，浸泡药液的制备方法包括：称取适量的漆黄素用无水乙醇助溶后，加到海水里使漆黄素终浓度为32μg/ml或64μg/ml，而无水乙醇终浓度为0.5％。

7、在本发明的一个实施方式中，漆黄素浸泡药液的有效治疗浓度为32μg/ml。

8、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

9、1.本发明首次将漆黄素作为药浴的药物应用于防治海水养殖动物弧菌病，尤其防治于石斑鱼的哈维氏弧菌病，在有效剂量内可以提高感染哈维氏弧菌石斑鱼的存活率，相对保护率达到45％～50％。

10、2.本发明中的漆黄素来源广、残留低、无污染、绿色安全、可工业化生产工艺、质量可控、疗效稳定等优点。

11、3.本发明所公开的防治海水养殖动物弧菌病漆黄素对哈维氏弧菌的最小抑菌浓度(mic)和最小杀菌浓度(mbc)分别为64μg/ml和256μg/ml。漆黄素对哈维氏弧菌生物膜的半数有效浓度(median effective concentration，ec50)是9.53±1.32μg/ml。意味着在合适的剂量下，漆黄素可以在不杀死哈维氏弧菌的情况下，大大降低该菌的致病性，在不诱导菌生存压力产生耐药突变的情况下控制其感染。漆黄素有望作为开发新病原菌毒力抑制剂的先导化合物，有效解决当前弧菌乃至细菌性疾病耐药的难题。

技术特征：

1.漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病的应用，特征在于：所述的海水养殖动物弧菌病的致病菌为哈维氏弧菌。

3.根据权利要求1所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病中的应用，其特征在于：所述海水养殖动物为石斑鱼。

4.根据权利要求3所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病中的应用，其特征在于：所述海水养殖动物为珍珠龙胆石斑鱼。

5.根据权利要求1所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病中的应用，其特征在于：将漆黄素制备成浸泡药液或将漆黄素与药学上可接受的载体和赋形剂一起制备的不同剂型药物。

6.根据权利要求5所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病中的应用，其特征在于：浸泡药液的制备方法包括：称取适量的漆黄素用无水乙醇助溶后，加到海水里使漆黄素终浓度为32μg/ml或64μg/ml，而无水乙醇终浓度为0.5％。

7.根据权利要求5所述的漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病中的应用，其特征在于：漆黄素浸泡药液的有效治疗浓度为32μg/ml。

技术总结
本发明属于水产养殖动物细菌性疾病防控技术领域，涉及漆黄素的新适应症，具体涉及漆黄素在制备防治海水养殖动物弧菌病药物中的应用。本发明首次发现天然化合物漆黄素抑制哈维氏弧菌毒力因子生物膜形成，应用于防治海水养殖动物类弧菌病，尤其防治于石斑鱼的哈维氏弧菌病，最高可提高感染哈维氏弧菌病石斑鱼的相对存活率50％。本发明中漆黄素作为一种抑制弧菌主要毒力因子生物膜形成的天然化合物，具有绿色、安全、高效、低耐药概率等优势，在防治海水养殖动物弧菌病、水产动物细菌性疾病方面具有很好的应用潜力。

技术研发人员：郭伟良,王琰,林明孝,周永灿,赵子晨,向明丽,邓恒为,钟志鸿,王世锋,孙云,张冬冬,李建龙
受保护的技术使用者：海南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/12/19