载miR-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法与流程

本发明涉及纳米材料，具体为载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法。

背景技术：

1、前期高通量分析发现与对照组小鼠相比，急性肺损伤小鼠mir-143-3p表达量显著降低，且实验结果显示mir-143-3p是治疗急性肺损伤的潜在靶点，但mir-143-3p易于被rna酶降解，细胞内化率较低；常用的二氧化硅纳米材料在水中容易发生团聚和沉淀，且细胞内化率低。所以我们提出了柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料载mir-143-3p的制备方法，以便于解决上述中提出的问题。

2、本背景技术所公开的上述信息仅仅用于增加对本发明背景技术的理解，因此，其可能包括不构成本领域普通技术人员已知的现有技术。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供载mir-143-3p的柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，以解决上述背景技术提出的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：载mir-143-3p的柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，包括如下步骤：

3、步骤1、将0.16g ctab溶解在70ml水+30ml无水乙醇+1ml氨水混合物中，搅拌均匀，得到混合液；

4、步骤2、将0.125mlteos和0.1mltets混合后加入步骤1的混合液中，搅拌均匀，离心收集，无水乙醇洗涤3次，得到沉淀物；

5、步骤3、将步骤2的沉淀物置于naoh水溶液中，室温下蚀刻20min，离心收集，i级水洗涤3次，得到产物一；

6、步骤4、将步骤3的产物一加入50μl浓盐酸和100ml乙醇的混合溶液中，高温作用一段时间，重复此操作3次，无水乙醇洗涤3次后，离心收集，得到介孔有机氧化硅纳米球；

7、步骤5、将0.065g介孔有机氧化硅纳米球分散在含1.1ml二恶烷、0.3ml水和0.10g三苯基膦的混合溶液中，然后用去离子水洗涤三次，得到柔性介孔有机氧化硅纳米球(hmons)，去离子水洗涤3次，12000rpm离心收集；

8、步骤6、将12mg还原的hmons与1.2mln，n-二甲基甲酰胺和3.24mg peg-mal在室温下混合，然后加入1.2mg cy5.5-mal在室温下混合，得到peg和cy5.5修饰的柔性介孔有机氧化硅纳米球(hmons-peg@cy5.5，nps)；

9、步骤7、将1mg柔性介孔有机氧化硅纳米球分散于1ml水中后，然后加入聚乙烯亚胺(pei)水溶液，并进行超声分散30分钟，得到nps@pei；

10、步骤8、将nps@pei离心并在乙醇和水中洗涤三次，将nps@pei分散在125μl mir-143-3p溶液中，在室温下孵育，最后获得nps@pei@mir-143-3p。

11、优选的，所述的步骤1中，35℃下搅拌至少60min。

12、优选的，所述的步骤2中，35℃下搅拌24h，12000rpm离心收集。

13、优选的，所述的步骤3中，naoh水溶液浓度为0.48mol/l，12000rpm离心收集。

14、优选的，所述的步骤4中，60℃下作用3h，12000rpm离心收集。

15、优选的，所述的步骤5中，分散120min。

16、优选的，所述的步骤6中，前者在室温下混合12h，后者在室温下混合12h。

17、优选的，所述的步骤7中，pei与nps的质量比为2：0.5。

18、优选的，所述的步骤8中，nps@pei与mir-143-3p在室温下孵育20min，nps表面通过修饰pei成功加载mir-143-3p，且mir-143-3p溶液浓度为20μmol/l。

19、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

20、本发明的柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料是一种中空塌陷的结构，具有较大的空腔、薄的壳厚和丰富的有机成分，更容易被细胞吸收；在表面修饰peg-mal，使可溶于水；本发明合成柔性中空介孔二氧化硅纳米材料用于装载mir-143-3p，可保护mir-143-3p免于被rna酶降解，提高mir-143-3p的细胞内化率，给mir-143-3p提供一个较稳定的递送系统。

21、上述概述仅仅是为了说明书的目的，并不意图以任何方式进行限制。除上述描述的示意性的方面、实施方式和特征之外，通过参考附图和以下的详细描述，本发明进一步的方面、实施方式和特征将会是容易明白的。

技术特征：

1.载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤1中，35℃下搅拌至少60min。

3.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤2中，35℃下搅拌24h，12000rpm离心收集。

4.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤3中，naoh水溶液浓度为0.48mol/l，12000rpm离心收集。

5.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤4中，60℃下作用3h，12000rpm离心收集。

6.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤5中，分散120min。

7.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤6中，前者在室温下混合12h，后者在室温下混合12h。

8.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤7中，pei与nps的质量比为2：0.5。

9.根据权利要求1所述的载mir-143-3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，其特征在于：所述的步骤8中，nps@pei与mir-143-3p在室温下孵育20min，nps表面通过修饰pei成功加载mir-143-3p，且mir-143-3p溶液浓度为20μmol/l。

技术总结
本发明公开了载miR‑143‑3p柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料的制备方法，涉及纳米材料技术领域。本发明包括如下步骤：步骤1、将0.16g CTAB溶解在70mL水+30mL无水乙醇+1mL氨水混合物中，搅拌均匀，得到混合液；步骤2、将0.125mL TEOS和0.1mLTETS混合后加入步骤1的混合液中，搅拌均匀，离心收集，无水乙醇洗涤3次，得到沉淀物。本发明的柔性中空介孔有机氧化硅纳米材料是一种中空塌陷的结构，具有较大的空腔、薄的壳厚和丰富的有机成分，更容易被细胞吸收；在表面修饰PEG‑MAL，使可溶于水；本发明合成柔性中空介孔二氧化硅纳米材料用于装载miR‑143‑3p，可保护miR‑143‑3p免于被RNA酶降解，提高miR‑143‑3p的细胞内化率，给miR‑143‑3p提供一个较稳定的递送系统。

技术研发人员：闵思敏,刘玉岭,关静文
受保护的技术使用者：安徽省宿州市立医院
技术研发日：
技术公布日：2025/1/16