专利名称:新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物的制备方法
在此以前，4′-去甲基-表鬼臼酯素-β-D-亚乙基苷[通常称为足叶乙甙(etoposide)]作为一种具有抗肿瘤活性的化合物，已为人们所知(例如美国专利3，524，844)。
上述足叶乙甙显示出较好的抗肿瘤活性，但是，因为其溶解度极低，不论是用注射还是用口服途径向人们给药，通常都相当困难。
以解决这一问题而进行的种种研究的结果，本发明人已发现如下所指的式(Ⅰ)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物及其盐类显示出极好的抗肿瘤活性，而且在水中还有高度溶解性，基于这个发现才完成了本发明。
在本发明中，“低级烷基”这个词是指具有1-5个最好是1-3个碳原子的烷基，此烷基也可是支链的。
本发明涉及新的式(Ⅰ)4′-去甲基-表鬼臼酯素衍生物以及这些衍生物的盐。
(其中，R1是低级烷基，X1和X2分别是羟基和被1个或2个低级烷基所取代的氨基中的一个，倘若X1和X2中的一个是被1个或2个低级烷基所取代的氨基，那么另一个就是羟基)。
式(Ⅰ)4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物能从式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物容易地取得。
(其中，R1是低级烷基;Xa和Xb分别是羟基和氨基中的一个，倘若Xa和Xb中的一个是羟基，则另一个是氨基。)(见未实审已公布的日本专利申请，卷号32799/1985)这些未取代氨基糖衍生物与式(Ⅲ)R2CHO的醛(其中R2是氢或低级烷基)在惰性溶剂中反应，所得的席夫碱用一种金属-氢配位化合物，如氢硼化钠，进行还原以提供出式(Ⅰ)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物。
式(Ⅰ)R1的例子包括甲基、乙基、丙基和丁基，特别好的是甲基。式(Ⅲ)R2的例子包括氢、甲基、乙基和丙基。
式(Ⅰ)中X1或X2为低级烷基取代的氨基的例子包括二-低级烷基-取代氨基(如二甲氨基和二乙氨基)和单一低级烷基-取代氨基(如单乙氨基)。
适合于本发明使用的金属-氢配位化合物包括碱金属氢硼化物(如氢硼化钠、氢硼化锂和氢硼化钾)、碱金属氢硼化物的氰化物和硫化物(如氰基氢硼化钠，氢硼化钠-硫)，以及碱金属氢铝化物(如氢铝化锂)。
式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物和式(Ⅲ)醛的反应，在温度为-40℃至所用溶剂的沸点之间进行，最好的温度大约为0℃-100℃，通常反应在室温进行。
式(Ⅲ)醛用量通常的范围约为0.5-5摩尔/每摩尔式(Ⅱ)未取代氨基糖衍生物。如果醛的使用量约在0.5-1.5摩尔/每摩尔式(Ⅱ)衍生物，则具有Xa或Xb为单一低级烷基氨基的化合物为优势反应产物，如果醛的用量大于约1.5摩尔，则具有Xa或Xb为二-低级烷基氨基的化合物为优势产物。
所得席夫碱的还原反应可在从-40℃最好是从-20℃至溶剂中的沸点之间进行，通常反应是在5℃-30℃范围内进行的。
任何惰性溶剂均可在反应中使用，一般则使用乙腈或二氯甲烷。
通式(Ⅰ)的化合物与酸反应生成盐，最好是生成适合药用的盐。适合于成盐的酸可以是无机酸，也可以是有机酸，只要盐是无毒性的均可用。对这些无机酸和有机酸未提出特殊限制，但最好的无机酸是盐酸、硫酸、硝酸和磷酸;最好的有机酸是乙酸、丙酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苹果酸和酒石酸，戊二酸、柠檬酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、夫冬氨酸和谷氨酸。
依照本发明将化合物的典型例子列举如下
(ⅰ)4-O-(2-去氧-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物Ⅰ);
(ⅱ)4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物2);
(ⅲ)4-O-(3-去氧-3-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物3)。
从下列实验数据可清楚地看到本发明化合物与足叶乙甙相比显示了极好的抗肿瘤活性和增大了的水溶性。
1)抗肿瘤试验
给小鼠腹腔内植入105小鼠白血病L1210细胞。24小时后，将溶于5%葡萄糖溶液中的本发明化合物Ⅰ的盐酸盐腹腔注射给小鼠，每天给药一次，连续5天，随后观察30天，小鼠生命延长的百分率由下式确定
生命延长百分率＝ (治疗组生存的平均天数)/(对照组生存的平均天数) ×100
对照组仅注射5%葡萄糖水溶液，生存的平均天数为7.8天。
以2.5毫克/公斤/日剂量接受化合物1的小鼠其延命率在385%以上，并且所有的小鼠均在实验中存活下来。
以10毫克/公斤/日剂量接受足叶乙甙的小鼠，其延命率在321%以上，并且，五只动物中有三只在实验中存活下来，当足叶乙甙给药剂量为5毫克/公斤/日时，小鼠延命率为208%。
(2)水中溶解度
足叶乙甙的水中溶解度是0.1毫克/毫升，与此相比，4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物1)盐酸盐的溶解度值为15毫克/毫升以上。
通过下面的实例对本发明化合物的合成方法做更为详细的描述。
实施例1
4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素(化合物1)的合成。
将500毫克的4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素悬浮在5毫升乙腈中，向悬浮液中加入0.2毫升37%的甲醛水溶液，用五分钟时间，分成三次向混合物中加氰基氢硼化钠(总共150毫克)。
反应30分钟后，100毫升的二氯甲烷加入反应混合物中，然后用30毫升水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩，浓缩物用硅胶色谱法分离并提纯，得430毫克4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素。
熔点196-198℃(从丙酮中结晶)
比旋度〔α〕23D-114°(CHCl3)
质谱 次级离子 质谱 616(M+H)+
核磁共振(CDCl3)
δ 1.41(3Hd，CH3)
δ 2.26(6Hs，N(CH3)2)
δ 3.76(6Hs，-OCH3)
δ 6.01(2Hs，-O-CH2-O-)
δ 6.23(2Hs，H-2′，6′)
δ 6.58(1Hs，H-8)
δ 6.75(1Hs，H-5)
实施例2
4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素的合成。
将60毫克的4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素溶解在1毫升乙腈中。将6微升的乙醛加到溶液中，在混合物冷却到-20℃以后，加入15毫克的氰基氢硼化钠，反应进行15分钟。使反应混合物温热到室温，与20毫升二氯甲烷混合，再用10毫升水洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥并进行浓缩，用硅胶薄层色谱板进行分离和纯化，由此得出40毫克4-O-(2-去氧-2-乙氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素。
熔点208℃-210℃(盐酸盐)
比旋度〔α〕24D-90°(三氯甲烷)
质谱 次级离子质谱 616(M+H)+
化合物3，即4-O-(3-去氧-3-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素，除了用4-O-(3-去氧-3-氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素代替4-O-(2-去氧-2-氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素以外，可用重复上述步骤的方法而获得。
权利要求
1、一种制备新的式(I)4′-去甲基-4-表鬼臼酯素衍生物及其盐的方法，
(其中，R1是低级烷基；X1和X2分别是羟基和被1个或2个低级烷基所取代的氨基中的1个，倘若X1和X2当中的一个是被1个或2个低级烷基所取代的氨基，则另一个是羟基)其制备方法包括用式(Ⅲ)R2CHO的醛(其中，R2是氢或低级烷基)在惰性溶剂中与式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物反应并且还原所生成的席夫碱。
(其中R1是低级烷基；Xa和Xb分别是羟基或氨基中的一个，倘若Xa和Xb当中的一个是羟基，则另一个是氨基)。
2、根据权利要求
1所述的方法，其中，R1和R2是具有1-3个碳原子的低级烷基。
3、根据权利要求
1所述的方法，其中，R1是甲基。
4、根据权利要求
1所述的方法，其中式(Ⅲ)醛的使用量约为0.5-5摩尔/每摩尔式(Ⅱ)未取代的氨基糖衍生物。
5、根据权利要求
1所述的方法，其中，式(Ⅱ)未取代氨基糖衍生物与(Ⅲ)醛的反应温度在-40℃至溶剂的沸点之间，而席夫碱还原的温度在-20℃至溶剂的沸点之间。
6、根据权利要求
1所述的方法，其中，席夫碱用金属-氢配位化合物来还原。
7、根据权利要求
5所述的方法，其中，金属-氢配位化合物是碱金属氢硼化合物或碱金属氢铝化合物。
8、制备4-O-(2-去氧-2-二甲氨基-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素及其盐的方法，其中包括用甲醛与4-O-(2-氨基-2-去氧-4，6-O-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-去甲基-4-表鬼臼酯素反应，然后用碱金属氢硼化合物或碱金属氢铝化合物还原所生成的席夫碱。
专利摘要
本发明涉及到式(I)新的4′-去甲基-4-表鬼臼酯素及其盐。(其中，R1是低级烷基；X1和X2分别是羟基或被1个或2个低级烷基所取代的氨基中的一个，倘若X1和X2中的一个是被1个或2个低级烷基所取代的氨基，则另一个是羟基)。
文档编号A61P35/00GK86101960SQ86101960
公开日1986年11月12日 申请日期1986年3月27日
发明者梅泽浜夫, 竹内富雄, 近藤信一, 田中亘, 泷田智久, 西村吉男, 好川博 申请人:财团法人微生物化学研究会导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan