专利名称：8位取代黄嘌呤作为选择性腺苷受体药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及到一组化合物，它们是选择性地作用于腺苷受体的黄嘌呤衍生物。
50多年以前第一次认识到腺苷强烈的降血压作用，镇静作用，抗痉挛作用和舒血管作用。随后，提出来的腺苷的一系列生物作用明显增加。出现在许多细胞上的腺苷受体都与腺苷酸环化酶相联系。近年来为了研究这些受体的功能已经引进了各种各样的腺苷类似物。烷基黄嘌呤，例如咖啡因以及茶碱就是最熟悉的腺苷受体拮抗剂。
也许腺苷代表了一类普通调节的物质，这是因为没有发现对它的形成专一负责的具体细胞类型或组织。在这方面，腺苷不同于许多内分泌激素。没有任何证据表明腺苷是由神经细胞或其它细胞贮存或释放的。因此，腺苷与各种神经递质不同。
腺苷可以与生理调节剂前列腺素比较。在两种情况下，包括在代谢形成中的酶都普遍存在，而且似乎都对细胞的生理状况的改变负责。腺苷受体，象前列腺素受体一样已被证明非常普遍。最后，前列腺素和腺苷似乎都与钙离子的调节功能有关。当然，前列腺素来自于膜前体，而腺苷来自于胞液前体。
虽然腺苷可以影响各种生理功能，但多年来对于其可以导致临床应用却给予了特殊的重视。腺苷的心血管作用一直是优秀的，它可以导致舒张血管和降低血压，但它也会导致心脏病。腺苷的抗脂肪分解作用，抗栓作用以及抗痉挛作用已经引起了人们的一些注意。腺苷刺激肾上腺细胞的甾类产生。这很可能又是通过苷腺酸环化酶的活化。腺苷有抑制神经传递作用和抑制中枢神经自发活性的作用。最后，腺苷的支气管收缩作用以及黄嘌呤对它的拮抗作用代表了一个重要的研究领域。
现在已经认识到有不止一种而是至少有两种细胞外受体与腺苷的作用有关系。这些受体中的一种对于腺苷具有高的亲和力，并至少在一些细胞中它以抑制方式与腺苷酸环化酶偶联。一些人称这些受体为A-1受体。其它种类的受体对于腺苷具有较低的亲和力，在许多细胞类型中以刺激的方式与腺苷酸环化酶相联系。这些受体被称为A-2受体。
现在用各种结构类似物表现腺苷受体的特性已经成为可能。腺苷类似物阻止代谢作用或者吸收作用的机制已经变得成为可能。这些都非常有价值，因为它们的明显的效力已不受从有效系统中清除代谢的影响。在A-1和A-2腺苷受体上，腺苷类似物显示不同级别的效力，从而提供了一种根据生理应答将腺苷受体性质分类的简单方法。阻断腺苷受体(拮抗作用)提供了另一种根据应答将腺苷受体分类的方法。应当注意开发对于A-1或A-2腺苷受体的特异性拮抗剂在这个研究领域代表一个重要进展，开发在动物身上具有特殊的生理作用的腺苷受体选择性的药物制剂同样代表一个重要的突破。
本发明涉及到具有下述通式的化合物， 包括(R)和(S)对映异构体和它们的外消旋混合物以及它们的可以药用的盐，其中R1和R2是各自独立为(C1-C4)低级烷基或(C2-C4)低级烯基，Z为 其中R3为氢，(C1-C3)低级烷基，硝基，氨基，羟基，氟，溴或氯，R4为(C1-C4)低级烷基，n为1或2。
用于本申请中的术语(C1-C3)低级烷基为甲基，乙基，正丙基或异丙基。用于本申请中的术语(C1-C4)低级烷基为甲基，乙基，正丙基、异丙基、正丁基，异丁基，仲丁基或叔丁基。
另外，用于本申请的术语(C2-C4)低级烯基为乙烯基、丙烯基，异丙烯基，丁烯基，异丁烯基等等。
用于本申请中的R3表示的取代基，可以在苯环2-6位任何一个位置上，或者是在1，2，3，4-四氢萘基环5-8位上，环上可有至多三种独立的取代基，这些取代基不包括氢。
通常，本发明的化合物可以通过下述反应路线I和反应路线II详细描述的步骤合成。
反应路线I 恰当的烷基取代的起始化合物1，6-氨基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮，其中R1和R2的定义同上。
6-氨基-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮悬浮在20％的醋酸水溶液中，分次加入亚硝酸钠水溶液(1.5当量)，同时加入浓盐酸保持溶液呈中等程度的酸性。悬浮液搅拌数小时。然后过滤，滤液用水洗，真空干燥，得到一个紫色的烷基取代的6-氨基-5-亚硝基-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮(2)。
然后将烷基取代的6-氨基-5-亚硝基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮悬浮在水中，用50％氢氧化铵调至强碱性(pH≈11)，加过量的连二亚硫酸钠使紫色消褪。然后，反应液用氯仿萃取。合并有机相萃取液，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。残留物用闪式层折法纯化(5％到10％甲醇氯仿溶液洗脱)。所得到的产物用10％异丙醇/己烷重结晶得到烷基取代的5，6-二氨基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(3)。见J.W.Daly，J.Med.Chem.，28，487，1985。
从反应路线I路线合成的化合物3按照反应路线II表示的路线反应。所有取代基按前所述定义。
反应路线II
R1′and R2′＝(C2-C4)低级烷基在反应路线II路线中，步骤A是将烷基取代的5，6-二氨基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(3)与结构(3a)所定义的适当取代的酸在本领域己知的条件下进行酰胺化反应，得到一个适当的结构式(4)描述的取代酰胺。
例如，一个适当的取代的酸(3a)溶解在合适的有机溶剂中，如溶解在四氢呋喃中。适当的取代酸的例子是3-苯基丁酸，1，2，3，4-四氢-2-萘甲酸以及反式-2-苯基环戊羧酸。将一个当量的N-甲基吗啉加入到上面的溶液中，然后冷至-20℃。加入一个当量的氯甲酸异丁酯，反应混合物搅拌大约20分钟。将一个当量的烷基取代的5，6-二氨基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(3)溶解在合适的有机溶剂中，如二甲基甲酰胺，得到的溶液加至上面的反应液中，反应在-20℃搅拌大约3小时。然后反应液用适当的有机溶剂，如乙醚，稀释，分别用饱和的碳酸氢钠水溶液50或％饱和的氯化钠水溶液洗，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，得到一个适当的取代酰胺(4)。
在反应路线II路线中，步骤B是在如Pect et al.，J.Med.chem.，33，3127，(1990)所描述的已知的技术条件下，将酰胺(4)进行的环化反应，得到一个适当取代的1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤，如结构(5)所描述。
例如，适当的取代的酰胺(4)溶解在合适的有机溶剂，如乙醇中，溶液用10％-20％的合适的碱溶液，如氢氧化钾水溶液处理。然后反应液加热，从40℃-60℃，加热大约1到6小时。然后将反应液冷却，用合适的酸如盐酸酸化。用合适的有机溶剂，如乙醚将粗产品从水溶液中萃取出来。合并的有机相用水洗，饱和的氯化钠水溶液洗，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。另一种做法是把沉淀的粗产品上述酸化的水溶液过滤来分离。残留物或者收集的沉淀物用众所周知的技术，如径向层析方法纯化，使用合适的洗脱剂，如乙酸乙酯/己烷混合溶剂洗脱，得到相应取代的1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤(5)。
在反应路线II路线中，任意的步骤C是1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤(5)氢化，其中1，3-二烷基取代基R1和R2是(C2-C4)低级烷烯基，得到相应取代的1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤(6)，其中1，3-二烷基取代基的R1’和R2’是(C2-C4)低级烷基。
例如，将相应取代的1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤(5)，如1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤溶解在适当的有机溶剂，如甲醇中，加入催化剂量的适当氢化催化剂，如钯碳，反应置于氢气流下搅拌大约30分钟到4小时。然后反应用惰性气体，如氮气吹扫清洗，过滤，在真空下浓缩，残留物用众所周知的技术，如径向层析法纯化，使用适当的洗脱剂，如乙酸乙酯/环己烷，得到相应取代的1，3-二烷基-8-取代的黄嘌呤(6)。
下面列出根据本发明制备的化合物8-(2-苯丙基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮；1，3-二丙基-8-(1，2，3，4-四氢萘-2-基)-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮；以及8-(反式-2-苯基环戊基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮。
选择性腺苷受体药物的治疗应用。
下表更详细地说明本发明的选择性腺苷受体药物的潜在治疗效用。
在心血管，肺和肾系统目标中，通过受体结合研究鉴定的设计化合物可以用体内试验评价它的功能，体内试验直接预示人的生理应答。M.Williams，Ann.Rev.pharmacol.Toxicol.，27，31(1987)对嘌呤受体的药理性质和功能进行了详细描述。在题为“腺苷受体调节剂的治疗目标”这部分中，说明了腺苷激动剂作为抗高血压药是有效的，在戒除鸦片成瘾的治疗中，它是免疫能力的调节剂，是血管紧张肽原酶释放的调节剂，也是精神抑制和催眠的调节剂。相反，拮抗剂可用作中枢兴奋药，影响肌肉收缩力药，强心剂，抗应激反应药，止喘药以及治疗呼吸系统疾病”。由腺苷受体药物显示的活性，既强调了它们对于治疗的巨大潜在效力，又强调了对特异性药物的广泛需要。
腺苷通过作用于细胞表面受体而产生多种生物作用。这些腺苷受体有两种类型A-1和A-2。A-1受体按动作特征定义为几个N6-取代的腺苷类似物对其有作用的那些受体，如R-苯基异丙基腺苷(R-PIA)和环腺苷(CHA)比2-氯腺苷和N-5’-乙酰胺腺苷(NECA)更有效。在A-2受体上药物的效力顺序是NECA＞2-氯腺苷＞R-PIA＞CHA。
如上表所说明的，腺苷受体支配多种生理功能。已定义了两类主要的腺苷受体。A-1腺苷受体抑制腺苷酸环化酶，A-2腺苷受体激动腺苷酸环化酶。A-1受体比A-2受体对于腺苷和腺苷类似物具有更高的亲和力。腺苷和腺苷类似物的生理作用被下面的事实复杂化了，即非选择性的腺苷受体药物首先结合到几乎无处不在的低亲和力的A-2受体上，然后，当剂量增加时，它就令结合到高亲和力的A-2受体上，最后，当剂量比较大时，它就结合到非常高的亲和力的A-1腺苷受体上，见J.W.Daly，et al.，Subclasses ofAdenosine Receptors in the Central Nervous SystemInteraction withCaffeine and Related Methylxanthines，Cellular and Molecular Neuro-biology，3(1)，69-80(1983)。
通常，腺苷的生理作用既可以通过刺激腺苷酸环化酶，也可以通过抑制腺苷酸环化酶来介导。腺苷酸环化酶活化会增加细胞内CAMP的浓度，一般说来，CAMP被认为是细胞内的第二信使。因此，可以在培养细胞系时，通过测定使CAMP增加的能力，或者通过测定拮抗CAMP增加的能力来测量腺苷类似物的作用。这里提到的两种重要的细胞系是VA13(WI-38VA132RA)，SV-40转变的WI38人胎儿的肺成纤维细胞。已经知道它们传送腺苷受体A-2亚型和脂肪细胞，已经知道后者传送腺苷受体的A-1亚型，见R.F.Bruns，Adenosine Antagonism by purines，pteridines and Ben-zopteridines in Human Fibroblasts，Chemical Pharmacology，30，325-33，(1981)。
众所周知，在体外研究中，羧酸的同类物8-苯基-1，3-二丙基黄嘌呤(XCC)是非选择性的腺苷受体药，它对脑膜中的A-1受体的Ki为58±3nM，与脑切片试样中A-2受体结合的Ki为34±13nM。另一方面，8-苯基-1，3-二丙基一黄嘌呤的氨基同类物(XAC)对A-1腺苷受体(Ki为1.2±0.5nM)的亲和力比其对脑切片中A-2受体的亲和力(Ki为49±17nM)高40倍。另外，在腺苷类似物的拮抗作用中，XAC对心率的作用比对血压的作用要强得多，因为普遍知道腺苷类似物诱导的对心脏的作用似乎是通过A-1受体介导的，而腺苷类似物诱导的对血压的作用是通过A-2受体介导的，在体内条件下XAC的选择性表明腺苷受体在体外的活性与腺苷受体在体内的活性有关，这种选择性的结果可以区别专属性的生理作用，见B.B.Fredholm，K.A.Jacobsen，B.Jonzon，K.L.Kirk，Y.O.Li，and J.W.Daly，Evidence That a Novel 8-phenyl-Substituted Xanthine Derivative is a Cardioselective Adenosine Recep-tor Antagonist In Vivo，Journal of cardiovascular pharmacology，9，396-400，(1987)，另见K.A.Jacobsen，K.L.Kirk，J.W.Daly，B.Jonzon，Y.O.Li，and B.B.Fredholm，Novel 8-phenyl-SubstitutedXanthine Derivative Is Selective Antagonist At Adenosine Receptors InVivo，Acta physiol.Scand.，341-42，(1985)。
也已经知道，腺苷引起显著的血压降低，血压降低可能是依赖于A-2受体介导的外周阻力的减小。腺苷类似物也能降低心率，这个作用可能是通过腺苷受体A-1亚型介导。
因此，非常明显，服用本发明的对腺苷受体具有选择性作用的腺苷类似物将会导致选择性地与A-2或者与A-1受体结合，这将分别导致或者降低血压，或者减慢心率，例如，在体内分离了这两种生理作用。这种腺苷受体选择性药物的选择性可以用下述进一步描述的方法测定。测定对于脑腺苷A-2受体亲和力的实验下面描述的实验用于测定被测化合物与配基[3H]5’-N-乙基-酰胺腺苷(NECA)对于从动物脑膜中制备的腺苷A-2受体竞争的能力，见R.R.Bruns，G.H.Lu，and T.A.Pugsley，Characteriza-tion of the A-2 Adenosine Receptor Labeled by[3H]NECA in RatStriatal Membranes，Mol.pharmacol.，29，331-346，(1986)。年轻的雄性大鼠(C-0种)(来自于charles河)断头处死，取脑。从鼠脑纹状体中分离出用作配基结合的膜。该组织在20倍体积冰冷的50mMTris-Hel缓冲液(pH7.7)用polytron(放在6-20秒)制备匀浆搅匀，匀浆液在4℃，50,000×g离心10分钟。小丸在polytron中用20倍体积的微冲液再一次制匀浆，并再如上所述离心一次。最后，将小丸悬浮在40倍50mM Tris-Hel(pH7.7)每克原物湿重组织中。
孵育管分成三分，都分别装100μl的[3H]NECA(分析中用94nM)，100μl 1μM环己基腺苷(CHA)，100μl 100μM MgCl2，100μl的1IU/ml的腺苷脱氨酶，100μl用分析缓冲液(50mM Tris-hel，pH7.7)稀释的10-10M—10-4M范围内各种浓度的被测化合物和0.2μl的膜悬浮液(5mg湿重)，最后加50mM Tris-hel，pH7.7缓冲液至总体积为1ml。在25℃孵化60分钟。每个管都分别用真空泵通过GF/B玻璃纤维滤器过滤，滤器用5ml冰-冷缓冲液清洗两次。滤器上的脑膜转移至闪烁小瓶中，往小瓶中加入8ml5％protsol的双(邻-甲基苯乙烯)苯。滤器用液闪仪计数。
在100μM2-氯腺苷的存在下超过空白运行的那部分定为[3H]NECA的特异性结合。膜结合的总放射活性大约是加到试管中的放射活性的2.5％。因为这个条件限制了总结合小于10％的放射活性，因而在测定结合率的过程中，游离配基的浓度不发生明显改变。与膜的特异性结合大约是总结合的50％。膜悬浮液的蛋白含量可用下述办法测定。见O.H.Lowry，N.J.Rosebrough，A.L.Farr and R.J.Rardall，Protein Measurements With Folin Phenol Reagent，J.Biol.chem.，193，265-275(1951)。
用被测化合物取代结合的[3H]NECA的15％或更多表明是与腺苷A-2作用点的亲和。引起抑制50％配基结合的被侧化合物的摩尔浓度是IC50，这个值在100-1000nM范围内表示是一个高效力的化合物。
测定对于脑腺苷A-1受体结合部位亲和力的实验下面描述的实验用于测定被测化合物与配基[3H]环腺苷竞争对鼠脑膜中制备的A-1腺苷受体的亲和能力。雄性Sprague-Daw-ley大鼠断头处死，从整个动物脑中分离出膜。见R.Goodman，M.Cooper，M.Gavish，and S.Synder，Guanine Nucleotide and CationRegulation of the Binding of[3H]Diethylphenylxanthine to AdenosineA-1 Receptor in Brain Membrance，molecular pharmacology，21，329-335，(1982)。
分离到的膜用25倍体积的冰冷的50mM Tris-Hel缓冲液(pH7.7)均浆化(用polytron置在7至10秒钟)。均浆在4℃离心10分钟(19,000rpm)。用每毫升合2IU腺苷脱氨酶的25倍缓冲液再悬浮小丸以便洗涤，并在37℃培育30分钟，匀浆再离心，最后，小丸再次悬浮在25倍体积的冰冷缓冲液中。
培育管分成三份，分别接收100μl的[3H]环己基腺苷在该分析中为0.8nM，200μl的用50nM Tris-Hel缓冲液(pH7.7)稀释的10-10M至10-6M的各种浓度的被测化合物，0.2ml的膜悬浮液(8mg湿重)，最后加Tris缓冲液至总体积为2ml。25℃培育2小时，每一个管在减压下于10秒种内通过GF/B玻璃纤维滤器终止培育，滤器上的膜转移至闪烁小瓶中，滤器用液闪仪计数(在8ml含5％Protosal的双(邻-甲基苯乙烯)苯。
在10-5M的2-氯腺苷的存在下测得的超过空白的那部分即为[3H]环腺苷的特异性结合，膜结合的总放射活性大约是加到试管中放射活性的5％。对膜的特异性结合大约是总结合的90％。膜悬浮液中的蛋白含量可以用Lowry，et al.，Id.，265的方法测定。
被测化合物取代15％或更多结合的[3H]环己基腺苷显示其对腺苷结合部位的亲和力。用上述描述的实验方法得到的腺苷受体结合亲和力值下面是一个说明腺苷受体对于几种化合物结合亲和力的表。
腺苷受体结合亲和力A1KiA2KiA2/A18-(2-苯基丙基)-1， 94.3nm1740nm183-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮1，3-二丙基-8-(1， 94.6nm10300nm1082，3，4-四氢萘-2-基)-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮8-(反式-2-苯基环戊 164.3nm2720nm10基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮三磷酸鸟苷(GTP)对于激动剂和拮抗剂结合到不同的神经递质受体已经显示了不同程度的影响。通常，在不伴有降低拮抗剂亲和力的情况下，鸟嘌呤核苷降低激动剂对受体的亲和力。因此，GTP显示降低激动剂效应的能力而不降低作为抑制剂的腺苷拮抗剂[3H]3-二乙基-8-苯基黄嘌呤的桔抗作用。通常，GPT强烈减弱嘌呤激动剂的作用，而不减弱作为抑制剂的[3H]-苯基异丙基腺苷结合的拮抗作用，因此GTP是一个能够区别激动剂和拮抗剂的有效试剂，见L.P.Davies，S.C.chow，J.H.Skerritt，D.J.Brownand G.A.R.Johnston，Pyrazolo[3，4-d]Pyrimidines as AdenosineAntagonists，Life Sciences，34，2117-28，(1984)。腺苷受体试剂的药物制剂优选的给药途径是口服。对于口服，本发明的化合物可以制成固体或液体制剂，例如胶囊，丸剂，片剂，含锭，锭剂，触熔剂，粉末，溶液，悬浮剂，或乳化剂。固体单元剂型可以是普通明胶的硬壳胶囊或软壳胶囊，其中含有例如，表面活性剂，润滑剂，隋性填料如乳糖，蔗糖，磷酸钙和玉米淀粉。另一方面包含的本发明的化合物可以用常规基质做成片剂，基质有例如乳糖，蔗糖和玉米淀粉，并与粘合剂如阿拉伯胶，玉米淀粉，或明胶合用；使用崩解剂是为了帮助片剂在服用后崩解和溶解，常用的崩解剂有土豆淀粉，藻酸，玉米淀粉和瓜耳树胶；使用润滑剂是为了改善片剂颗粒的流动性，防止片剂物料粘连到压片机的冲模和冲头上，滑剂的例子有滑石粉，硬脂酸，硬脂酸镁，硬脂酸钙或硬脂酸锌；还使用染料，着色剂和香味剂以便扩展片剂的美学性质，便它们更容易被病人接受。在口服液体剂型使用的适当的赋形剂包括稀释剂如水和醇，如乙醇，苄醇和聚乙烯醇，可以加入也可以不加药用的表面活性剂，悬浮剂或者乳化剂。
本发明的化合物也可以非肠道给药，即皮下注射，静脉给药，肌肉注射或腹膜下给药，本发明的化合物作为可以以注射的剂型给药时用生理可以接受的可以药用的载体，这类载体可以是无菌的液体或液体混合物，如水，生理盐水，葡萄糖水溶液以及有关的糖溶液，醇类，如乙醇，异内醇，十六烷基醇，二醇类；如丙二醇，或聚乙二醇，甘油缩酮，如2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-甲醇，醚类，如聚(乙二醇)400，油类，脂肪酸，酯肪酸酯或甘油酯或酰化的脂肪酸甘油酯，含有或不含外加的可以药用的表面活性剂，如肥皂，或洗涤剂；悬浮剂如果胶，Carbomers，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素，或乳化剂以及其它的药用辅料。本发明的可以用于非肠道方式给药作为例证的油有，如石油，动物油，植物油，或合成来源的油，如花生油，大豆油，芝麻油，棉花种子油，玉米油，橄榄油，凡士林，以及矿物油。适合的脂肪酸包括油酸、硬脂酸和异硬脂酸。合适的脂肪酸酯有油酸乙酯，肉豆蔻酸异丙酯，合适的肥皂包括脂肪酸碱金属盐，铵盐和三乙醇胺盐，适合的洗涤剂包括阳离子洗涤剂，如卤化二甲基二烷基铵，卤化烷基吡啶；阴离子洗涤剂如磺酸烷基酯，磺酸芳基酯以及磺酸连烯酯，烷基链烯醚，硫酸甘油单酯和琥珀酸磺基酯，非离子洗涤剂有如氧化脂肪胺，脂肪酸链烷醇酰胺，以及聚氧乙烯基聚丙烯共聚物；两性的洗涤剂有如，-β-氨基丙酸烷基酯，2-烷基酯，2-烷基咪唑啉季铵盐，也可能是混合物。另外本发明的化合物可选择用气雾剂的方式服用使直接进入鼻腔，气雾剂中含有合适的载体，或用本发明的化合物的溶液作为滴剂服用，使用适合的溶剂，可使直接进入鼻腔。
本发明的非肠道组合物典型地在溶液中含有大约0.5至25％重量的活性成份。用防腐剂和缓冲液是有利的。为了减小或消除注射部位的疼痛，这类组合物中可含有非离子表面活性剂，该表面活性剂具有大约从12至17的亲水亲油平衡(HLB)值。在这一剂型中，表面活性剂的量大约是5％至15％(重量百分数)，表面活性剂可以是具有上述的HLB值的单一成分，也可以是具有已经描述的期待的HLB值的两种或多种组分的混合物。用于非肠道制剂的例证性的表面活性剂是聚乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯类，例如，单油酸脱脱水山梨醇酯以及高分子量的以及环氧乙烷与疏水碱的高分子量加合物和将环氧丙烷与丙二醇缩合剂得到的加合物。
使用的一种化合物或多种化合物的确切量，即一种或多种目标化合物的足以产生疗效的量取决于多种因素，例如使用的化合物，给药方式；动物的大小，年龄以及种类，给药的途径，给药时间和频率，以及期待的生理作用。在特殊情况下，服用的量可以在常规范围内查找而确定。
化合物最好以组合物的形式给药，该组合物中本发明的化合物与药用载体混合成制剂服用，使用的载体对于活性化合物来说是化学隋性的载体，并且这些载体在使用的条件下没有有害的付作用或毒性。在这类组合物中每毫升载体可含0.1μg或500mg以下的活性化合物至99％(重量比)活性化合物及可以药用的载体。
化合物也可能掺入到任何隋性载体中，以便根据文献中心已知方法用于常规血清分析，血液水平分析及尿水平分析情况等。
组合物可以是固体剂型，如片剂，胶囊，颗粒剂，饲料混合物，饲料添加剂和浓缩物，粉剂，颗粒或类似剂型；也有液体形式，如可注射的无菌悬浮液，口服的悬浮液或溶液。可药用的载体可以包括赋形剂，如表面活性分散剂，悬浮剂，片剂的粘合剂，润滑剂，香味剂以及着色剂。本发明适合的赋形剂可以在例如教科书中找到，见于Remington’s pharmaceutical Manufucturing，13Ed，Mach Pub-lishing Co.，Easton，Pennsylnaria(1965)。
下面的实施例代表了图I和图II描述的化合物的典型合成，这些例子仅仅是例证性的，而不是为了以任何方式限制本发明。使用的试剂和原料容易按常规技术制备。用于下述实施例中下列一系列术语的意义是“eq”为当量，“g”为克，“mg”为毫克，“mmol”为毫摩尔，“ml”为毫升，“℃”为摄氏度，“TLC”为薄层层析，“Rf”为保留因子，“δ”为以四甲基硅烷为内标的百万分之几。
实施例1
8-(2-苯基丙基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮的制备。
1，3-二正丙基-6-氨基尿嘧啶(30g)悬浮在有40ml的20％醋酸水溶液的1L水中，充分搅拌。将亚硝酸钠(9.03g)溶在41ml水中，并分次加至上述溶液中，用12ml的浓盐酸保持溶液的酸性。出现紫色沉淀。加料应在10分钟内完成，悬浮液搅拌2小时。然后将溶液过滤，滤液用水洗、在真空中干燥得到46gl，3-二正丙基-5-亚硝基-6-氨基尿嘧啶。
1，3-二正丙基-5-亚硝基-6-氨基尿嘧啶(61.6g)悬浮于1L水中，该悬浮液加50％氢氧化铵调pH至11，并用100g连二硫酸钠处理，连二硫酸钠分次加入，直到紫色褪去。水溶液混合物用氯仿(8×200ml)萃取，加无水硫酸镁干燥，过渡，浓缩。残留物用闪式硅胶柱层析纯化(5/10％甲醇/氯仿洗脱)，先用10％异丙醇的己烷溶液重结晶，再用10％异丙醇重结晶，得到37.29gl，3-二正丙基-5-6-二氨基尿嘧啶，m.p，127-128℃。
将3-苯丁酸(1.0g，6.1mmol)溶解在四氢呋喃(20ml)中，用N-甲基吗啉(0.67ml，6.1mmol)处理，并冷至-20℃。加入氯甲酸异丁酯(0.79ml，6.1mmol)，搅拌20分钟。然后加入1，3-二正丙基-5，6-二氨基尿嘧啶(1.4g，6.1mmol，溶解在5ml二甲基甲酰胺中)，搅拌，在-20℃反应3小时。加入400ml乙醚稀释反应液，并分离乙醚层。有机层用饱和的碳酸氢钠水溶液(200ml)，50％氯化钠水溶液(2×200ml)洗，加无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，得到N-(2-氨基-4，6-二氧代-3，5-二丙基环己-1-烯基)-3-苯基丁酰胺(2.23g)。
将N-(2-氨基-4，6-二氧代-3，5-二丙基-环己-1-烯基)-3-苯基丁酰胺(2.23g，6.2mmol)溶解在乙醇中(100ml)，加入100ml15％氢氧化钾溶液，加热至60℃反应3小时。冷却后反应液加入22ml浓盐酸酸化。用500ml乙醚萃取反应液。分别用水(200ml)，饱和氯化钠水溶液(200ml)洗涤有机相，加无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。用10％乙醚/己烷混合溶液研磨残留物。收集固体，用径向层析方法(50％乙酸乙酯/己烷，4mm板)纯化，得到180mg标题化合物，m.p.136-137℃。
元素分析C20H26N4O2理论值C67.77；H7.39；N15.81。
实测值C67.66；H7.39；N15.74。
实施例2
1，3-二丙基-8-(1，2，3，4-四氢萘-2-基)-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮的制备，将1，2，3，4-四氢-2-萘甲酸(1.0g，5.67mmol)溶解在40ml四氢呋喃中。加入N-甲基吗啉(0.62ml，5.67mmol)，冷至-20℃。加入氯甲酸异丁酯(0.73ml，5.67mmol)搅拌25分钟。然后加入1，3-二正丙基-5，6-二氨基尿嘧啶(1.28g，5，67mmol)，溶解在5ml二甲基甲酰胺中)，反应液在-20℃搅拌5小时。反应液回温至室温，加入300ml乙醚稀释。分离乙醚层，用200ml饱和碳酸氢钠水溶液洗，饱和氯化钠水溶液(200ml)洗，加入无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。残留物用径向层析法(2％至4％至6％甲醇/氯信洗脱，4mm板)纯化，得以1，2，3，4-四氢萘-2-甲酸(2-氨基-4，6-二氧代-3，5-二丙基环己-1-烯基)酰胺(2.0g)，为泡泡糖状。
将1，2，3，4-四氢萘-2-甲酸(2-氨基-4，6-二氧代-3，5-二丙基环己-1-烯基)酰胺(2.0g，5.2mmol)溶解在乙醇(50ml)中，加入50ml15％的氢氧化钾溶液，加热至70℃反应4小时。冷至0℃后，反应液加浓盐酸(13ml)酸化。加水(100ml)，用抽滤法收集沉淀物。白色固体用闪式层析法(50％乙酸乙酯/己烷洗脱)纯化，用5％乙醚/己烷研磨，在真空下干燥(120℃，3分钟)，得到标题化合物(1.04g)，m.p.202-204℃。
元素分析C21H26N4O2理论值C68.83；H7.15；N15.29。
实测值C68.72；H7.11；N15.30。
实施例3 8-(反式-2-苯基环戊基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮的制备1，3-二烯丙基-6-氨基尿嘧啶(5g)悬浮在400ml水中置于一个1升园底烧瓶中彻底搅拌。加入醋酸(6.7ml的26％溶液)，接着以间歇方式加入2ml浓盐酸和亚硝酸钠溶液(1.53g溶解在7ml水中)。4小时后，该溶液过滤，用水洗涤，收集样品并置于真空炉中在80℃干燥20小时，得4.54g的1，3-二烯丙基-5-亚硝基-6-氨基尿嘧啶，为紫色固体，m.p.170-180℃(87％收率)。
将1，3-二烯丙基-5-亚硝基-6-氨基尿嘧啶(4.5g)悬浮在150ml的乙酸乙酯中，加入连二硫酸钠(23.6g连二硫酸钠溶解在64ml水中)处理。1小时后分层，水相用乙酸乙酯(4×100ml)萃取。合并有机萃取液，加无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，残留物用闪式层析法(10％甲醇的氯仿溶液洗脱)纯化，得到4.4j1，3-二丙烯基-5，6-二氨基尿嘧啶。
反式-2-苯基-环己酸(1.0g，5.3mmol)(根据F.G.Bordwelland J.Almy，J.Org.chem.，38，571(1973)的方法制备)溶解在四氢呋喃(20ml)中，加N-甲基吗啉(0.58ml，5.3mmol)。反应液冷至-20℃，加入氯甲酸异丁酯(0.69ml，5.3mmol)。反应液搅拌30分钟，加入1，3-二烯丙基-5，6-二氨基尿嘧啶(1.2g，5.3mmol，溶解在4ml二甲基甲酰胺)，在-20℃搅拌3小时。回温至室温，加400ml乙醚稀释反应液。分层，有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(2×200ml)洗，50％氯化钠水溶液(2×300ml)洗，加无水硫酸镁干燥，过滤；减压浓缩。残留物用径向层析法(2％至5％甲醇/氯仿洗脱，2mm板)纯化得到反式-2-苯基-环己酸(3，5-二烯丙基-2-氨基-4，6-二氧代-环己-1-烯基)酰胺(0.51g)。
反式-2-苯基环己酸(3，5-二烯丙基-2-氨基-4，6-二氧代-环己-1-烯基)酰胺(300mg，0.76mmol)溶解在100ml乙醇中，加100ml10％氢氧化钾，反应加热至60℃反应4小时。冷却反应液，加200ml水稀释。反应液，加浓盐酸酸化，加400ml乙醚萃取。用200ml水，200ml饱和氯化钠溶液洗涤有机萃取相，加无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。残留物用径向层析法(40％至50％乙酸乙酯/己烷洗脱，2mm板)纯化，得到5，7-二烯丙基-2-(2-苯基环戊基)-1，7-二氢苯并咪唑-4，6-二酮(149mg)。
5，7-二烯丙基-2-(2-苯基环戊基)-1，7-二氢苯并咪唑-4，6-二酮(139mg，0.37mmol)溶解在20ml甲醇中。加入催化剂量的10％钯/碳，搅拌并通氢气。45分钟后完成氢化反应，用氮气吹洗反应液，通过硅藻土过滤。减压浓缩滤液，残留物用径向层析法(40％至50％乙酸乙酯/己烷洗脱)纯化，得到标题化合物(98mg)，m.p.152-153℃。
元素分析C22H28N4O2理论值C69.45；H7.42；N14.72。
实测值C69.36；H7.56；N14.63。
权利要求
1.具有下面结构的化合物 包括(R)和(S)对映异构体以及它们的外消旋混合物，及它们的可以药用的盐，其中R1和R2是各自独立的(C1-C4)低级烷基或(C2-C4)低级烯基，Z是 其中R3是氢，(C1-C3)低级烷基，硝基，氨基，羟基，氟、溴、或氯，R4为(C1-C4)低级烷基，n是1或2。
2.权利要求1的化合物，其为8-(2-苯基丙基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮。
3.权利要求1的化合物，其为1，3-二丙基-8-(1，2，3，4-四氢萘-2-基)-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮。
4.权利要求1的化合物，其为8-(反式-2-苯基环戊基)-1，3-二丙基-3，9-二氢嘌呤-2，6-二酮。
全文摘要
具有通式(I)的黄嘌呤衍生物，包括(R)和(S)对映异构体和它们的外消旋混合物，以及可以药用的盐，其中R本发明化合物的药物制剂可基于这里所披露化合物的选择性结合活性来制备，该化合物可增强一些生理作用而同时将其它作用降至最小，如在不降低心率下降低血压。
文档编号A61K31/52GK1122599SQ94192005
公开日1996年5月15日 申请日期1994年4月13日 优先权日1993年5月6日
发明者N·P·皮特, N·L·兰兹 申请人:默里尔多药物公司