双膦酸盐与生长激素促分泌素的组合的制作方法

专利名称：双膦酸盐与生长激素促分泌素的组合的制作方法
背景技术：
双膦酸盐(双膦酸)已知能抑制骨吸收，且如Rosini等人美国专利4,621,077中所公开的，可用于治疗骨结石病。Aloia等人[Metabolism，34(2)124-129(1995)]考察了用降钙素单独和与人体生长激素组合进行的骨质疏松症治疗。该出版物没有描述在骨质疏松症治疗中降钙素疗法与生长激素给药相结合所产生的效益。Aloia等人[J.Clin.Endocrinol.Metab.，54，992-999(1976)]研究了生长激素本身在骨质疏松症治疗中的效果。某些非肽生长激素促分泌素已知能刺激粘液腺增加其生长激素分泌量，有利于缺乏生长激素的儿童和成年人、严重烧伤受害者、特纳综合症治疗，用于扭转糖皮质激素治疗的有害效应、治疗生长激素不足的成年人的肌肉与运动耐力不足、和治疗骨质疏松症。有生长激素促分泌素活性的化合物公开于下列文献美国专利No.3,239,345；美国专利No.4,036,979；美国专利No.4,411,890；美国专利No.5,206,235；美国专利No.5,284,841；美国专利No.5,310,737；美国专利No.5,317,017；EPO专利公开No.0,144,230，；EPO专利公开No.0,513,974；PCT专利公开No.WO 94/07486；PCT专利公开No.WO 94/08583；PCT专利公开No.WO 94/13696；和Science，260，1640-1643(June 11，1993)。这里描述另一些有生长激素促分泌素活性的化合物。
文献公开了可用于治疗和预防与骨吸收有关的疾病的各种双膦酸。代表性实例可参阅下列文献美国专利No.3,251,907；美国专利No.3,422,137；美国专利No.3,584,125美国专利No.3,940,436；美国专利No.3,944,599；美国专利No.3,962,432；美国专利No.4,054,598；美国专利No.4,267,108美国专利No.4,327,039美国专利No.4,407,761；美国专利No.4,578,376；美国专利No.4,621,077；美国专利No.4,624,947；美国专利No.4,746,654；美国专利No.4,761,406；美国专利No.4,922,007；美国专利No.4,942,157；美国专利No.5,227,506；EPO专利公开No.0,252,504；和J.Org.Chem.，36，2843(1971)。
双膦酸和卤代双膦酸的制备在技术上是众所周知的。代表性实例可参阅上述那些公开了可用于治疗钙或磷酸盐代谢紊乱、尤其可作为骨吸收抑制剂的化合物的参考文献。
发明概要本发明涉及双膦酸盐(双膦酸)与生长激素促分泌素的组合，用于治疗和预防钙与磷酸盐代谢紊乱，尤其用于治疗和预防与骨吸收有关的疾病，特别是骨质疏松症、佩吉特病、恶性血钙过多和转移性骨病。这种特定组合在治疗和预防此类临床紊乱方面产生了意外结果。因此，本发明的一个目的是描述两种用于治疗和预防与骨吸收有关的疾病尤其骨质疏松症的药物的组合。此外，本发明的一个目的是描述本组合中使用的每种化合物类型中的较好化合物。本发明更进一步的目的是描述含有每种用于治疗骨质疏松症的化合物的组合物。从以下描述的解读，进一步的目的将变得显而易见。
发明详述涉及骨吸收，尤其老年患者中的骨质疏松这类疾病的治疗和预防的本发明的组合包含作为第一要素的双膦酸盐化合物，尤其是选自下面结构式所示的一组双膦酸盐(双膦酸)化合物或其药物上可接受的盐 其中R1选自下列基团(a)未取代的或由下列基团取代的C1-C5烷基(1)NH2，(2)吡啶基，(3)吡咯基，(4)NR3R4，(b)NR5，(c)SR6，和(d)ClR2是H、OH或Cl；R3是H，或C1-4烷基；R4是C1-4烷基；R5是C1-10烷基；和R6是芳基。
上面式X也包括这类化合物与碱金属、有机碱和碱性氨基酸所形成的盐。
上面式X的优选化合物是其中R1是由氨基或吡啶基取代的C1-C5烷基，最好是在端部碳原子上取代，且R2是羟基的那些化合物。优选的盐类是与碱金属形成的盐类，最优选的是钠盐。
最优选的双膦酸盐选自下列一组化合物或其任何药物上可接受的盐alendronic酸、etidronic酸、clodronic酸、pamidronic酸、tiludronic酸、risedronic酸、6-氨基-1-羟基-亚己基-双膦酸，和1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸。
双膦酸的生产在文献中是熟知的。有代表性的例子可参阅下列文献美国专利No.3,251,907；美国专利No.3,422,137；美国专利No.3,584,125；美国专利No.3,940,436；美国专利No.3,944,599；美国专利No.3,962,432；美国专利No.4,054,598；美国专利No.4,267,108；美国专利No.4,327,039；美国专利No.4,407,761；美国专利No.4,578,376；美国专利No.4,621,077；美国专利No.4,624,947；美国专利No.4,746,654；美国专利No.4,761,406；美国专利No.4,922,007；美国专利No.4,942,157；美国专利No.5,227,506EPO专利公开No.0,252,504；和J.Org.Chem.，36，3843(1971)。
在治疗骨质疏松的本发明的组合中，第二个要素由生长激素促分泌素构成。
有代表性的生长激素促分泌素可参阅下列文献美国专利No.3,239,345；美国专利No.4,036,979；美国专利No.4,411,890；美国专利No.5,206,235；美国专利No.5,284,841；美国专利No.5,310,737；美国专利No.5,317,017；EPO专利公开No.0,144,230；EPO专利公开No.0,513,974；PCT专利公开No.WO 94/07486PCT专利公开No.WO 94/08583PCT专利公开No.WO 94/13696和Science，260，1640-1643(1993年6月11日)。
美国专利No.5,206,235中提出的生长激素促分泌素的通式如下 其中各取代基的定义如美国专利5,206,235中所述。
其中最优选的苯并内酰胺化合物经鉴定具有如下结构 或
另一些有代表性的生长激素促分泌素是在PCT专利公开No.WO94/13696中公开的下列结构式I和II的螺环化合物及其药物上可接受的盐和各个非对映体 式I 式II其中R1选自下列基团-C1-C10烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6烷基)、-C3-C7环烷基-(C1-C6烷基)、-C1-C5烷基-K-C1-C5烷基、-芳基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)、-C3-C7环烷基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)，其中K是O、S(O)m、N(R2)C(O)、C(O)N(R2)、OC(O)、C(O)O，或-CR2＝CR2-，或-C≡C-，且其中芳基基团按下面定义，R2和烷基基团可以进一步被1-9个卤素、S(O)mR2a、1-3个OR2a、或C(O)OR2a取代，芳基基团可以进一步被下列基团取代苯基、苯氧基、卤苯基、1-3个C1-C6烷基、1-3个卤素、1-2个OR2、亚甲二氧基、-S(O)mR2、1-2个CF3、-OCF3、硝基、N(R2)(R2)、N(R2)C(O)R2、-C(O)OR2、-C(O)N(R2)(R2)、-SO2N(R2)(R2)、-N(R2)S(O)2芳基，和-N(R2)SO2R2；R2选自下列基团氢、C1-C6烷基、C3-C7环烷基，且若两个C1-C6烷基出现在一个原子上，则它们可任选地连接形成一个C3-C8的环状的环，任选地含有氧、硫或NR2a；R2a是氢，或C1-C6烷基；R3a和R3b独立地选自下列基团氢、卤素、-C1-C6烷基、-OR2、氰基、OCF3、亚甲二氧基、硝基、-S(O)mR、-CF3或-C(O)OR2，且当R3a和R3b处于邻位排列时，它们可以连接形成一个C5-C8脂族环或芳族环，任选地含有1或2个选自氧、硫或氮的杂原子；R4和R5独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基，其中取代基选自1-5个卤素、1-3个羟基、1-3个C1-C10链烷酰氧基、1-3个C1-C6烷氧基、苯基、苯氧基2-呋喃基、C1-C6烷氧羰基、-S(O)m(C1-C6烷基)；或者R4和R5可以合在一起形成-(CH2)rLa(CH2)s-，其中La是-C(R2)2-、-O-、-S(O)m-，或-N(R2)-，其中r和s独立地是1-3，且R2的定义同上；R6是氢或C1-C6烷基；A是 或 其中x和y独立地是0-3Z是N-R2或O；R7和R7a独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、-OR2、三氟甲基、苯基、取代C1-C6烷基，其中取代基选自咪唑基、苯基、吲哚基、对羟基苯基、-OR2、1-3个氟、-S(O)mR2、C(O)OR2、-C3-C7环烷基、-N(R2)(R2)、-C(O)N(R2)(R2)或R7和R7a可独立地连接到R4和R5基团中的一个或两个上，在端部氮原子和R7或R7a基团的烷基部分之间形成亚烷基桥，其中该桥含有1-5个碳原子B、D、E和F独立地选自下列基团-C(R8)(R10)-、-O-、C＝O、-S(O)m-、或-NR9-，使得B、D、E或F中有一个或2个可任选地不存在，以得到一个5、6或7元环；且其条件是；B、D、E、和F只有当其余的B、D、E和F基团之一同时是-O-、-S(O)m-、或-NR9-时，B、D、E和F才可以是-C(R8)(R10)-或C＝O，或者B和D，或D和E合在一起可以是-N＝CR10-或-CR10＝N-，或者B和D或D和E合在一起可以是-CR8＝CR10-，其条件是其它B和E或F中之一同时是-O-、-S(O)m-，或-NR9-R8和R10独立地选自下列基团氢、-R2、-OR2、-(CH2)q-芳基、-(CH2)q-C(O)OR2、-(CH2)q-C(O)O(CH2)q-芳基、或-(CH2)q-(1H-四唑-5-基)，其中芳基可任选地被1-3个卤素、1-2个C1-C8烷基、1-3个-OR2或1-2个-C(O)OR2取代；R9选自下列基-R2，-(CH2)q-芳基，-C(O)R2，-C(O)(CH2)q-芳基，-SO2R2，-SO2(CH2)q-芳基，-C(O)N(R2)(R2)，-C(O)N(R2)(CH2)q-芳基，-C(O)OR2，1-H-四唑-5-基，-SO3H，-SO2NHC≡N，-SO2N(R2)芳基，-SO2N(R2)(R2)，且其中(CH2)q可任选地被1-2个C1-C4烷基取代，R2和芳基可任选地进一步被下列基团取代1-3个-OR2a、-O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)OR2a、1-2个-C(O)O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)N(R2a)(R2a)、1-2个-C(O)N(R2a)(CH2)q芳基、1-5个卤素、1-3个C1-C4烷基、1，2，4-三唑基、1-H-四唑-5-基、-C(O)NHSO2R2a，-S(O)mR2a，-C(O)NHSO2(CH2)q-芳基，-SO2NHC≡N，-SO2NHC(O)R2a，-SO2NHC(O)(CH2)q芳基，-N(R2)C(O)N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q-芳基，-N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)R2a，-N(R2a)C(O)(CH2)q芳基，-OC(O)N(R2a)(R2a)，-OC(O)N(R2a)(CH2)q芳基，-SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHC(O)R11，其中W是2-6，R11可以是维生素H、芳基、或被1或2个OR2、1-2个卤素、叠氮基或硝基取代的芳基m是0，1或2；n是1或2q可任选地为0、1、2、3或4且G、H、I和J是碳、氮、硫或氧原子，使得至少有一个杂原子且G、H、I或J中之一可任选地缺少，以提供一个5元或6元芳族杂环。
在上面的结构式和本发明的整个说明书中，下列术语具有如下所指出的含义上面规定的烷基基团用来表示指定长度的直链或支链构型的那些烷基基团，这些基团可以任选地含有双键或叁键。这类烷基基团的例子有甲基、乙基、丙基、乙炔基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、异己基、烯丙基、丙烯基、丁烯基、丁二烯基等。
上面规定的烷氧基基团用来表示指定长度的直链或支链构型的那些烷氧基基团，这些基团可任选地含有双键或叁键。这类烷氧基基团的例子有甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、己氧基、异己氧基、烯丙氧基、丙炔氧基、异丁烯氧基、2-己烯氧基等。
“卤素”这一术语用来表示卤原子氟、氯、溴和碘。
“芳基”这一术语用来表示苯基、萘基和含有1-3个杂原子的5元和6元环或含有1-3个氮、硫或氧杂原子的稠合的5元或6元双环环系的芳族残基。这类杂环芳族环系的例子有吡啶、噻吩、苯并噻吩、四唑、吲哚、N-甲基吲哚、二氢吲哚、吲唑、N-甲酰吲哚、苯并咪唑、噻唑、呋喃、嘧啶，和噻二唑。
上面定义的某些术语在上述通式中可以出现一次以上，在这种情况下，各术语的定义与其它术语无关。
本发明组合中所用的最优选的生长激素促分泌素是下面结构式V的化合物及其药物上可接受的盐和各个非对映体 其中R1选自下列基团 R3a是H，或氟D选自下列基团-O-，-S-，-S(O)m-，N(R2)，NSO2(R2)，NSO2(CH2)t芳基，NC(O)(R2)，NSO2(CH2)qOH，NSO2(CH2)qCOOR2，NSO2(CH2)qC(O)-N(R2)(R2)，N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2)(CH2)wOH， 其中的芳基是苯基或吡啶基，而苯基可以被1-2个卤素取代；R2是H，或C1-C4烷基；m是1，2；t是0、1或2q是1，2，或3；w是2，3，4，5，或6。
本发明的组合中所用的有代表性的最优选的生长激素促分泌素包括下列化合物及其药物上可接受的盐1)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺2)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基羰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；3)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-苯基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；4)N-[1(R)-[(3，4-二氢-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；5)N-[1(R)-[(2-乙酰基-1，2，3，4-四氢-螺[异喹啉-4，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺6)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；7)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺甲磺酸盐；8)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2(2′，6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；9)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺10)N-[1(S)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺
11)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；12)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；13)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；14)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；15)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺16)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-(2-乙氧羰基)甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺17)N-[1(R)-[1，2-二氢-1，1-二氧杂螺[3H-苯并噻吩-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺。
特别优选的生长激素促分泌素包括下列化合物及其药物上可接受的盐N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺甲磺酸盐；N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺。
双膦酸的制备方法在文献中是众所周知的。各种双膦酸化合物及其制备方法的典型例子可参阅下列文献美国专利No.3,251,907；美国专利No.3,422,137美国专利No.3,584,125；美国专利No.3,940,436；美国专利No.3,944,599；美国专利No.3,962,432；美国专利No.4,054,598美国专利No.4,267,108；美国专利No.4,327,039；美国专利No.4,407,761；美国专利No.4,621,007；美国专利No.4,746,654；美国专利No.4,624,947；美国专利No.4,922,007；EPO专利公开No.0,252,504；和J.Org.Chem.，36，3843(1971)。
有关制备生长激素促分泌素的详细叙述可参阅下列文献美国专利No.3,239,345；美国专利No.4,036,979；美国专利No.4,411,890；美国专利No.5,206,235；美国专利No.5,284,841；美国专利No.5,310,737美国专利No.5,317,017EPO专利公开No.0,144,230；EPO专利公开No.0,513,974；PCT专利公开No.WO 94/07486；PCT专利公开No.WO 94/08583；PCT专利公开No.WO 94/13696；和Science，260，1640-1643(1993年6月11日)。
用于本发明这些组合的、通式I和II的生长激素促分泌素的制备可以按顺序式或会聚式合成路线进行。详细说明通式I和II化合物制备的顺序方式合成用下列反应方案加以陈述。
受保护氨基酸衍生物1若保护基团L是诸如BOC或CBZ基团，则在很多情况下是可以买到的。其它受保护氨基酸衍生物1可以按文献方法制备。通式2和2a的螺哌啶和螺吖庚因(n＝2)有许多是文献上已知的，而且可以用标准手段如卤化、硝化、磺酰化等在苯基或杂芳基上衍生。此外，各种苯基或杂芳基取代的螺哌啶和螺吖庚因(n＝2)也可以利用衍生的苯基和杂芳基中间体按下列文献方法制备。在方案I之后的各方案中，合成方法只用螺哌啶加以说明，尽管熟悉本门技术的人员都会知道所说明的转化也可以在更高的同系物系列中进行，以提供n＝2的通式I和II化合物。
方案1 通式3和3a的中间体可以按方案1所述那样合成。通式2和2a的螺哌啶与通式1的受保护氨基酸(其中L是适用保护基团)的偶合是在一种惰性溶剂如二氯甲烷中，在HOBT的存在下，用一种偶合试剂如DCC或EDC方便地进行的。此外，这种偶合也可以用一种偶合试剂如BOP在一种惰性溶剂如二氯甲烷中进行。所不要的副产物的分离以及中间体的纯化是利用闪急色谱法(W.C.Still，M.Kahn，and A.Mitra，J.Org.Chem.，43，2923(1978))、MPLC或制备型TLC，用硅胶色谱法实现的。
方案2 3和3a转化成中间体4和4a可以按方案2所说明的那样进行。苄氧羰基基团的脱除可以用技术上已知的许多方法实现，例如，在一种亲质子(protic)溶剂如甲醇中，在钯或铂催化剂的存在下，用氢进行催化加氢。在由于其它潜在活泼官能度的存在而不宜进行催化加氢的情况下，苄氧羰基基团的脱除也可以通过用溴化氢的乙酸溶液处理来实现。BOC保持基团的脱除是在一种溶剂如二氯甲烷或甲醇中用一种强酸如盐酸或三氟乙酸进行的。脱除可能存在的其它保护基团所需要的条件下可参阅Greene，T；Wuts，P.G.M.Protective Groupsin Organic Synthesis，John Wiley & Sons，Inc.，New York，NY 1991。
方案3
通式5和5b的中间体(其中A是一个亚甲基或一个有取代的亚甲基基团)可以如方案3中所示那样，再一次在一种惰性溶剂如二氯甲烷中在HOBT的存在下用一种偶合试剂如EDC或DCC使通式4和4a的中间体与通式6的氨基酸偶合来制备。这些氨基酸6是已知的氨基酸或易于用熟悉本门技术的人员已知的方法合成的氨基酸。此外，这种偶合也可以用一种偶合剂如BOP在一种惰性溶剂如二氯甲烷中进行。而且，如果R4或R5是一个氢，则通式7的氨基酸也可用于该偶合反应，其中L是一个如以上所定义的保护基团，以给出5a和5c。5a和5c(L＝保护基团)的脱保护可以在技术上已知的条件下进行。
方案4 I R4和/或R5＝H I 式中R4和/或R5是C1-C6烷基或有取代烷基 II R4和/或R5＝H II 式中R4和/或R5是C1-C6烷基或有取代烷基其R4和/或R5是一个氢的通式I和II化合物可以进一步精心制作成如方案4中所示那样在氨基上有取代的新化合物I和II(较好的侧链R7＝CH2-CH(OH)-CH2X，式中X＝H或OH)。I和II用一种醛的还原性胺化是在技术上已知的条件下进行的，例如，在一种惰性溶剂如甲醇或乙醇中，在铂、钯或镍催化剂的存在下用氢，或用化学还原剂如氰基硼氢化钠，进行催化加氢。此外，通过环氧化物开环反应也可以实现类似的转化。
方案5 其A是N(R2)-(CH2)z-C(R7)(R7a)-(CH2)y的通式I和II化合物可以如方案5中所示那样使4或4a与试剂8反应来制备，式中X是一个良好的离去基团如Cl、Br、I、咪唑。此外，4和4a也可以在一种惰性溶剂如1，2-二氯乙烷中与通式9的一种异氰酸酯反应。如果在最终产物中R4或R5是氢，则试剂8和9将在R4或R5的位置上带有一个可脱除的保护基团L。
本发明的化合物I和II也可以用一种如反应方案6、7和8中所述的会聚方式制备。
受保护氨基酸衍生物10，当M＝甲酯、乙酯或苄酯时，在很多情况下是可以买到的。其它酯保护的氨基酸可以用本门技术的行家熟悉的经典方法制备。其中一些方法包括受保护氨基酸与重氮链烷反应并脱除保护基团L，在一种强酸如盐酸或对甲苯磺酸的存在下氨基酸与一种适当醇反应。制备新氨基酸的合成路线见方案14、15和16。
方案6 通式11和11a的中间体可以如方案6中所示那样制备，即像以上方案3中所述那样使胺10与氨基酸6和/或7偶合，其中L是一个保护基团。当11或11a中存在一个脲键时，可以如方案5中所说明的那样将其引进。
方案7
酯11或11a转化成中间体酸12或12a，可以用方案7所述那样技术上已知的许多方法实现，例如，甲酯和乙酯可以在一种像甲醇水溶液这样的亲质子溶剂中用氢氧化锂水解。此外，苄基基团的脱除可以用许多还原方法进行，其中包括在一种亲质子溶剂如甲醇中在铂或钯催化剂的存在下加氢。烯丙酯可以在包括乙酸乙酯和二氯甲烷在内的各种溶剂中在2-乙基己酸的存在下用四(三苯膦)钯催化剂使之断裂(见J.Org.Chem.1982，42，587)。
方案8
然后，可以如方案8中所述那样，把酸12或12a精心制作成5和5a以及5b和5c。通式2和2a的螺哌啶与通式12或12a的酸的偶合(式中L是一个适用保护基)是在一种惰性溶剂如二氯甲烷中，在1-羟基苯并三唑(HOBT)的存在下，用一种偶合试剂如二环己基碳化二亚胺(DCC)或EDC方便地进行的。此外，这种偶合也可以在一种惰性溶剂如二氯甲烷中用一种偶合试剂如六氟磷酸苯并三唑-1-基氧三(二甲胺基)鏻鎓(“BOP”)进行。5a和5c转化成I和II是通过脱除保护基团L实现的。当R4和/或R5是H时，可以如方案4中所述那样任选地把有取代的烷基基团加成到该氮原子上。
方案9 氧化螺-2，3-二氢化茚基哌啶中间体的制备用方案9说明，其中R3aR3b都是氢。受保护螺茚13的硼氢化反应，随后用氯铬酸吡啶鎓进行氧化性后处理，提供了螺-2，3-二氢-1-茚酮14。
方案10 螺-1，2-二氢化茚转化成苯并内酰胺中间体用方案10说明。在一种惰性溶剂如氯仿中用叠氮酸处理螺-2，3-二氢-1-茚酮(Schmidt反应)是适用于这种转变的很多文献方法之一。在本实例中生成两种苯并内酰胺的混合物。这些异构体容易用硅胶色谱法分离。然后，这些中间体可以脱保护，并利用同属中间体2，如方案1和8中所述那样结合到生长激素促分泌素中。
方案10A
在一种溶剂如DMF中在HaH的存在下用一种烷基卤使15和16烷基化，给出了17和18(R2＝C1～C4烷基)。
方案11 方案11A 当L是一个适当保护基如一个苄基基团时，这些酰胺可以用氢化铝锂还原，提供胺19和21。然后，这些胺在R2＝H的情况下可以采用熟悉本门技术的人员已知的条件，用有取代的磺酰卤或异氰酸酯进行烷基化、芳基化、酰基化或反应，以提供化合物20和22。保护基团(L)借助于利用钯催化剂氢解的脱除提供了中间体，后者可利用同属中间体2，运用以上所示方案1和8中说明的化学，结合到本发明的促分泌素中。
方案12 此外，1，2，3，4-四氢化螺[异喹啉-4，4′-哌啶]环系统可按方案12中所述那样制备。受保护螺茚的臭氧解随后用二甲硫醚处理，给出一种半缩醛中间体24，后者在还原性胺化和酰化条件下提供胺25。这种胺的保护基(L)已有上述定义。
方案13 通式26的环类似物(式中X、Y是H、H；OH、H；H、OH；和＝O)可以用文献上所述方法和本门技术的行家已知的方法制备。例如，如方案13中所说明的，螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]类似物可以从有取代或无取代2-羟基乙酰苯和适当保护的4-哌啶酮按Kabbe，H.J.Synthesis 1978，886-887和其中所引用参考文献所述那样制备。2-羟基乙酰苯依次或者是商业上可得的，或者可按本门技术的行家已知的文献路线制备。这类方法可参阅Chang.C.T.等人在J.Am.Chem.Soc.，1961，3414-3417和Elliott，J.M.等人在J.Med.Chem.1992，35，3973-3976中所述方法。在ProtectiveGroups in Organic Synthesis，Greene，T.W.，Wuts，P.G.，Jphn Wiley & Sons，New York，1991和Olofson，R.A.等人，J.Org.Chem.1984，49，2081-2082中所述的保护基团脱除提供了胺，然后可通过以上所示方案1和8中详细说明的，利用同属中间体2的化学，结合到生长激素促分泌素中。 通过结构27的化合物中的酮官能度可利用硼氢化钠还原成一种醇，也可以采用本门技术的行家已知的条件充分还原成一个亚甲基。例如，该酮用硼氢化钠还原，随后用浓盐酸处理和加氢，产生了有通式结构29的化合物。然后可以利用同属通式2，通过方案1和8中详细说明的化学，把结构27、28或29的胺结合到生长激素促分泌素中。此外，这种酮往往可以在结合到通式I的化合物中之后还原。
手性羟基螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]类似物的制备可以利用光学活性还原剂和非对映盐结晶来实现。
本发明的通式I和II化合物是从各种各样的有取代天然和非天然氨基酸例如通式30和6与7(式中A是-(CH2)x-C(R7)(R7a)-(CH2)y-)的氨基酸制备的。其中许多酸的制备在美国专利5206237中已有描述。
这些外消旋形式中间体的制备是用本门技术的行家熟悉的经典方法完成的(Williams，R.M.“Synthesis of Optically Actiueα-Amino Aeids”，Pergamon PressOxford，1989Vol.7)。已有若干种方法可用来拆开(DL)-氨基酸 常用方法之一是通过使从光活性的酸或胺衍生的盐结晶来拆开氨基或羧基保护的中间体。此外，也可以利用前面所描述的化学，使羧基保护中间体的氨基与光活性酸偶合。各种非对映体无论用色谱技术还是用结晶法分离，随后使手性酰胺水解，都提供了拆开的氨基酸。类似地，氨基保护中间体可以转化成手性非对映酯和酰胺的混合物。该混合物用上述方法分离以及各种非对映体的水解，提供了(D)和(L)氨基酸。最后，Whitesides及其同事在J.Am.Chem.Soc.1989，111，6354-6364中已报告一种能拆开(DL)-氨基酸的N-乙酰衍生物的酶法。
当希望以光学纯形式合成这些中间体时，一些已建方法包括(1)手性烯醇化物的不对称亲电胺化(J.Am.Chem.Soc.1986，108，6394-6395，6395-6397和6397-6399)，(2)光学活性羰基衍生物的不对称亲核胺化(J.Am.Chem.Soc.1992，114，1906；Tetrahedron Lett.1987，28，32)，(3)手性甘氨酸烯醇化物合成纤维的非对映选择性烷基化(J.Am.Chem.Soc.1991，113，9276；J.Org.Chem.1989，54，3916)，(4)手性亲电甘氨酸酯合成纤维的非对映选择性亲核加成(J.Am.Chem.Soc.1986，108，1103)，(5)前手性脱氢氨基酸衍生物的不对称加氢(“AsymmetricSynthesis，Chiral CatalysisMorrison，J.D.，Ed；AcademicPressOrlando，FL，1985；Vol 5)，和(6)酶法合成(Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1978，17，176)。
方案14 例如，在二(三甲基甲硅烷基)氨化钠的存在下用肉桂基溴使二苯基噁嗪酮31的烯醇化物烷基化(J.Am.Chem.Soc.1991，113，9276)，能顺利给出32，后者再通过用三氟乙酸脱除N-叔丁氧基羰基基团并在PdCl2催化剂上加氢转化成所希望的(D)-2-氨基-5-苯基戊酸33(方案14)。
方案15
通式30的中间体，即O-苄基-(D)-丝氨酸衍生物34，可方便地从适用的有取代苄基卤和N-保护的(D)-丝氨酸34制备。保护基团L方便地是BOC基团或CBZ基团。34的苄基化可以用文献上众所周知的许多方法实现，其中包括在一种惰性溶剂如DMF中用2当量氢化钠脱质子，随后用1当量各种苄基卤处理(Synthesis1989，36)，如方案15中所示。
O-烷基-(D)-丝氨酸衍生物也是用方案15中所示的烷基化实验方案制备的。可以用来制备通式35的(D)-丝氨酸衍生物的其它方法包括用通式ArCH2OC(＝NH)CCl3的试剂对从34衍生的羧基保护中间体进行酸催化的苄基化(O.Yonemitsu等人，Chem.Pharm.Bull.1988，36，4244)。此外，用ArCH2OCH2X(式中X是一个离去基团)进行手性甘氨酸烯醇化物的烷基化(J.Am.Chem.Soc.1991，113，9276J.Org.Chem.1989，54，3916)给出35。此外，D，L-O-芳基(烷基)丝氨酸也可以用上述方法制备和拆开。
方案16 N-保护的-(D)-半胱氨酸36的烷基化是按照(D)-丝氨酸衍生物合成中所述和以下说明的步骤、用R1a-X(式中X是一个离去基团如卤根和甲磺酰氧基团)进行的，如方案16中所示。
半胱氨酸衍生物37氧化成亚砜38(n＝1)和砜(n＝2)可以用很多氧化剂完成。(关于硫化物氧化的综述，见Org.Prep.Proced.Int.1982，14，45)。高碘酸钠(J.Org.Chem.1967，32，3191)经常用于亚砜合成，而过硫酸氢钾(OXONE)(Tetrahedron.Lett.1981，22，1287)则用于砜合成。
方案17 因此，各种各样的有取代氨基酸都可以通过方案1和8中详细说明的化学结合到生长激素促分泌素中。含有亚砜或砜官能团的促分泌素也可以用高碘酸钠或OXONE从半胱氨酸促分泌素制备。此外，在该合成的最后一步，也可以用过氧化氢作为氧化试剂，如方案17中所示。亚砜40(n＝1)和砜40(n＝2)类似物可以用制备型薄层色谱法分离。
氨基保护基团的脱除可以用技术上已知的许多方法实现；例如，如以上所述和参阅Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene，John Wiley and Sons，NY.1981。
其中R4和R5各是一个氢的通式I化合物可通过按上述步骤用一种醛进行还原性烷基化或通过诸如与各种环氧化物反应等方法进行烷基化来进一步精心制作。以盐酸盐或三氟乙酸盐形式得到的产物可用反相高性能液体色谱法(HPLC)或用重结晶法方便地纯化。
通式41的螺哌啶可以用许多方法包括如以下所述的合成来制备。 方案18 通式42(其中L是一个所定义的保护基团)的螺哌啶可以用文献上已知的方法合成(例如，H.Ong等人J.Med.Chem.1983，23，981-986)。42(其中L是一个保护基团如甲基或苄基)的二氢吲哚氮可通过与各种各样的亲电试剂反应产生通式43的螺哌啶(其中R9可以是各种各样的官能度)。化合物42可以，例如，在一种惰性溶剂如二氯甲烷中与异氰酸酯反应而产生脲衍生物，在一种惰性溶剂如二氯甲烷中与氯甲酸酯反应而产生氨基甲酸酯，与酰氯、醛或酰基咪唑反应而产生酰胺，与磺酰氯反应而产生磺酰胺，与氨磺酰氯反应而产生硫酰胺。此外，42的二氢吲哚氨也可以在技术上已知的条件下用醛进行还原性烷基化。当用于还原性胺化反应的醛是一种结构为HCOCOOM的受保护乙醛酸(式中M是一个所定义的保护基团)时，M可以从产物上脱除并进一步衍生。此外，42可以与环氧化物反应而产生43，其中R9是β-羟基取代的烷基或芳烷基基团。二氢吲哚42也可以通过进行42与氟苯基或氟杂芳基试剂的反应而转化成通式43的化合物，式中R9＝苯基或有取代的苯基，杂芳基或有取代的杂芳基。这种化学详见H.Ong等人J.Med.Chem.1983，23，981-986。
方案19 螺哌啶中间体43(L＝Me或Bn)(其中R9是氢或上述大多数衍生物)可以脱甲基化或脱苄基化而产生44(其中R9是氢或上述大多数衍生物)，如方案19中所示。对于通式43的化合物(其中L＝Me)来说，脱甲基化可以用本门技术的行家所熟悉的许多方法进行。例如，43的脱甲基化可通过在一种惰性溶剂如二氯甲烷中使之与溴化氰和碳酸钾反应而产生一种氨基氰，后者可通过在回流四氢呋喃中用氢化铝锂处理、回流强酸如盐酸水溶液或用Grignard试剂如溴化甲基镁处理进行还原给出44。此外，43的脱甲基化还可以如R.Olofson等人J.Org.Chem.1984，49，2795及其参考文献中所述那样用ACE-Cl方法进行。对于通式43(其中L＝Bn)的中间体来说，苄基基团的脱除可以用还原性方法进行，其中包括在一种亲质子溶剂如甲醇中在铂或钯催化剂的存在下加氢。此外，43(L＝Bn)的脱苄基化也可以如R.Olofson等人J.Org.Chem.1984中所述那样用ACE-Cl方法进行。
方案20 螺杂环化合物45可以用许多方法制备，其中包括方案20中所述的合成。受保护哌啶47的烯丙基氧化是用本门技术的行家所熟悉的经典方法完成的(Rabjohn，N.Org.React.1976，24，261)。所生成的烯丙醇在一种惰性溶剂如苯中用亚硫酰二氯处理，提供对应的氯化物48。当D＝O或S时，烷基化是在作为溶剂的DMF或丙酮中用碳酸钾作为碱进行的，而当D＝NR9(R9＝H、烷基、芳基、酰基、磺酰基、氨基甲酸根)时，反应是在一种惰性溶剂如THF中以氢化钠作为碱进行的，给出环化前体物49。当L是一个所定义的保护基团时，化合物49可以用本门技术的行家所熟悉的许多方法环化，例如，49的环化可以通过在一种惰性溶剂如苯中与氢化三丁锡反应(Curran，D.P.Synthesis 1988，417和489)实现，而产生46。此外，化合物46(D＝NR9)也可以用方案18和19中所示的方法制备。
方案21 当D＝S时，化合物46可以用很多氧化剂氧化成亚砜47(n-1)和砜47(n＝2)(方案21)。例如，高碘酸钠经常用于亚砜合成，而OXONE则用于砜合成。保护基团的脱除提供了胺45，然后可以利用同属中间体2通过以上所示方案1和8中详细说明的化学而使之结合到生长激素促分泌素中。
方案22 通式50和通式51的螺哌啶可以用方案22中所述的合成制备。
通式53的苯并[c]吡咯酮(其中R11定义为烷基、芳基、(CH2)q-芳基或一个保护基团)或者是在商业上可得的，或者是可用文献上已知的方法从对应的邻苯二甲酰亚胺合成(例如，Bewster等人，在J.Org.Chem.，1963，28，501Mcalees等人，J.Chem.Soc.，1977，2038)。苯并[c]吡咯酮53可以在一种碱如氢化钾、二(三甲基甲硅烷基)氨化锂或钾的存在下，用受保护的二(2-卤乙基)胺(其中L是一个所定义的保护基团，如甲基、苄基、t-BOC或CBZ等，而Y可以是Cl、Br、I)进行烷基化，产生螺哌啶54。保护基团可以用以上所述步骤脱除，产生通式50。通式50中的内酰胺用氢化物如氢化铝锂还原，产生通式51。
要说明的是，实施上述反应方案的顺序并不重要，在本门技术行家的技能范围之内可以改变反应的顺序，以利于反应或避免所不要的反应产物。
一种化合物作为生长激素促分泌素的效用可以用技术上已知的方法论加以证实，例如用Smith等人Science，260，1640-1643(1993)(见其中图2的内容)所公开的试验。
双膦酸盐与生长激素促分泌素的本发明这种组合可用于钙或磷酸盐代谢失调和有关疾病的治疗性或预防性处理。这些疾病可以分成两大类1.钙盐(大部分是磷酸钙)的异常(异位)沉积、组织的病理学硬化和骨畸形。
2.可得益于骨吸收减少的状况。骨吸收减少应能改善吸收与形成之间的平衡，减少骨损或导致骨增。骨吸收减少能缓解与溶骨损害有关的疼痛，并减少这些损害的发病和/或增长。
这些疾病包括骨质疏松症(包括雌激素缺乏、固定、糖皮质激素诱发的和老年性的)，骨营养不良，佩吉特病，骨化性肌炎，别赭捷列夫病、恶性高钙血，转移性骨病，牙周病，胆石病，肾石病，尿石病，尿结石，动脉硬化(硬化症)，关节炎，粘液囊炎，神经炎和痉挛。
骨吸收增加会伴随着血浆中病理性高钙和磷酸盐浓度，本治疗会缓解这种状况。
抑制骨吸收，预防骨质疏松和增进骨折愈合的综合疗法可以用本发明双膦酸盐与生长激素促分泌素的组合来说明。双膦酸盐用于这些效用已有评论，例如，Hamdy，N.A.T.，Role of Bisphosphonatesin Metabolic Bone Diseases，Trends in Endocrinol.Metab.，4，19-25(1993)。有这些效用的双膦酸盐包括alendronate，tiludronate，二甲基-APD，risedronate，etidronate，YM-175，clodronate，pamidronate，和BM-210995，较好的双膦酸盐是alendronate。
双膦酸盐尤其pamidronate或alendronate的组合已被发现，当用于与生长激素促分泌素组合时在涉及骨吸收的疾病的治疗与预防中能提供意外效果。虽然无意涉及任何特定的操作理论，但对于减少和扭转在衷老过程即已知为骨质疏松的过程期间发生的骨损速度而言，以药物组合观察到的效应确实比其中任何一种药物单独使用所能预期的要强。具体地说，生长激素促分泌素和双膦酸盐的组合疗法提高了骨质(bone mass)。这种骨质增加可能是由于生长激素促分泌素导致生长激素/IGF-1水平提高而产生的骨更新(bone turnover)或骨形成(bone formation)增加以及双膦酸盐产生的骨吸收(boneresorption)减少的结果。骨形成和骨吸收的这样一种解偶联(uncoupling)，根据技术上的公开是不会预测到的。
本发明的一个具体实例说明是其双膦酸活性组分为4-氨基-1-羟基亚丁基-1，1-二膦酸(alendronic酸)的组合。本发明的进一步实例说明是其含有4-氨基-1-羟基亚丁基-1，1-二膦单钠盐三水合物(alendronate)的钠盐的剂量形式。研究表明，当非经肠给药时，这种化合物降低人体中与肿瘤诱发的骨病有关的高钙血的有效性比pamidronate(3-氨基-1-羟基亚丙基-1，1-二膦酸)高大约5倍，是目前销售的、可用于治疗肿瘤诱发的骨病的最强双膦酸盐。4-氨基-1-羟基亚丁基-1，1-二膦酸及其同系物，其中R1侧链是一个长度为1～5个碳原子不等且末端有一个氨基取代的N-烷基基团，可容易地按照美国专利4,407,761和4,922,007中公开的方法合成。除单钠盐、二钠盐和三钠盐外，可用于本发明的双膦酸的其它药物上可接受的盐包括铵盐、碱金属盐如钾盐，碱土金属盐如钙盐和镁盐，与有机碱形成的盐如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺盐，和与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。这些盐可以用美国专利No.4,922,077等技术上已知的方法制备。
在本发明的组合中，双膦酸盐或生长激素促分泌素可以分别给药，也可以联合给药。此外，一种要素的给药可以在另一种药剂给药之前、与其同时进行或在其后进行。
本发明的组合的各要素可以经口、非经肠(如肌内、腹膜内、静脉内或皮下注射，或植入)、经鼻、经阴道、经直肠、经舌下或经局部给药途径给药，而且可以单独或一起配制成适用剂量单位配方，其中含有适合于每种给药途径的、常用无毒的药物上可接受载体、助剂和赋形剂。
本发明化合物给药用的药物组合物可以方便地以剂量单位形式提供，而且可以用药学技术上众所周知的任何一种方法制备。所有方法都包括使活性组分与构成一种或多种辅助组分的载体相结合的步骤。一般来说，这些药物组合物的制备是使该活性组分均匀和充分地与液体载体或微细固体载体或两者混合，然后，如有必要，使产物成形为所希望的配方。在这种药物组合物中，活性标的化合物的含量要足以对疾病的过程或状况产生所希望的效果。
含有适用于经口给药的活性组分的药物组合物可以呈分立单元形式如硬胶囊或软胶囊、片剂、锭剂或糖锭，每个都含有预定量的活性组分呈可分散粉剂或颗粒剂形式；呈水液体或非水液体中的溶液剂或悬浮液剂形式；呈糖浆剂或酏剂形式；或呈水包油乳液剂或油包水乳液剂形式。打算经口使用的组合物可以按照药物组合物制造技术上已知的任何一种方法制备，这类组合物可以含有一种或多种选自由增甜剂、矫味矫臭剂、着色剂和防腐剂组成的一组的药剂，以期提供药物上精美和适口的制剂。
用于经口给药的固体剂量形式包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉末剂和颗粒剂。在这样的固体剂量形式中，活性化合物掺合了至少一种惰性的药物上可接受载体如蔗糖、乳糖或淀粉。这样的剂量形式也可以同通常实践一样含有除惰性稀释剂外的其它附加物质，例如，润滑剂如硬脂酸镁。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，这些剂量形式也可以含有缓冲剂。
含有与无毒的药物上可接受赋形剂掺合的活性组分的片剂也可以用已知方法制造。所用的赋形剂可以是，例如，(1)惰性稀释剂如碳酸钙、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；(2)造粒剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；(3)粘结剂如淀粉、明胶或阿拉伯胶；和(4)润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。这些片剂可以是无包衣的，它们也可以用已知技术包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在一段较长时间内提供持久的作用。例如，可以采用一种延时材料如甘油-硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。它们也可以用美国专利No.4,256,108、No.4,160,452和No.4,265,874中所述的技术包衣，以形成受控释放的渗透性治疗片剂。
在一些情况下，经口使用的配方可以呈硬明胶胶囊剂形式，其中活性组分混合了一种惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。它们也可以呈软明胶胶囊剂形式，其中活性组分混合了水或一种油介质，例如花生油、液体石蜡或橄榄油。
经口给药用的液体剂量形式包括药物上可接受的乳液剂、溶液剂、悬浮液剂、糖浆剂和酏剂，其中含有技术上常用的惰性稀释剂，例如水。除这样的惰性稀释剂外，组合物也可以包括辅药如润湿剂、乳化剂和悬浮剂，以及增甜剂、矫味矫臭剂和香味剂。
水悬浮液剂通常含有与适用于水悬浮液剂制造的赋形剂混合的活性材料。这样的赋形剂可以是1)悬浮剂，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶；2)分散剂或润湿剂，可以是(a)天然存在的磷脂如卵磷脂，(b)烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如硬脂酸聚氧亚乙酯，(c)环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七亚乙基氧鲸蜡醇，(d)环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的缩合产物，例如聚氧亚乙基山梨糖醇单油酸酯，或(e)环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐衍生的部分酯的缩合产物，例如聚氧亚乙基山梨糖醇酐单油酸酯。
水悬浮液剂也可以含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种矫味矫臭剂；和一种或多种增甜剂，如蔗糖或糖精。
油悬浮液剂可以通过把活性组分悬浮在一种植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或悬浮在一种矿物油如液体石蜡中来配制。油悬浮液剂可以含有一种增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加增甜剂和矫味矫臭剂，以提供一种可口的经口制剂。这些组合物可以通过添加一种抗氧剂如抗环血酸来制备。
可分散粉剂和颗粒剂适用于水悬浮液剂的制备。它们提供与一种分散剂或润湿剂、一种悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性组分。适用的分散剂或润湿剂和悬浮剂可以用上面已经提到的那些实例说明。也可以存在另外一些赋形剂，例如，上述那些增甜剂、矫味矫臭剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以呈水包油乳液剂形式。油相可以是一种植物油如橄榄油或花生油，或一种矿物油如液体石蜡或其混合物。适用的乳化剂可以是(1)天然存在的胶，如阿拉伯胶和西黄蓍胶，(2)天然存在的磷脂，如大豆和卵磷脂，(3)脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或部分酯，例如山梨糖醇酐单油酸酯，(4)所述部分酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧亚乙基山梨糖醇酐单油酸酯。这些乳液剂也可以含有增甜剂和矫味矫臭剂。
糖浆剂和酏剂可以用增甜剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配剂制。这样的配方也可以含有粘滑剂、防腐剂、矫味矫臭剂和着色剂。
药物组合物可以呈无菌可注射水状或油状悬浮液剂或溶液剂形式。悬浮液剂可以按照己知方法用以上已经提到的那些适用分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌可注射制剂也可以是一种无毒非经肠可接受稀释或溶剂中的一种无菌可注射溶液或分散液，例如，1，3-丁二醇中的一种溶液。可以采用的可接受载体和溶剂中有水、生理食盐水和等渗氯化钠溶液。此外，无菌固定油常被用作一种溶剂或悬浮介质。为此目的，可以采用任何一种温和固定油，包括合成的甘油一酯或二酯。此外，脂肪酸如油酸也可用于制备可注射剂。
按照本发明的非经肠给药制剂包括无菌水或非水溶液剂、悬浮液剂或乳液剂。非水溶剂或载体的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油和玉米油、明胶以及可注射有机酯类如油酸乙酯。这样的剂量形式也可以包含辅药如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。它们可采用，例如，通过细菌截留过滤器过滤、向组合物中加入灭菌剂、对组合物进行照射或将组合物加热等办法灭菌。它们也可以制成可在临使用前溶于无菌水或某种其它无菌可注射介质的无菌固体组合物形式。
本发明的组合也可以以直肠给药栓剂形式给药。这种组合物可按如下制备使药物与一种在常温是固体但在直肠温度是液体的适用非刺激性赋形剂混合，因而在直肠内将熔融而释放出该药物。这样的材料是可可油和聚乙二醇。
用于经鼻或经舌下给药的组合物也是用技术上众所周知的标准赋形剂制备的。
为了经局部给药，本发明的组合可以配制成液体或半液体制剂，例如搽剂、洗剂、敷剂；水包油或油包水乳液剂，例如霜剂、软膏剂、凝胶剂或膏剂，包括牙膏；或溶液剂或悬浮液剂，例如滴剂等。
本发明的药物组合物和方法可进一步包含常用于治疗上述病理学症状的其它有治疗活性化合物，例如维生素D2和D3以及羟基化衍生物，如1α-羟基维生素D3、1α-羟基维生素D2、1α，25-二羟基维生素D3、1α，25-二羟基维生素D2，降钙素(人、猪或鲑)，盔瓣霉素、氟化钠、雌性激素，和非类固醇抗炎药物，如乙酰水杨酸、消炎痛、萘普生钠和timegadine。
本发明组合物中活性组分的剂量可以改变。然而，有必要的是，活性组分的数量要使得能获得一种适用剂量形式。选择的剂量取决于所希望的疗效、取决于给药途径也取决于治疗时间长短。一般来说，双膦酸盐的剂量水平为0.001～10mg/kg体重、较好为约0.01～1.0mg/kg，即按此水平给药。为获得对骨质疏松症的有效治疗或预防，给患者给药的生长激素促分泌素剂量水平为0.0001～25mg/kg体重/日。
本发明组合也可以间歇式地给药。为了治疗或预防涉及骨吸收的疾病，可给药处于大约0.001mg～10mg/kg体重范围内的双膦酸盐典型初次经口剂量和介于0.0001～25mg/kg体重之间的生长激素促分泌素剂量，然后，如有必要，可按每周一次、每半周一次、每半月一次、每月一次，每两个月一次、每季度一次、每半年一次、每年一次或每两年一次的间隔给药大约等于初次剂量一半的单要素或双要素持久剂量本组合产物的较好化合物是按以下实例制备的。生长激素促分泌素制备的全面描述也可参阅美国专利No.3,239,345；美国专利No.4,036,979；美国专利No.4,411,890；美国专利No.5,206,235；美国专利No.5,284,841；美国专利No.5,310,737；美国专利No.5,317,017；EPO专利公开No.0,144,230；EPO专利公开No.0,513,974；PCT专利公开No.WO 94/07486；PCT专利公开No.WO 94/08583PCT专利公开No.WO 94/13696和Science，260，1640-1643(June 11，1993)。
以下实例仅为进一步说明之目的而提供，而无限制本发明精神或范围之意图。
实例11摩尔4-氨基丁酸、1.5摩尔磷酸和500ml无水氯苯的混合物加热到100℃。在此温度，在强烈搅拌下添加1.5摩尔数量的三氯化磷。混合物在100℃搅拌3小时直到完全形成密相，然后使之冷却。将固体滤出、用少量氯苯洗涤、溶解在水中。把溶液加热到沸点1小时，然后将其冷却、用活性炭脱色。将此材料滤出，用过量热甲醇使产物沉淀出来。由此得到的粗物料在20％盐酸中回流加热8小时。用蒸馏法除去盐酸，残留物用水重结晶。产物是4-氨基-1-羟基丁烷-1，1-二膦酸，呈白色结晶粉末形式，具有以下结构，如也在以下报告的性质所示
元素分析C％H％N％P％实测值 17.88 5.62 4.93 23.94产物计算值 19.28 5.26 5.64 24.86一水合物的产物计算值17.98 5.66 5.24 23.19实例23-氨基-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯]-4-基]甲基]-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺步骤A3-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-2-酮9.22g(45.6mmol)3-叠氮基-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-2-酮(用Watthey等人J.Med.Chem.，28，1511-1516(1985)的方法制备)在30ml甲醇中的溶液在1.0g 5％Pt/C的存在下在40psi(磅/英寸2)加氢4.5小时。添加硅藻土，并让混合物通过一层硅藻土过滤。将滤液浓缩，在室温静置16小时使之形成结晶。此物料用过滤法分离、真空干燥，给出4.18g(23.7mmol，52％)产物。母液用甲醇稀释到100ml，用2g木炭处理，通过硅藻土过滤，滤液真空浓缩到大约15ml。第二次收成得到2.02g产物(11.5mmol25％)。母液的另一次再循环提供0.88g(5.0mmol，11％)的第三次收成。这样，共得到7.08g(40.2mmol，88％)产物。1H NMR(200MHz，CDCl3)1.6(br s，2H)，1.80(m，1H)，2.55(m，2H)，2.88(m，1H)，3.42(dd；7Hz，11Hz；1H)，6.98(d，8Hz，1H)，7.2(m，3H)，8.3(br s，1H).FAB-MS计算值C10H12N2O 176实测值177(M+H，100％)。
步骤B3(R)-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-2-酮将2.37g(13.5mmol)3-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-2-酮(步骤A)和2.02g(13.5mmol)L-酒石酸悬浮在40ml乙醇中。混合物缓缓加热，并滴加5ml蒸馏水使之完全溶解。将溶液冷却到室温，老化过夜。所形成的固体用过滤法取出、用乙醇/二乙基醚(1∶1)洗涤、真空干燥，给出1.75g粗L-酒石酸盐。母液真空蒸发至干，再溶解于40ml水中，添加固体碳酸钾把pH调至10～11。混合物用氯仿(6×20ml)萃取，合并的萃取物用水(1x)和盐水(1x)洗涤，用碳酸钾干燥、过滤、真空脱除溶剂，给出1.29g(7.33mmol)部分富集的3(R)胺。
原来1.75g那一批L-酒石酸盐用含水乙醇重结晶两次，给出1.03g(3.17mmol，24％)纯化L-酒石酸盐，[α]D＝-212°(c＝1，H2O)。纯化L-酒石酸盐溶解在20ml水中，添加固体碳酸钾把pH调至10～11。混合物用氯防(5×10ml)萃取；合并的萃取液用水和盐水洗涤，然后用碳酸钾干燥，过滤、真空脱除溶剂，给出522mg(2.96mmol，总产率22％)3(S)胺，[α]D＝-446°(c＝1，CH3OH)。
其余1.29g(7.33mmol)部分富集的3(R)胺用1.10g(7.33mmol)D-酒石酸按以上所述处理，所得到的盐用含水乙醇重结晶2次，给出1.20g纯化D-酒石酸盐，[α]D＝-214°(c＝1，H2O)。纯化D-酒石酸盐溶解在20ml水中，按以上所述分离游离碱，给出629mg(3.57mmol，总产率26％)3(R)胺，[α]D＝+455°(c＝1，CH3OH)。
步骤C2，2-二甲基丁二酸4-甲酯溶解在200ml 0℃绝对甲醇中的2，2-二甲基琥珀酸(20g，137mmol)用2ml浓硫酸滴加处理。滴加完成后，让混合物温热到室温，搅拌16小时。
混合物真空浓缩到50ml，用200ml碳酸氢钠饱和水溶液缓缓处理。混合物用己烷(3x)洗涤，除去水层，用冰浴冷却。缓慢添加6N HCl将混合物酸化至pH2，然后用乙醚(8x)萃取。合并的萃取液用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，真空脱除溶剂。残留物在室温真空干燥，给出14.7g(91.8mmol，67％)粘稠油状物，静置时慢慢凝固。1H NMR分析指出产物是标题化合物和15％异构体2，2-二甲基丁二酸1-甲酯的混合物。标题化合物的NMR(200MHz，CDCl3)1.29(s，6H)，2.60(s，2H)，3.66(s，3H)。异构体的NMR(200MHz，CDCl3)1.28(s，6H)，2.63(s，2H)，3.68(s，3H)。
步骤D3-[苄氧碳酰胺基]-3-甲基丁酸甲酯向150ml苯中的14.7g(91.8mmol)2，2-二甲基丁二酸4-甲酯(步骤C)(其中含15％异构体1-甲酯化合物)中添加13ml三乙胺(9.4g，93mmol，1.01eq)，随后添加21.8ml二苯磷酰叠氮化物(27.8g，101mmol，1.1eq)。混合物在氮气下回流加热45分钟，然后添加19ml(19.9g，184mmol，2eq)苄醇，继续回流16小时。
混合物冷却、过滤，滤液真空浓缩到最小体积。残留物再溶解于250ml乙酸乙酯中，用水(1x)、碳酸氢钠饱和水溶液(2x)和盐水(1x)洗涤。将有机层取出，用硫酸镁干燥、过滤，滤液真空浓缩到最小体积。粗产品用硅胶柱中压液体色谱法以己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脱纯化，得到18.27g(68.9mmol，75％)浅黄色液体状标题化合物，此外还有少量纯3-[苄氧碳酰胺基]-2，2-二甲基丙酸甲酯。标题化合物的1H NMR(200MHz，CDCl3)1.40(s，6H)，2.69(s，2H)，3.63(s，3H)，5.05(s，2H)，5.22(br s，1H)，7.32(s，5H)。3-[苄氧碳酰胺基]-2，2-二甲基丙酸甲酯的1H NMR200MHz CDCl3)1.19(s，6H)，3.30(d，7Hz，2H；在CD3OD中对单重态共振坍塌)，3.67(s，3H)，5.09(s，2H)，5.22(br s，1H在CD3OD中未观察到共振)，7.3(br s，5H)。
步骤E3-苄氧碳酰胺基-3-甲基丁酸18.27g(68.9mmol)3-苄氧碳酰胺基-3-甲基丁酸甲酯(步骤D)在20ml甲醇中的溶液在室温用51ml 2N NaOH(102mmol，1.5eq)滴加处理。混合物在室温搅拌16小时，然后转移到分液漏斗中，用己烷(3x)洗涤。将水层取出、冷却到0℃，滴加6N HCl缓缓酸化到pH2(试纸)。此混合物用乙醚(6x)萃取，合并的萃取液用1N HCl和盐水洗涤，然后用硫酸镁干燥、过滤、真空脱除溶剂，给出17.26g(68.7mmol，99％)产品。1H NMR(200MHz，CDCl3)1.42(s，6H)，2.77(s，2H)，5.06(s，2H)，5.2(br s，1H)，7.3(s，5H).
步骤F3-苄氧碳酰胺基-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺在室温向252mg(1.43mmol)3(R)-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-2-酮(步骤B)的4ml二氯甲烷溶液中添加400mg(1.60mmol，1.1eq)3-苄氧碳酰胺基-3-甲基丁酸(步骤E)，随后添加760mg(1.7mmol，1.2eq)六氟磷酸苯并三唑-1-基氧三(二甲胺基)鏻和0.50ml二异丙基乙胺(380mg，2.9mmol，2eq)。在室温3小时后，混合物用30ml乙酸乙酯稀释，用5％柠檬酸水溶液、碳酸氢钠饱和水溶液(2x)和盐水洗涤。取出有机层、用硫酸镁干燥、过滤、真空脱除溶剂。残留物用硅胶柱中压液体色谱法以乙酸乙酯洗脱纯化，给出586mg(1.43mmol，100％)产品。1H NMR(200MHz，CDCl3)1.38(s，3H)，1.39(s，3H)，1.82(m，1H)，2.52(s，2H)，2.5-3.0(m，3H)，4.51(m，1H)，5.07(br s，2H)，5.57(br s，1H)，6.68(d，7Hz，1H)，6.97(d，8Hz，1H)，7.1-7.4(m，8H)，7.61(br s，1H).FAB-MS计算值C23H27N3O4409；实测值410(M+H，100％)；[a]D＝+137°(c＝1，CHCl3).
步骤G5-苯基四唑氯化锌(3.3g，24.3mmol，0.5eq)分成若干小份添加到15mlN，N-二甲基甲酰胺中，同时保持在60℃以下的温度。把氯化锌悬浮液冷却到室温，用5.0g苄腈(48.5mmol，1.0eq)处理，随后用3.2g叠氮化钠(48.5mmol，1.0eq)处理。这种非均相混合物在115℃搅拌加热18小时。混合物冷却到室温，加水(30ml)，添加5.1ml浓盐酸使混合物酸化。将混合物冷却到0℃，老化一小时，然后过滤，滤饼用15ml冷0.1N HCl洗涤，然后在60℃真空干燥，给出6.38g(43.7mmol，90％)产品。
步骤H5-苯基-2-三苯甲基四唑向5.0g(34.2mmol)5-苯基四唑的55ml丙酮悬浮液中添加5.0ml三乙胺(3.6g，35.6mmol，1.04eq)。15分钟后，添加10.0g三苯甲基氯(35.9mmol，1.05eq)的20ml四氢呋喃溶液，混合物在室温搅拌1小时。缓慢加水(75ml)，混合物在室温搅拌1小时。产品用过滤法收集、用75ml水洗涤，在60℃真空干燥，给出13.3g(34.2mmol，100％)产品。
步骤IN-三苯甲基-5-[2-(4′-甲基联苯-4-基)]四唑氯化锌(6.3g，46.2mmol，0.6eq)的35ml四氢呋喃溶液用分子筛干燥。将5-苯基-2-三苯甲基四唑(30.0g，77.3mmol，1.0eq)溶解在300ml无水四氢呋喃中，此溶液缓缓搅拌，同时交替用真空和氮气吹扫法脱气三次。把搅拌的溶液冷却到-15℃，用50.5ml1.6M正丁基锂己烷溶液(80.0mmol，1.05eq)缓缓处理，从而使温度保持在-5℃以下。使该溶液在-5～-15℃保持1.5小时，然后用干燥氯化锌溶液处理，使之回升到室温。
在一个单独的烧瓶中，把4-碘甲苯(20.17g，92.5mmol，1.2eq)和二(三苯膦)二氯化镍(II)(1.5g，2.3mmol，0.03eq)溶解在60ml四氢呋喃中，然后脱气并留在氮气氛之下。将混合物冷却到5℃，用1.5ml 3.0M甲基镁化氯四氢呋喃溶液(4.5mmol，0.06eq)以能使温度保持在10℃以下的速度处理。让溶液回升到室温，在氮气吹扫下添加到芳基锌溶液中。反应混合物在室温猛烈搅拌8小时，然后徐徐添加一种10ml冰乙酸(1.6mmol，0.02eq)的60ml四氢呋喃溶液使反应终止，添加速度要慢到能使温度保持在40℃以下。混合物再搅拌30分钟，添加150ml 80％饱和氯化钠水溶液；反应混合物萃取30分钟，使各层分离。将有机层取出，用150ml通过添加氢氧化铵而缓冲到pH＞10的80％饱和氯化钠水溶液洗涤。将有机相取出，真空浓缩到大约50ml，然后添加250ml乙腈。混合物再次真空浓缩到50ml，添加乙腈使最终体积为150ml。所形成的浆状物在5℃冷却1小时，然后过滤，用50ml冷乙腈洗涤，随后用150ml蒸馏水洗涤，滤饼风干到成为一种自由流动固体，然后进一步在50℃真空干燥12小时，得到30.0g(62.8mmol，81％)产品。1H NMR(200MHz，CDCl3)2.28(s，3H)，6.9-7.05(m，10H)，7.2-7.5(m，12H)，7.9(m，1H)。
步骤JN-三苯甲基-5-[2-(4′-溴甲基联苯-4-基)]四唑3.15g(6.6mmol)N-三苯甲基-5-[2-(4′-甲基联苯-4-基)]四唑(步骤I)的25ml二氯甲烷溶液用1.29g(7.25mmol，1.1eq)N-溴琥珀酰亚胺、80mg(0.5mmol，0.07eq)AIBN、200mg乙酸钠和200mg乙酸处理。混合物回流加热2～16小时，然后冷却、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层取出、用硫酸钠干燥、过滤，用常压蒸馏法浓缩到最小体积。添加甲基叔丁基醚，继续蒸馏直至几乎全部二氯甲烷都脱除为止，使总体积减少到大约12ml，然后添加12ml己烷。混合物在室温保持2小时，产物用过滤法分离、用己烷洗涤、然后在50℃真空干燥，给出2.81g(5.04mmol，76％)产品。1H NMR(200MHz，CDCl3)4.38(s，2H)，6.9-8.0(m，23H)。NMR指出存在着约1％起始原料和7％二溴衍生物。
步骤K3-苄氧碳酰胺基-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(N-三苯甲基)四唑-5-基][1，1′-联苯]-4-基]甲基-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺在室温，在氮气氛下，向437mg(1.07mmol)在步骤F得到的中间体的2ml无水二甲基甲酰胺溶液中添加55mg 60％氢化钠油分散液(33mg，NaH，1.38mmol，1.3eq)。15分钟后，添加715mg(1.28mmol，1.2eq)N-三苯甲基-5-[2-(4′-溴甲基联苯-4-基)]四唑(步骤J)的1.5ml无水二甲基甲酰胺溶液，混合物搅拌90分钟。
把反应混合物添加到100ml乙酸乙酯中，用水(2x)和盐水洗涤。将有机层取出、用硫酸镁干燥、过滤、真空脱除溶剂。用硅胶柱中压液体色谱法以乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱纯化，给出902mg(1.02mmol，95％)产品。1H NMR(200MHz，CDCl3)1.38(s，3H)，1.39(s，3H)，1.68(m，1H)，2.2-2.5(m，5H)，4.44(m，1H)，4.67(d，14Hz，1H)，5.06(s，2H)，5.12(d，14Hz，1H)，5.63(br 1，1H)，6.65(d，8Hz，1H)，6.9-7.5(m，31H)，7.85(m，1H).
步骤L三氟乙酸3-氨基-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯]-4-基]甲基-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基丁酰胺902mg(1.02mmol)在步骤H得到的中间体的5ml甲醇溶液在室温和一个大气压用160mg 20％Pd(OH)2/C加氢14小时。混合物通过硅藻土过滤，真空浓缩。残留物用C-18柱反相HPLC以甲醇/0.1％三氟乙酸水溶液(线性梯度在10分钟内从60％甲醇增加到80％甲醇)洗脱纯化，给出568mg(0.91mmol，89％)标题化合物。1H NMR(200MHz，CD3OD)1.33(s，3H)，1.37(s，3H)，2.0-2.6(m，6H)，4.35(dd；7，11Hz；1H)，4.86(d，15Hz，1H)，5.20(d，15Hz，1H)，7.00(d，8Hz，2H)，7.15-7.35(m，6H)，7.45-7.70(m，4H).FAB-MS计算值C29H31N7O2509；实测值510(M+H，100％).
实例33-[(2(R)-羟丙基)氨基]-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯基]-4-基]甲基]-1H-1-苯并吖庚因-3-(R)-基]丁酰胺步骤A3-[(2-(R)-苄氧丙基)氨基]-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯]-4-基]甲基]-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺，三氟乙酸盐按照美国专利No.5,206,235实例86步骤A所述的步骤，从3-氨基-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯]-4-基]甲基]-1H--1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺三氟乙酸盐(实例1)和(R)-2-苄氧丙醛(按照Hanessian和Kloss，TetrahedronLett.，26，1261-1264(1985)的步骤从D-乳酸乙酯制备)制备。1H NMR(200MHz，CD3OD)1.25(d，6Hz，3H)，1.35(s，6H)，2.11(m，1H)，2.32(m，1H)，2.5-2.7(m，4H)，2.95(m，1H)，3.17(m，1H)，3.80(m，1H)，4.40(m，1H)，4.44(d，11Hz，1H)，4.64(d，11Hz，1H)，4.90(d，15Hz，1H)，5.02(d，15Hz，1H)，6.99(d，8Hz，2H)，7.1-7.7(m，15H).FAB-MS计算值C39H43N7O3657；实测值(M+H，100％)。
步骤B3-[(2(R)-羟丙基)氨基]-3-甲基-N-[2，3，4，5-四氢-2-氧代-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)[1，1′-联苯]-4-基]甲基]-1H-1-苯并吖庚因-3(R)-基]丁酰胺，三氟乙酸盐此标题化合物是从步骤A得到的中间体，按照美国专利No.5,206,235实例86步骤B所述的步骤制备的。1H NMR(400MHz，CD3OD)1.22(d，6Hz，3H)，1.37(s，3H)，1.39(s，3H)，2.10(m，1H)，2.31(m，1H)，2.45-2.70(m，4H)，2.81(dd；10，12Hz；1H)，3.08(dd；4，12Hz；1H)，3.92(m，1H)，4.36(dd；7，11Hz；1H)，4.93(d，15Hz，1H)，5.17(d，15Hz，1H)，7.04(d，8Hz，2H)，7.19(d，8Hz，2H)，7.20-7.35(m，4H)，7.54(m，2H)，7.65(m，2H).FAB-MS计算值C32H37N7O3567；实测值568(M+H，45％).
实例4(方法1)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺步骤A1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐向1.20g(5.8mmol)1′-甲基-1，2-二氢螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶](按照H.Ong等人J.Med.Chem.23，981-986(1983)所述方法制备)的20ml无水二氯甲烷溶液中，在0℃，添加三乙胺(0.90ml；6.4mmol)和甲磺酰氯(0.49ml；6.35mmol)，搅拌30分钟。把反应混合物倾入15ml饱和碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷(2×10ml)萃取。合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，用无水碳酸钾干燥、过滤，减压脱除溶剂，得到1.44g淡黄色油状甲磺酰胺衍生物，无需纯化就可使用。
在0℃，向上述粗产品的20ml无水1，2-二氯乙烷溶液中加入10ml(9.30mmol)氯甲酸1-氯乙酯，然后在室温搅拌30分钟，最后回流1小时。将反应混合物浓缩到该体积的大约1/3，然后用20ml无水甲醇稀释，回流1.5小时。将反应混合物冷却到室温，浓缩到该体积的大约一半。将沉淀物滤出，用少量冷甲醇洗涤，这产生了1.0g白色固体状哌啶盐酸盐。滤液浓缩，添加少量甲醇，随后添加乙醚。沉淀的物料再次滤出、用冷甲醇洗涤、干燥。这给出了另外0.49g预期产品。总产率1.49g(70％)。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ7.43-7.20(m，3H)，7.10(dd，1H)，3.98(bs，2H)，3.55-3.40(bd，2H)，3.35-3.10(m，2H)，2.99(s，3H)，2.15(t，2H)，2.00(t，2H).
步骤BN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-2-甲基丙酰胺向0.35g(1.15mmol)(2R)-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-3-[2-(苯甲氧基)乙基]-1-丙酸的13ml二氯甲烷溶液中添加1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐(0.325g，1.07mmol)，0.18ml(1.63mmol)N-甲基吗啉，0.159g(1.18mmol)1-羟基苯并三唑(HOBT)，搅拌15分钟。添加EDC(0.31g，1.62mol)，继续搅拌1小时。再添加60μl N-甲基吗啉，搅拌45分钟。把反应混合物倾入5ml水中，分离有机层。有机层用5ml 0.5N盐酸水溶液和5ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。合并的有机层用无水硫酸镁干燥，浓缩得到0.627g黄色泡沫状产品，使用时无需纯化。
向0.627g(1.07mmol)上述产品的5ml二氯甲烷溶液中添加1.0ml三氟乙酸，在室温搅拌75分钟。再添加1.00ml三氟乙酸，搅拌10分钟。将反应混合物浓缩，用5.0ml二氯甲烷稀释，通过倾入10ml10％碳酸钠水溶液中小心碱化。将有机层分离，水层进一步用2×15ml二氯甲烷萃取。合并的有机层用5ml水洗涤，用碳酸钾干燥、过滤、浓缩，给出0.486g胺，呈淡黄色泡沫状，使用时无需纯化。
向0.486g(1.01mmol)胺和10ml二氯甲烷中添加0.26g(1.28mmol)2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-2-甲基丙酸，0.173g(1.28mmol)1-羟基苯并三唑(HOBT)和EDC(0.245g；1.28mol)，在室温搅拌过夜。把反应混合物倾入5.0ml水中，分离有机层。水层用5ml二氯甲烷反萃。合并的有机层用5.0ml 0.5N盐酸水溶液和5ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，浓缩，给出0.751g粗产品，呈黄色泡沫状。此粗产品的二氯甲烷溶液用25g硅胶进行色谱分离，先用己烷/丙酮/二氯甲烷(70/25/5)洗脱，然后用己烷/丙酮/二氯甲烷(65/30/5)洗脱。这给出0.63g白色固体状标题化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)化合物以旋转异构体的3∶2混合物形式存在δ7.40-7.10(m，6H)，7.06(d，1/3H)，7.02(t，1/3H)，6.90(t，1/3H)，6.55(d，1/3H)，5.15(m，1H)，4.95(bs，1H)，4.63(bd，1/3H)，4.57-4.40(m，22/3H)，4.10(bd，1/3H)，4.00(bd，1/3H)，3.82(t，1H)，3.78-3.62(m，2H)，3.60-3.50(m，1H)，3.04(q，1H)，2.87(s，1H)，2.86(s，2H)，2.80-2.60(m，1H)，1.90(bs，1H)，2.85-2.75(m，1H)，1.82-1.60(m，3H)，1.55-1.45(m，1H)，1.45(s，4H)，1.42(s，2H)，1.39(s，9H).
步骤CN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐向0.637g(0.101mmol)步骤B的中间体的5ml二氯甲烷溶液中添加2.5ml三氟乙酸，在室温搅拌30分钟。把反应混合物浓缩成油状物，用10ml乙酸乙酯收取，用8ml 10％碳酸钠水溶液洗涤。水层进一步用5ml乙酸乙酯萃取。合并的有机物用10ml水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤、浓缩，给出0.512g游离碱，呈白色泡沫状。
向0.512g游离减的5ml乙酸乙酯溶液中，在0℃添加0.2ml饱和盐酸乙酸乙酯溶液，搅拌1.5小时。白色沉淀物在氮气下滤出，用乙醚洗涤，干燥，给出0.50g白色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz，CD3OD)化合物以旋转异构体的3∶2混合物形式存在。
δ7.40-7.28(m，4H)，7.25-7.17(m，2H)，7.08(t，1/3H)，7.00(t，1/3H)，6.80(d，1/3H)，5.16(ddd，1H)，4.60-4.42(m，3H)，4.05(t，1H)，3.90(bs，2H)，3.83-3.70(m，2H)，3.30-3.15(m，1H0，2.97(s，1H)，2.95(s，2H)，2.90-2.78(m，1H)，1.96(t，1/3H)，1.85-1.65(m，4H)，1.63(s，2H)，1.60(s，4H).
实例5(方法2)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺步骤A(2R)-[[[-2-(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基]-2，2-二甲基-1-氧代乙基]胺基-2-(苯甲氧基)乙基]-1-丙酸烯丙酯从(2R)-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-3-(苯甲氧基)乙基丙酸和烯丙醇，在EDC和DMAP的存在下，在CH2Cl2中进行偶合反应制备。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25(s，5H)，5.8(m，1H)，5.2(dd，2H)，5.0(bs，1H)，4.7(m，1H)，4.6(m，2H)，4.4(dd，2H)，3.9(dd，1H)，3.6(dd，1H)，1.45(d，6H)，1.39(s，9H).
步骤B(2R)-[[[-2-(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基]-2，2-二甲基-1-氧代乙基]胺基-2-(苯甲氧基)乙基]-1-丙酸向步骤A得到的粗中间体(6.7g，15.9mmol)、四(三苯膦)钯(1.8g，0.1eq)和三苯膦(1.25g，0.3eq)的搅拌溶液中添加2-乙基己酸钾溶液(35ml，EtOAc中的0.5M溶液)。反应混合物在室温在氮气氛下搅拌1小时，然后用乙醚(100ml)稀释，倾入冰水中。分离有机层，水层用柠檬酸(20％)酸化、然后用EtOAc萃取。EtOAc萃取物用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤、蒸发，给出固体状标题化合物。1H NMR(400Hz，CD3OD)δ7.3(s，5H)，4.7(m，1H)，4.5(s，2H)，4.0(m，1H)，3.6(m，1H)，1.4(d，6H)，1.3(s，9H).
步骤CN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-2-甲基丙酰胺向1.0g(3.44mmol)1-甲磺酰螺[二氢吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐、1.44g(3.78mmol)(2R)-[[-2-(1，1-二甲基乙氧基)碳酰)胺基]-2，2-二甲基-1-氧代乙基]胺基-2-(苯甲氧基)乙基)-1-丙酸，N-甲基吗啉(0.58ml5.20mmol)和1-羟基苯并三唑(HOBT)(0.58g；3.78mmol)的50ml二氯甲烷溶液中添加EDC(1.03g；5.20mmol)，在室温搅拌16小时。反应混合物用另外50ml二氯甲烷稀释，用碳酸氢钠水溶液(50ml)洗涤，用无水硫酸镁干燥、过滤、浓缩。粗油状残留物的闪急色谱法(50g硅胶)纯化，给出2.148g(90％)无色泡沫状预期材料。1H NMR(CDCl3，400MHz)化合物以旋转异构体的3∶2混合物形式存在δ7.40-7.10(m，6H)，7.06(d，1/3H)，7.02(t，1/3H)，6.90(t，1/3H)，6.55(d，1/3H)，5.15(m，1H)，4.95(bs，1H)，4.63(bd，1/3H)，4.57-4.40(m，22/3H)，4.10(bd，1/3H)，4.00(bd，1/3H)，3.82(t，1H)，3.78-3.62(m，2H)，3.60-3.50(m，1H)，3.04(q，1H)，2.87(s，1H)，2.86(s，2H)，2.80-2.60(m，1H)，1.90(bs，1H)，2.85-2.75(m，1H)，1.82-1.60(m，3H)，1.55-1.45(m，1H)，1.45(s，4H)，1.42(s，2H)，1.39(s，9H).
步骤DN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-2-(苯甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐向2.148g(3.41mmol)步骤C得到的中间体的10ml二氯甲烷溶液中添加5ml三氟乙酸，搅拌1小时。反应混合物浓缩、用100ml 5％碳酸钠水溶液碱化、用二氯甲烷(3×50ml)萃取。合并的有机物用盐水(50ml)洗涤，用无水碳酸钾干燥、过滤、浓缩，得到一种无色泡沫体。向该泡沫体的25ml乙酸乙酯溶液中，在0℃添加4ml 1M盐酸乙酸乙酯溶液。将沉淀物滤出，先用乙酸乙酯洗涤，然后用乙酸乙酯-乙醚(1∶1)洗涤，干燥，得到1.79g(93％)无色固体状标题化合物。1H NMR(400MHz，CD3OD)化合物以旋转异构体的3∶2混合物形式存在。δ7.40-7.28(m，4H)，7.25-7.17(m，2H)，7.08(t，1/3H)，7.00(t，1/3H)，6.80(d，1/3H)，5.16(ddd，1H)，4.60-4.42(m，3H)，4.05(t，1H)，3.90(bs，2H)，3.83-3.70(m，2H)，3.30-3.15(m，1H0，2.97(s，1H)，2.95(s，2H)，2.90-2.78(m，1H)，1.96(t，1/3H)，1.85-1.65(m，4H)，1.63(s，2H)，1.60(s，4H).
实例6N-[1(R)-[1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-[3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤AN-1(R)-[1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-2-甲基丙酰胺标题化合物的制备是从(2R)-2-[(1，1-二甲基乙氧基)碳酰]胺基-4-苯基-1-丁酸和1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐用实例18步骤B所述的偶合方法进行的。粗产品是在硅胶上用5％丙酮CH2Cl2溶液纯化的。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.2(m，9H)，4.9(m，1H)，4.5(m，1H)，3.8(m，2H)，3.2(m，2H)，2.9(s，3H)，2.7(m，2H)，2.3(s，2H)，2.0(m，2H)，1.7(m，4H)，1.5(s，6H)，1.4(s，9H).
步骤BN-1(R)-[1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐其制备是从步骤A得到的中间体用实例18步骤C所述脱保护方法进行的。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.3(m，9H)，4.5(m，1H)，3.9(m，2H)，3.5(m，2H)，3.2(m，2H)，2.9(s，3H)，2.7(m，4H)，2.0(m，4H)，1.6(s，6H).
实例7用N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺和Pamidronate的组合治疗对老龄雌性大鼠的探索性9周骨研究本研究的目的是要评估N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺单独给药和与pamidronate(3-氨基-1-羟基亚丙基-1，1-双膦酸)组合给药对老龄雌性大鼠中骨的影响。本研究的时间长度是9周。N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺的给药频率是一天一次，一周7天。pamidronate的给药频率是一周一次，在该周的第一天给药。N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺的给药途径是管饲法(强制喂食，尤指经管灌入胃中-译注)。对照物是蒸馏水，载体也是蒸馏水。N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺的给药量是5ml/kg，pamidronate的给药量是1ml/kg。试验系统是Sprague-DawleyCrlCD(SD)BR品系的雌性大鼠，其研究开始时的近似年龄大于18个月，其研究开始时的近似重量为300～400g。
饲料和水中没有已知对本研究的目的和进行有干扰的沾污物。试验床(bedding)上也没有已知对本研究的目的和进行有干扰的沾污物。这些大鼠住在单个不锈钢丝笼中。剂量水平 剂量 动物数目代码雄性雌性对照1 01 0 7对照2蒸馏水07 0 8N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺[50mg/kg/日] 15 0 11Pamidronate[120μg/kg/一周一次]25 0 10N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺+Pamidronate[50mg/kg/日+120μg/kg/一周一次]35 12激素分析给药第1天对各组的非禁食大鼠从眶窦(orbital sinus)采血样(约1.5ml)，用于测定GH(生长激素)；对照组以及N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺的单独给药组或组合给药组，都在给药后15分钟采血。
给药第2周*、第9周除对照组1外对各组的非禁食大鼠从眶窦采血样(约1.5ml)，用于测定GH；对照2和N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰的单独给药组或组合给药组，都在给药后15分钟采血；对各组非禁食大鼠都在尸检时从腔静脉采血样(采血量要尽可能多，用于测定IGF-1。(*仅适用对照组1)。
生长激素水平(第1天)对照1 10ng/ml对照2 10ng/mlPamidronate 5ng/mlN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺85ng/mlN-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺+Pamidronate48ng/ml骨标记所有大鼠都接受骨标记剂(羟四环素和钙黄绿素)尸检前9天(羟四环素)和2天(钙黄绿素)。
羟四环素以25mg/kg的剂量水平经皮下注射2次(2次注射间隔约5小时)，而钙黄绿素则以15mg/kg的剂量水平经腹膜内注射。
对成骨细胞表面的影响处理％成骨细胞表面(±SEM)对照2 3.51(0.63)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺 3.91(0.73)Pamidronate 0.80(0.26)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)碳酰]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺+Pamidronate 3.05(0.36)如这些结果所指出，生长激素促分泌素使已受到双膦酸盐Pamidronate抑制的骨形成恢复到对照水平。此外，由于用生长激素促分泌素处理的结果，成骨细胞表面(骨吸收)没有差异。本研究中观察到的这些结果旨在成为可用本发明实现的意外效益的代表。
虽然本发明已参照其某些具体实施方案加以描述和说明，但那些熟悉本门技术的人员将会知道，无需背离本发明的精神和范围，就可以对程序和实验方案做各种修改、改变、改进、替代、删除或增加。例如，除以上提到的特定剂量外的其它有效剂量也可能是适用的，这是由于用以上所指出的本发明化合物对任何症状进行治疗的哺乳动物在响应上有差异的结果。同样，所观察到的特定药理学响应也可能按照且因所选择的具体活性化合物或是否有药物载体存在以及所采用的配方类型和给药方式而异，结果上的这样一些预期变化或差异也符合本发明的目的和实践。因此，意图在于，本发明是由随后的权利要求范围确定的，而且这样一些权利要求只要是合理的就要广义地加以解释。
权利要求
1.一种用于治疗骨质疏松的组合，该组合包含一种双膦酸盐和一种生长激素促分泌素。
2.权利要求1的组合，其中该双膦酸盐是通式X的化合物或其药物上可接受的盐 其中R1选自下列基团(a)未取代的或由下列基团取代的C1-C5烷基(1)NH2，(2)吡啶基，(3)吡咯基，(4)NR3R4，(b)NR5，(c)SR6，和(d)Cl；R2是H、OH或Cl；R3是H，或C1-4烷基；R4是C1-4烷基；R5是C1-10烷基；和R6是芳基。
3.权利要求1的组合，其中该双膦酸盐选自下列一组化合物或其药物上可接受的盐alendronic酸、etidronic酸、clodronic酸、pamidronic酸、tiludronic酸、risedronic酸、6-氨基-1-羟基-亚己基-双膦酸，和1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸。
4.权利要求3的组合，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐。
5.权利要求1的组合，其中该生长激素促分泌素是通式I或II的化合物或其药物上可接受的盐和各个非对映体 式I式II其中R1选自下列基团-C1-C10烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6烷基)、-C3-C7环烷基-(C1-C6烷基)、-C1-C5烷基-K-C1-C5烷基、-芳基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)、-C3-C7环烷基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)，其中K是O、S(O)m、N(R2)C(O)、C(O)N(R2)、OC(O)、C(O)O，或-CR2＝CR2-，或-C≡C-，且其中芳基基团按下面定义，R2和烷基基团可以进一步被1-9个卤素、S(O)mR2a、1-3个OR2a、或C(O)OR2a取代，芳基基团可以进一步被下列基团取代苯基、苯氧基、卤苯基、1-3个C1-C6烷基、1-3个卤素、1-2个OR2、亚甲二氧基、-S(O)mR2、1-2个CF3、-OCF3、硝基、N(R2)(R2)、N(R2)C(O)R2、-C(O)OR2、-C(O)N(R2)(R2)、-SO2N(R2)(R2)、-N(R2)S(O)2芳基，和-N(R2)SO2R2；R2选自下列基团氢、C1-C6烷基、C3-C7环烷基，且若两个C1-C6烷基出现在一个原子上，则它们可任选地连接形成一个C3-C8的环状的环，任选地含有氧、硫或NR2a；R2a是氢，或C1-C6烷基；R3a和R3b独立地选自下列基团氢、卤素、-C1-C6烷基、-OR2、氰基、OCF3、亚甲二氧基、硝基、-S(O)mR、-CF3或-C(O)OR2，且当R3a和R3b处于邻位排列时，它们可以连接形成一个C5-C8脂族环或芳族环，任选地含有1或2个选自氧、硫或氮的杂原子；R4和R5独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基，其中取代基选自1-5个卤素、1-3个羟基、1-3个C1-C10链烷酰氧基、1-3个C1-C6烷氧基、苯基、苯氧基、2-呋喃基、C1-C6烷氧羰基、-S(O)m(C1-C6烷基)；或者R4和R5可以合在一起形成-(CH2)rLa(CH2)s-，其中La是-C(R2)2-、-O-、-S(O)m-，或-N(R2)-，其中r和s独立地是1-3，且R2的定义同上；R6是氢或C1-C6烷基；A是 或 其中x和y独立地是0-3；Z是N-R2或O；R7和R7a独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、-OR2、三氟甲基、苯基、取代C1-C6烷基。其中取代基选自咪唑基、苯基、吲哚基、对羟基苯基、-OR2、1-3个氟、-S(O)mR2、C(O)OR2、-C3-C7环烷基、-N(R2)(R2)、-C(O)N(R2)(R2)或R7和R7a可独立地连接到R4和R5基团中的一个或两个上，在端部氮原子和R7或R7a基团的烷基部分之间形成亚烷基桥，其中该桥含有1-5个碳原子；B、D、E和F独立地选自下列基团-C(R8)(R10)-、-O-、C＝O、-S(O)m-、或-NR9-，使得B、D、E或F中有一个或2个可任选地不存在，以得到一个5、6或7元环；且其条件是；B、D、E、和F只有当其余的B、D、E和F基团之一同时是-O-、-S(O)m-、或-NR9时，B、D、E和F才可以是-C(R8)(R10)-或C＝O，或者B和D，或D和E合在一起可以是-N＝CR10-或-CR10＝N-，或者B和D或D和E合在一起可以是-CR8＝CR10-，其条件是其它B和E或F中之一同时是-O-、-S(O)m-，或-NR9-；R8和R10独立地选自下列基团氢、-R2、-OR2、-(CH2)q-芳基、-(CH2)q-C(O)OR2、-(CH2)q-C(O)O(CH2)q-芳基、或-(CH2)q-(1H-四唑-5-基)，其中芳基可任选地被1-3个卤素、1-2个C1-C8烷基、1-3个-OR2或1-2个-C(O)OR2取代；R9选自下列基-R2，-(CH2)q-芳基，-C(O)R2，-C(O)(CH2)q-芳基，-SO2R2，-SO2(CH2)q-芳基，-C(O)N(R2)(R2)，-C(O)N(R2)(CH2)q-芳基，-C(O)OR2，1-H-四唑-5-基，-SO3H，-SO2NHC≡N，-SO2N(R2)芳基，-SO2N(R2)(R2)，且其中(CH2)q可任选地被1-2个C1-C4烷基取代，R2和芳基可任选地进一步被下列基团取代1-3个-OR2a、-O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)OR2a、1-2个-C(O)O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)N(R2a)(R2a)、1-2个-C(O)N(R2a)(CH2)q芳基、1-5个卤素、1-3个C1-C4烷基、1，2，4-三唑基、1-H-四唑-5-基、-C(O)NHSO2R2a，-S(O)mR2a，-C(O)NHSO2(CH2)q-芳基，-SO2NHC≡N，-SO2NHC(O)R2a，-SO2NHC(O)(CH2)q芳基，-N(R2)C(O)N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q-芳基，-N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)R2a，-N(R2a)C(O)(CH2)q芳基，-OC(O)N(R2a)(R2a)，-OC(O)N(R2a)(CH2)q芳基，-SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHC(O)R11，其中W是2-6，R11可以是维生素H、芳基、或被1或2个OR2、1-2个卤素、叠氮基或硝基取代的芳基；m是0，1或2；n是1或2；q可任选地为0、1、2、3或4；且G、H、I和J是碳、氮、硫或氧原子，使得至少有一个杂原子，且G、H、I或J中之一可任选地缺少，以提供一个5元或6元芳族杂环。
6.权利要求1的组合，其中该生长激素促分泌素是通式V的化合物及其药物上可接受的盐和各个非对映体 其中R1选自下列基团 R3a是H，或氟；D选自下列基团-O-，-S-，-S(O)m-，N(R2)，NSO2(R2)，NSO2(CH2)t芳基，NC(O)(R2)，NSO2(CH2)qOH，NSO2(CH2)qCOOR2，NSO2(CH2)qC(O)-N(R2)(R2)，N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2)(CH2)wOH， 其中的芳基是苯基或吡啶基，而苯基可以被1-2个卤素取代；R2是H，或C1-C4烷基m是1，2；t是0、1或2；q是1，2，或3；w是2，3，4，5，或6。
7.权利要求1的组合，其中该生长激素促分泌素选自下列一组的化合物或其药物上可接受的盐1)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；2)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基羰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；3)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-苯基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氢基-2-甲基-丙酰胺；4)N-[1(R)-[(3，4-二氢-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；5)N-[1(R)-[(2-乙酰基-1，2，3，4-四氢-螺[异喹啉-4，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；6)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；7)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺甲磺酸盐8)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2(2′，6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；9)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；10)N-[1(S)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；11)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；12)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；13)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；14)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；15)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺16)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-(2-乙氧羰基)甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；17)N-[1(R)-[1，2-二氢-1，1-二氧杂螺[3H-苯并噻吩-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺。
8.权利要求1的组合，其中该双膦酸盐是alendronic酸或pamidronic酸，或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺或其药物上可接受的盐。
9.权利要求1的组合，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺或其药物上可接受的盐。
10.一种用于治疗骨质疏松的药物组合物，该药物组合物包含一种双膦酸盐和一种生长激素促分泌素的组合，以及一种惰性载体。
11.权利要求10的药物组合物，其中该双膦酸盐是通式X的化合物或其药物上可接受的盐 其中R1选自下列基团(a)未取代的或由下列基团取代的C1-C5烷基(1)NH2，(2)吡啶基，(3)吡咯基，(4)NR3R4，(b)NR5，(c)SR6，和(d)Cl；R2是H、OH或Cl；R3是H，或C1-4烷基；R4是C1-4烷基；R5是C1-10烷基；和R6是芳基。
12.权利要求10的药物组合物，其中该双膦酸盐选自下列一组化合物或其药物上可接受的盐alendronic酸、etidronic酸、clodronic酸、pamidronic酸、tiludronic酸、risedronic酸、6-氨基-1-羟基-亚己基-双膦酸，和1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸。
13.权利要求12的药物组合物，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐。
14.权利要求10的药物组合物，其中该生长激素促分泌素是通式I或II的化合物或其药物上可接受的盐和各个非对映体 式I 式II其中R1选自下列基团-C1-C10烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6烷基)、-C3-C7环烷基-(C1-C6烷基)、-C1-C5烷基-K-C1-C5烷基、-芳基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)、-C3-C7环烷基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)，其中K是O、S(O)m、N(R2)C(O)、C(O)N(R2)、OC(O)、C(O)O，或-CR2＝CR2-，或-C≡C-，且其中芳基基团按下面定义，R2和烷基基团可以进一步被1-9个卤素、S(O)mR2a、1-3个OR2a、或C(O)OR2a取代，芳基基团可以进一步被下列基团取代苯基、苯氧基、卤苯基、1-3个C1-C6烷基、1-3个卤素、1-2个OR2、亚甲二氧基、-S(O)mR2、1-2个CF3、-OCF3、硝基、N(R2)(R2)、N(R2)C(O)R2、-C(O)OR2、-C(O)N(R2)(R2)、-SO2N(R2)(R2)、-N(R2)S(O)2芳基，和-N(R2)SO2R2；R2选自下列基团氢、C1-C6烷基、C3-C7环烷基，且若两个C1-C6烷基出现在一个原子上，则它们可任选地连接形成一个C3-C8的环状的环，任选地含有氧、硫或NR2a；R2a是氢，或C1-C6烷基；R3a和R3b独立地选自下列基团氢、卤素、-C1-C6烷基、-OR2、氰基、OCF3、亚甲二氧基、硝基、-S(O)mR、-CF3或-C(O)OR2，且当R3a和R3b处于邻位排列时，它们可以连接形成一个C5-C8脂族环或芳族环，任选地含有1或2个选自氧、硫或氮的杂原子；R4和R5独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基，其中取代基选自1-5个卤素、1-3个羟基、1-3个C1-C10链烷酰氧基、1-3个C1-C6烷氧基、苯基、苯氧基、2-呋喃基、C1-C6烷氧羰基、-S(O)m(C1-C6烷基)；或者R4和R5可以合在一起形成-(CH2)rLa(CH2)s-，其中La是-C(R2)2-、-O-、-S(O)m-，或-N(R2)-，其中r和s独立地是1-3，且R2的定义同上；R6是氢或C1-C6烷基；A是 或 其中x和y独立地是0-3；Z是N-R2或O；R7和R7a独立地选自下列基团氨、-C1-C6烷基、-OR2、三氟甲基、苯基、取代C1-C6烷基，其中取代基选自咪唑基、苯基、吲哚基、对羟基苯基、-OR2、1-3个氟、-S(O)mR2、C(O)OR2、-C3-C7环烷基、-N(R2)(R2)、-C(O)N(R2)(R2)或R7和R7a可独立地连接到R4和R5基团中的一个或两个上，在端部氮原子和R7或R7a基团的烷基部分之间形成亚烷基桥，其中该桥含有1-5个碳原子；B、D、E和F独立地选自下列基团-C(R8)(R10)-、-O-、C＝O、-S(O)m-、或-NR9-，使得B、D、E或F中有一个或2个可任选地不存在，以得到一个5、6或7元环；且其条件是；B、D、E、和F只有当其余的B、D、E和F基团之一同时是-O-、-S(O)m-、或-NR9时，B、D、E和F才可以是-C(R8)(R10)-或C＝O，或者B和D，或D和E合在一起可以是-N＝CR10-或-CR10＝N-，或者B和D或D和E合在一起可以是-CR8＝CR10-，其条件是其它B和E或F中之一同时是-O-、-S(O)m-，或-NR9-R8和R10独立地选自下列基团氢、-R2、-OR2、-(CH2)q-芳基、-(CH2)q-C(O)OR2、-(CH2)q-C(O)O(CH2)q-芳基、或-(CH2)q-(1H-四唑-5-基)，其中芳基可任选地被1-3个卤素、1-2个C1-C8烷基、1-3个-OR2或1-2个-C(O)OR2取代；R9选自下列基-R2，-(CH2)q-芳基，-C(O)R2，-C(O)(CH2)q-芳基，-SO2R2，-SO2(CH2)q-芳基，-C(O)N(R2)(R2)，-C(O)N(R2)(CH2)q-芳基，-C(O)OR2，1-H-四唑-5-基，-SO3H，-SO2NHC≡N，-SO2N(R2)芳基，-SO2N(R2)(R2)，且其中(CH2)q可任选地被1-2个C1-C4烷基取代，R2和芳基可任选地进一步被下列基团取代1-3个-OR2a、-O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)OR2a、1-2个-C(O)O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)N(R2a)(R2a)、1-2个-C(O)N(R2a)(CH2)q芳基、1-5个卤素、1-3个C1-C4烷基、1，2，4-三唑基、1-H-四唑-5-基、-C(O)NHSO2R2a，-S(O)mR2a，-C(O)NHSO2(CH2)q-芳基，-SO2NHC≡N，-SO2NHC(O)R2a，-SO2NHC(O)(CH2)q芳基，-N(R2)C(O)N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q-芳基，-N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)R2a，-N(R2a)C(O)(CH2)q芳基，-OC(O)N(R2a)(R2a)，-OC(O)N(R2a)(CH2)q芳基，-SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHC(O)R11，其中W是2-6，R11可以是维生素H、芳基、或被1或2个OR2、1-2个卤素、叠氮基或硝基取代的芳基m是0，1或2；n是1或2；q可任选地为0、1、2、3或4；且G、H、I和J是碳、氮、硫或氧原子，使得至少有一个杂原子，且G、H、I或J中之一可任选地缺少，以提供一个5元或6元芳族杂环。
15.权利要求10的药物组合物，其中该生长激素促分泌素是通式V的化合物及其药物上可接受的盐和各个非对映体 其中R1选自下列基团 R3a是H，或氟；D选自下列基团-O-，-S-，-S(O)m-，N(R2)，NSO2(R2)，NSO2(CH2)t芳基，NC(O)(R2)，NSO2(CH2)qOH，NSO2(CH2)qCOOR2，NSO2(CH2)qC(O)-N(R2)(R2)，N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2)(CH2)wOH， 行 其中的芳基是苯基或吡啶基，而苯基可以被1-2个卤素取代；R2是H，或C1-C4烷基；m是1，2；t是0、1或2；q是1，2，或3；w是2，3，4，5，或6；
16.权利要求10药物组合物，其中该生长激素促分泌素选自下列一组的化合物或其药物上可接受的盐1)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；2)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基羰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；3)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-苯基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；4)N-[1(R)-[(3，4-二氢-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺5)N-[1(R)-[(2-乙酰基-1，2，3，4-四氢-螺[异喹啉-4，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；6)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；7)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺甲磺酸盐8)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2(2′，6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺9)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；10)N-[1(S)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；11)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；12)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；13)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；14)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；15)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；16)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-(2-乙氧羰基)甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；17)N-[1(R)-[1，2-二氢-1，1-二氧杂螺[3H-苯并噻吩-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺。
17.权利要求10的药物组合物，其中该双膦酸盐是alendronic酸或pamidronic酸，或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；或其药物上可接受的盐。
18.权利要求10的药物组合物，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺或其药物上可接受的盐。
19.一种治疗骨质疏松的方法，方法包括对需要这种治疗的患者施用有效量的由双膦酸盐和生长激素促分泌素组成的组合。
20.权利要求19的方法，其中该双膦酸盐是下面通式的化合物或其药物上可接受的盐 其中R1选自下列基团(a)未取代的或由下列基团取代的C1-C5烷基(1)NH2，(2)吡啶基，(3)吡咯基，(4)NR3R4，(b)NR5，(c)SR6，和(d)Cl；R2是H、OH或Cl；R3是H，或C1-4烷基；R4是C1-4烷基R5是C1-10烷基；和R6是芳基。
21.权利要求19的方法，其中该双膦酸盐选自下列一组化合物或其药物上可接受的盐alendronic酸、etidronic酸、clodronic酸、pamidronic酸、tiludronic酸、risedronic酸、6-氨基-1-羟基-亚己基-双膦酸，和1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸。
22.权利要求21的方法，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐。
23.权利要求19的方法，其中该生长激素促分泌素是通式I或II的化合物或其药物上可接受的盐和各个非对映体 式I 式II其中R1选自下列基团-C1-C10烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6烷基)、-C3-C7环烷基-(C1-C6烷基)、-C1-C5烷基-K-C1-C5烷基、-芳基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)、-C3-C7环烷基(C0-C5烷基)-K-(C1-C5烷基)，其中K是O、S(O)m、N(R2)C(O)、C(O)N(R2)、OC(O)、C(O)O，或-CR2＝CR2-，或-C≡C-，且其中芳基基团按下面定义，R2和烷基基团可以进一步被1-9个卤素、S(O)mR2a、1-3个OR2a、或C(O)OR2a取代，芳基基团可以进一步被下列基团取代苯基、苯氧基、卤苯基、1-3个C1-C6烷基、1-3个卤素、1-2个OR2、亚甲二氧基、-S(O)mR2、1-2个CF3、-OCF3、硝基、N(R2)(R2)、N(R2)C(O)R2、-C(O)OR2、-C(O)N(R2)(R2)、-SO2N(R2)(R2)、-N(R2)S(O)2芳基，和-N(R2)SO2R2；R2选自下列基团氢、C1-C6烷基、C3-C7环烷基，且若两个C1-C6烷基出现在一个原子上，则它们可任选地连接形成一个C3-C8的环状的环，任选地含有氧、硫或NR2a；R2a是氢，或C1-C6烷基；R3a和R3b独立地选自下列基团氢、卤素、-C1-C6烷基、-OR2、氰基、OCF3、亚甲二氧基、硝基、-S(O)mR、-CF3或-C(O)OR2，且当R3a和R3b处于邻位排列时，它们可以连接形成一个C5-C8脂族环或芳族环，任选地含有1或2个选自氧、硫或氮的杂原子；R4和R5独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基，其中取代基选自1-5个卤素、1-3个羟基、1-3个C1-C10链烷酰氧基、1-3个C1-C6烷氧基、苯基、苯氧基、2-呋喃基、C1-C6烷氧羰基、-S(O)m(C1-C6烷基)；或者R4和R5可以合在一起形成-(CH2)rLa(CH2)s-，其中La是-C(R2)2-、-O-、-S(O)m-，或-N(R2)-，其中r和s独立地是1-3，且R2的定义同上；R6是氢或C1-C6烷基；A是 或 其中x和y独立地是0-3Z是N-R2或O；R7和R7a独立地选自下列基团氢、-C1-C6烷基、-OR2、三氟甲基、苯基、取代C1-C6烷基，其中取代基选自咪唑基、苯基、吲哚基、对羟基苯基、-OR2、1-3个氟、-S(O)mR2、C(O)OR2、-C3-C7环烷基、-N(R2)(R2)、-C(O)N(R2)(R2)或R7和R7a可独立地连接到R4和R5基团中的一个或两个上，在端部氮原子和R7或R7a基团的烷基部分之间形成亚烷基桥，其中该桥含有1-5个碳原子；B、D、E和F独立地选自下列基团-C(R8)(R10)-、-O-、C＝O、-S(O)m-、或NR9，使得B、D、E或F中有一个或2个可任选地不存在，以得到一个5、6或7元环；且其条件是；B、D、E、和F只有当其余的B、D、E和F基团之一同时是-O-、-S(O)m-、或-NR9时，B、D、E和F才可以是-C(R8)(R10)-或C＝O，或者B和D，或D和E合在一起可以是-N＝CR10-或-CR10＝N-，或者B和D或D和E合在一起可以是-CR8＝CR10-，其条件是其它B和E或F中之一同时是-O-、-S(O)m-，或-NR9-；R8和R10独立地选自下列基团氢、-R2、-OR2、-(CH2)q-芳基、-(CH2)q-C(O)OR2、(CH2)q-C(O)O(CH2)q-芳基、或-(CH2)q-(1H-四唑-5-基)，其中芳基可任选地被1-3个卤素、1-2个C1-C8烷基、1-3个-OR2或1-2个-C(O)OR2取代；R9选自下列基-R2，-(CH2)q-芳基，-C(O)R2，-C(O)(CH2)q-芳基，-SO2R2，-SO2(CH2)q-芳基，-C(O)N(R2)(R2)，-C(O)N(R2)(CH2)q-芳基，-C(O)OR2，1-H-四唑-5-基，-SO3H，-SO2NHC≡N，-SO2N(R2)芳基，-SO2N(R2)(R2)，且其中(CH2)q可任选地被1-2个C1-C4烷基取代，R2和芳基可任选地进一步被下列基团取代1-3个-OR2a、-O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)OR2a、1-2个-C(O)O(CH2)q芳基、1-2个-C(O)N(R2a)(R2a)、1-2个-C(O)N(R2a)(CH2)q芳基、1-5个卤素、1-3个C1-C4烷基、1，2，4-三唑基、1-H-四唑-5-基、-C(O)NHSO2R2a，-S(O)mR2a，-C(O)NHSO2(CH2)q-芳基，-SO2NHC≡N，-SO2NHC(O)R2a，-SO2NHC(O)(CH2)q芳基，-N(R2)C(O)N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q-芳基，-N(R2a)(R2a)，-N(R2a)C(O)R2a，-N(R2a)C(O)(CH2)q芳基，-OC(O)N(R2a)(R2a)，-OC(O)N(R2a)(CH2)q芳基，-SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHC(O)R11，其中W是2-6，R11可以是维生素H、芳基、或被1或2个OR2、1-2个卤素、叠氮基或硝基取代的芳基；m是0，1或2；n是1或2；q可任选地为0、1、2、3或4；且G、H、I和J是碳、氮、硫或氧原子，使得至少有一个杂原子，且G、H、I或J中之一可任选地缺少，以提供一个5元或6元芳族杂环。
24.权利要求19的方法，其中该生长激素促分泌素是通式V的化合物及其药物上可接受的盐和各个非对映体 其中R1选自下列基团 R3a是H，或氟；D选自下列基团-O-，-S-，-S(O)m-，N(R2)，NSO2(R2)，NSO2(CH2)t芳基，NC(O)(R2)，NSO2(CH2)qOH，NSO2(CH2)qCOOR2，NSO2(CH2)qC(O)-N(R2)(R2)，N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2)(CH2)wOH， 其中的芳基是苯基或吡啶基，而苯基可以被1-2个卤素取代；R2是H，或C1-C4烷基；m是1，2；t是0、1或2q是1，2，或3w是2，3，4，5，或6；
25.权利要求19的方法，其中该生长激素促分泌素选自下列一组的化合物或其药物上可接受的盐1)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；2)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基羰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺3)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-苯基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；4)N-[1(R)-[(3，4-二氢-螺[2H-1-苯并吡喃-2，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；5)N-[1(R)-[(2-乙酰基-1，2，3，4-四氢-螺[异喹啉-4，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；6)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；7)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺甲磺酸盐；8)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2(2′，6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；9)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；10)N-[1(S)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；11)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；12)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；13)N-[1(R)-[(1，2-氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；14)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；15)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰-5-氟螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(5-氟-1H-吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；16)N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-(2-乙氧羰基)甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(1H-吲哚--3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；17)N-[1(R)-[1，2-二氢-1，1-二氧杂螺[3H-苯并噻吩-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺。
26.权利要求19的方法，其中该双膦酸盐以0.001-10mg/kg体重的剂量给药，而生长激素促分泌素以0.0001-25mg/kg体重的剂量给药。
27.权利要求26的方法，其中双膦酸盐以0.01-1.0mg/kg体重的剂量给药。
28.权利要求19的方法，其中该双膦酸盐是alendronic酸或pamidronic酸，或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺；或其药物上可接受的盐。
29.权利要求19的方法，其中该双膦酸盐是alendronic酸或其药物上可接受的盐，而该生长激素促分泌素是N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲基磺酰螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基-丙酰胺或其药物上可接受的盐。
全文摘要
双膦酸盐与生长激素促分泌素组合，减轻了老年患者中骨质疏松症的有害影响。
文档编号A61K31/675GK1136278SQ94194311
公开日1996年11月20日 申请日期1994年10月18日 优先权日1993年10月19日
发明者B·J·葛茨, G·A·罗丹, R·G·史密斯, M·J·乌威拉特, A·A·帕特切特 申请人:麦克公司