专利名称：金属硫蛋白在制备治疗复发性口腔溃疡药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于一种药品，特别是涉及一种以金属硫蛋白(MT)有效成分在制备治疗复发性口腔溃疡药物中的应用。
金属硫蛋白(Metallothionein，简称MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。自1957年首次发现以来，经过近四十年的研究，现已知MT广泛存在于动、植物和真核微生物中，并在许多生命活动中发挥着重要作用。MT的生理功能主要包括三个方面1、毒理学重要性已经肯定MT对镉、铂等重金属有很强的解毒作用;2、生理学重要性MT参与调节生物体必需的微量元素Zn、Cu的代谢;3、清除自由基MT通过其富含的巯基，可有效地清除·OH自由基(MT与·OH的反应速度比SOD快1万倍)，从而参与维持体内的自由基平衡，并可防护辐射损伤。85年以前，对MT的研究主要集中在(1)诱导、分离和纯化;(2)分子结构;(3)重金属解毒;(4)基因调控和MT基因的启动子在基因工程中的应用。近年来，越来越多的研究开始集中在MT的生理功能，尤其是MT与疾病的发生及治疗的关系方面，日本已有相关专利平1-17234所公开的是一种用MT抗胃溃疡药剂，平3-141228所公开的是一种用MT抗心肌梗塞的治疗剂。另外还有报导认为MT具有抗癌和抗肝炎的作用。但是，关于MT与口腔粘膜疾病的发生、发展关系，迄今国际、国内均无报道。
复发性口腔溃疡(RecurrentOralAphthousUlcer，简称ROU)是一种最常见多发的口腔粘膜病，一般人群罹患率高达20%，在我国每年至少有2亿人患ROU。而迄今关于ROU病因的研究，主要涉及以下几个方面a、微量元素和维生素研究人员从不同方面探讨了锌、硒、铜、铁、锰、钙、镁等微量元素和维生素C、E与ROU的关系，发现缺锌导致口腔粘膜病。所以认为补锌是治疗ROU不可忽视的辅助疗法。但用单纯的锌剂治疗ROU，症状虽有改善，却仍会复发。
b、免疫一些报道表明，ROU的大多数患者的免疫功能低下，据此设计的以免疫调接剂或促进剂疗法，如单纯疱疹疫苗注射及多抗甲素局部应用，起到了比较好的疗效。但近来的研究表明，ROU患者的免疫球蛋白并无明显改变，病程也与免疫球蛋白无关，因此对ROU是“自身免疫性疾病”的观点提出了质疑。
c、细菌传统观点认为口腔是含有多种细菌的生物环境，在有坏死纤维素渗出的溃疡表面，细菌可与炎症成分相互作用，并可侵入组织内。细菌则通过其毒性作用加剧炎症和疼痛，也可刺激机体的免疫系统引起体液和细胞免疫反应。但对细菌与ROU病因学的关系，缺乏充足的证据。国外也仅认为细菌可能对ROU起一定作用。而临床上一直惯用的抗菌、消炎药物如碘制剂(华素片)、溶菌酯片、抗生素等，对ROU的治疗效果并不明显。
d、血液流变学ROU与微循环及血液流变学变化的关系是近年来引人注目的新课题。最新研究结果表面ROU病变与微小血管内血速度下降及血栓形成有密切的关系，并根据现代自由基生物学理论，认为体内清除氧自由基(0·OH)的活性物质的功能低下，血液中的过氧化脂质水平升高是造成微循环障碍的主要原因。令人振奋的是有报道用对超氧阴离子自由基具有强清除能力的超氧化物歧化酶(SOD)药膜贴敷患处，可有效地加速组织的愈合。用在机体氧化还原反应中起传递电子作用的辅酶QIO治疗ROU也观察到显著的疗效。
分析上述各种对ROU有一定疗效的制剂的机理，不难发现，均与自由基损伤机理有密切关系，锌是SOD的必需成分，缺锌会使SOD活性下降，并使MT合成量减少。硒是H2O2酶的必需成分，缺硒使该酶失活。至于维生素C、E也是已知的良好的自由基清除剂。而免疫功能低下的病人，也常伴随着体内清除氧自由基的能力下降，至于细菌在口腔中的滋生，很可能是溃疡的结果，而不是原因。
最新医学成果表明，复发性口腔溃疡(ROU)的最直接病因是体内清除氧自由基的物质的活性低下，血管内脂质过氧化水平升高，粘膜局部微血管循环发生障碍而引起的。而MT是迄今所知的内源性氧自由基清除剂中能力最强的一种(大约是SOD的1万倍)。同时MT对氧自由基引起的脂质过氧化损伤具有很强的抑制和修复作用。所以本发明的目的在于进一步开发金属硫蛋白的新的药用功能，使用金属硫蛋白为有效成分治疗复发性口腔溃疡。
本发明的目的是通过以下方案实现的以金属硫蛋白为有效成分用来治疗复发性口腔溃疡的药物可制成口含片或药膜剂等，口含片或药膜剂的含量及制备方法为(1)、口含片成分重量百分比(%)锌金属硫蛋白0.1-2.0硫酸锌2.5-5.0维生素C5.0-10.0蔗糖粉68.0-76.0淀粉10.0-15.0硬脂酸镁0.5-1.0食用色素微量(＜0.01%)薄荷脑0.1-0.5
将以上成分磨细，用80目筛子过筛，混匀后采用普通湿法制粒、压片、烘干，即为成品;
(2)、药膜剂成分重量百分比(%)锌金属硫蛋白0.1-2.0硫酸锌2.5-5.0维生素C5.0-10.0聚乙烯醇75-80甲基纤维素钠10-15以上成分加入蒸馏水混匀，压膜即为成品。
金属硫蛋白具有极强的清除氧自由基的能力，能对由氧自由基引起的脂质过氧化损伤起到抑制和修复作用，从而有效地解除复发性口腔溃疡的局部微循环障碍，促进溃疡的愈合。使用本品后，疼痛感立即减轻，愈合时间大大缩短，且复发周期相对延长。
下面对以金属硫蛋白为主要成分在治疗复发性口腔溃疡药物中的应用做具体详尽的说明。
一、MT的提取工艺给家兔皮下注射ZnSO4诱导体内合成MT，取肝脏匀浆，经乙醇一氯仿混合液萃取，经高速离心，乙醇沉淀以后，再经Sephadex凝胶分离，得到混合型MT。进一步经DEAE阴离子交换剂拆分为MT1和MT2，经脱盐、冷冻、干燥后即为纯品。
二、MT剂型的配制以MT为主要成分的用来治疗复发性口腔溃疡的药物可有不同的剂型。可制成口含片、也可制成药膜剂等，口含片及药膜剂的含量及制备方法如下实施例1口含片采用锌金属硫蛋白(ZnMT)1%、硫酸锌4%、维生素C9%、玉米淀粉12%，蔗糖粉73%、薄荷脑0.3%、硬脂酸镁0.7%，食用色素微量，＜0.01%。将以上成分磨细，80目筛子过筛混匀后，用普通湿法制粒、压片、烘干、即为成品。
实施例2药膜剂采用锌金属硫蛋白ZnMT1%，硫酸锌4%、维生素C9%，聚乙烯醇75%、甲基纤维素钠11%、以上成分加蒸馏水，混匀，压膜。
三、毒理结果以本品按4mgMT/kg体重给子鼠口服灌胃(相当于人用量的400倍)，并连续观察7天，结果小鼠全部健康存活且体重增加，由眼观察未见明显毒性反应。
四、MT临床应用结果经过87例复发性口腔溃疡患者的观察治疗，结论如下用药后疼痛感立即明显减轻，按3-5片/日剂量连续用药(每片含ZnMT0.1mg)对轻度溃疡，溃疡完全愈合，平均时间为3至4天，对重度溃疡(溃疡面多于4个)，愈合时间约7-10天。与碘制剂对比，愈合时间明显缩短。显效率98%，显著有效率90%，使用此药的病人中仅一人属重度患病，治疗后基本无效。
治疗结果表明，由于MT在制备治疗复发性口腔溃疡的药物中加入了硫酸锌和维生素C两种成分，协同作用使得对口腔溃疡的疗效大为增加，用时增加了制剂的抗氧化稳定性。
权利要求
1.金属硫蛋白在制备治疗复发性口腔溃疡药物中的应用，其特征在于以金属硫蛋白为有效成分用来治疗复发性口腔溃疡的药物可制成口含片、药膜剂等，口含片、药膜剂的含量及制备方法为(1)口含片成分重量百分比(%)锌金属硫蛋白0.1-2.0硫酸锌2.5-5.0维生素C5.0-10.0蔗糖粉68.0-76.0淀粉10.0-15.0硬脂酸镁0.5-1.0食用色素微量(＜0.01%)薄荷脑0.1-0.5将以上成分磨细，用80目筛子过筛，混匀后，采用普通湿法制粒、压片、烘干、即为成品；(2)药膜剂成分重量百分比(%)锌金属硫蛋白0.1-2.0硫酸锌2.5-5.0维生素C5.0-10.0聚乙烯醇75-80甲基纤维素钠10-15以上成分加蒸馏水混匀，压膜即为成品。
全文摘要
本发明属于一种药品，涉及一种以金属硫蛋白在制备治疗复发性口腔溃疡药物中的应用，以金属硫蛋白为有效成分用来治疗复发性口腔溃疡的药物可制成口含片或药膜剂。由于金属硫蛋白具有极强的清除氧自由基的能力，能对由氧自由基引起的脂质过氧化损伤起到抑制和修复作用，从而有效地解除复发性口腔溃疡的局部微循环障碍，促进溃疡的愈合。使用本品后，疼痛感立即减轻，愈合时间大大缩短，复发周期相对延长。
文档编号A61K38/16GK1111530SQ95103689
公开日1995年11月15日 申请日期1995年4月14日 优先权日1995年4月14日
发明者张保林 申请人:张保林, 北京实验动物研究中心